NOMO-1 Suspended人白血病细胞系

"NOMO-1 Suspended人白血病细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过高时，易造成培养基中细胞碎片增多，黑渣子增多，常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化，对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化，细胞密度过高超过80%时，采用分步消化法。胰酶储存在-20°C，解冻在4°C进行，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于-20°C，避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低，并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤：消化过度细胞碎片增多，黑渣子增多，细胞会成片脱落，严重影响细胞活性，并有部分细胞漂浮，随弃去的胰酶流失；消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下，反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同，胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度，是否含EDTA，胰酶的储存时间，胰酶的储存温度，是否反复冻融，消化加入的胰酶体积，消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞，建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间，可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆，记录消化时间，下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NOMO-1 Suspended人白血病细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
C3H10T1/2细胞系相关产品：NCIH1573细胞、PCI-04B细胞、HCEpiC细胞
MRCV细胞系相关产品：NCI-H524细胞、BEP2D细胞、D-283细胞
Nthy ori 3.1细胞系相关产品：SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞
细胞传代方法：１：２传代；
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SK Mel 2细胞系相关产品：VK2细胞、H.Ep. No. 2细胞、GH3细胞
TE3A细胞系相关产品：U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞
Murine Carcinoma-38细胞系相关产品：SNU-739细胞、95-D细胞、87MG细胞
细胞生长特性：贴壁生长
NOMO-1 Suspended人白血病细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
几种实验室细胞培养基成分的作用：１)NaHCO３的作用是什么？与CO２一起形成缓冲系统，保持培养基PH值稳定；２)酸钠的作用是什么？酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为５０mM，-２０℃保存，培养基中的终浓度为１mM；３)加入HEPES有何好处？培养基中最常用的Buffer system是碳酸盐，它可提供营养，但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer，加入HEPES能使细胞培养基在PH７.２-７.６条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为１M，常温保存。培养基中的终浓度为２５mM，即５ml １M的Hepes加入到２００ml完全培养基中；４)红的作用是什么？红在培养基中被用来作为PH值指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色；５)谷酰胺的作用是什么？几乎所有的细胞对谷酰胺都有胶高的要求。谷酰胺脱掉基后，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定，应置-２０℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基４度冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷酰胺。试验操作中常配制高浓度(１００倍)的谷酰胺溶液(１ml/支)，分装使用，-２０℃保存。使用时，每支１ml的谷酰胺加入到９９ml完全培养基中，使其终浓度为２mM培养基。
H-1688细胞系相关产品：MDA330细胞、LLC-PK-1细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞
MDA-MB-435-S细胞系相关产品：Kit225-K6细胞、NTERA2D1细胞、Hs 737.T细胞
WIL2-S细胞系相关产品：COLO 824细胞、TH1细胞、HRPEpiC细胞
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NOMO-1 Suspended人白血病细胞系
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Jijoye细胞系相关产品：D283细胞、SRA 01/04细胞、Mo 59J细胞
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