CCD-33Co Adherent人结肠成纤维细胞系

"CCD-33Co Adherent人结肠成纤维细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：成纤维细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
CCD-33Co Adherent人结肠成纤维细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
MGH-U1 (EJ)细胞系相关产品：Lewis lung carcinoma line 1细胞、HBL-100细胞、H1436细胞
16HBEo-细胞系相关产品：NCIH3255细胞、MH7A细胞、aNK细胞
BEL7404细胞系相关产品：Detroit562细胞、LNCaP FGC细胞、SACC83细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Tu177细胞系相关产品：CMT64细胞、Mhh-Call 2细胞、HPDE细胞
NCIH1770细胞系相关产品：J45.01细胞、293 F细胞、Kasumi 1细胞
IALM细胞系相关产品：DMS273细胞、COS7细胞、C28/I2细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
CCD-33Co Adherent人结肠成纤维细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
传代细胞培养注意事项：１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。体内细胞培养及其操作步骤：瘤细胞悬液接种１)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０(７)～１０(８)/ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml/部位，＞１０(６)细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，最后固定为一个相对稳定的时间。腹水瘤的建立与腹水瘤的接种：将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下：１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１×１０(６)腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７-１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３-５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。
NCTC 929细胞系相关产品：Panc02.03细胞、HPMEC细胞、S3 HeLa细胞
LA-N-5细胞系相关产品：Merwin Plasma Cell tumor-11细胞、NIH:OVCAR-8细胞、LAD-2细胞
OACP4C细胞系相关产品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、EOC 20细胞、NB-4细胞
GM05887细胞系相关产品：RBL.2H3细胞、H-209细胞、ZR75_1细胞
BNL CL2细胞系相关产品：BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞
PC-3M-2B4细胞系相关产品：GBC-SD细胞、HUT125细胞、Jurkat77细胞
Huh-7.5.1细胞系相关产品：L-cells细胞、NPA87细胞、SMA-560细胞
UCLA-SO-M20细胞系相关产品：HCC-2935细胞、Henrietta Lacks cells细胞、BC-3H-1细胞
Leghorn Male Hepatoma cell line细胞系相关产品：2V6.11细胞、P-19细胞、COR-L 105细胞
SJ-Rh 30细胞系相关产品：LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞
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Monomac-1细胞系相关产品：H2228细胞、Panc 10.05细胞、SUM190细胞
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DR2R 1610细胞系相关产品：GNM细胞、DLD 1细胞、Panc2_03细胞
7860细胞系相关产品：HPAF II细胞、IMR90细胞、RS411细胞
NIH/3T3细胞系相关产品：MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞
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HT 144细胞系相关产品：CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞
130 T细胞系相关产品：H2106细胞、3396细胞、MDAMB231细胞
2PK3细胞系相关产品：NIH 3T6细胞、Lewis-Lung细胞、NTERA2D1细胞
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T-98G细胞系相关产品：COLO 320DM细胞、TC7细胞、MV-522细胞
Hs895T细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、SK-N-AS细胞、MOLP2细胞
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P31 FUJ细胞系相关产品：MDA-MB453细胞、PAMC82细胞、NT2/D1细胞
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A-172细胞系相关产品：SK Mel 2细胞、HPAF-2细胞、KALS-1细胞
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H-2196细胞系相关产品：HTori 3细胞、PANC3.27细胞、C1R细胞
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HOS (TE85)细胞系相关产品：H4-IIE-C3细胞、HT-1080细胞、PANC-08-13细胞
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