BALB/3T3 clone A31 Adherent小鼠胚胎成纤维细胞系

"BALB/3T3 clone A31 Adherent小鼠胚胎成纤维细胞系
细胞背景资料：胚胎；成纤维；自发永生；雄性；BALB/c
细胞形态：成纤维细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
BALB/3T3 clone A31 Adherent小鼠胚胎成纤维细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。
Jurkat-77细胞系相关产品：Human fetal lung fibroblast 1细胞、CP-70细胞、686LN-M4e细胞
P3HR1-BL细胞系相关产品：Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞
SUNE-1细胞系相关产品：D10G41细胞、SCC 15细胞、Hs822T细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PLA802细胞系相关产品：CaES-17细胞、HS-5细胞、CCD-19Lu细胞
LLC-WRC 256细胞系相关产品：HuNS1细胞、HEEpiC细胞、MHCC-LM3细胞
MDBK细胞系相关产品：ECC10细胞、U-hth74细胞、HBZY1细胞
细胞生长特性：贴壁
BALB/3T3 clone A31 Adherent小鼠胚胎成纤维细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍：１)CO２培养箱：CO２培养箱是细胞培养的必备仪器，它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境，如适宜的温度、湿度、酸碱度、O２浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染，因此，CO２培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要；２)烘箱(干燥箱)：用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时，烘箱内温度一般要达到１６０℃以上，通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至１００℃时，停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门，以免骤冷导致玻璃器皿破裂，应等温度自然下降至１００℃以下后可开门。３)超净工作台/生物安全柜：细胞培养对无菌环境要求很高，在细胞操作时，一般需要在１００级空气质量条件下进行，因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。４)液氮罐：为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此环境中，一般细胞可以保存十年具有活性。５)超低温冰箱：细胞的冻存过程需要一系列程序降温，一般４℃下存放３０min，转放-２０℃ １ hour，再转入-７０至-８０℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-１９６℃)，这时就必须配备一台-８６℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞，可暂时放于超低温冰箱保存。６)恒温水浴：从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于３７℃水浴中快速复苏之后才传代培养，因此，恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。７离心机：细胞培养需要离心收集传代细胞，所以需要配置低速的常温离心机，对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。除上述仪器外，移液器、高压灭菌锅、倒置显微镜、荧光显微镜也是细胞培养的必备仪器，发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
J 82细胞系相关产品：RK-13细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、REC细胞
GCT细胞系相关产品：BRL-3A细胞、M1细胞、EFM-192B细胞
OCI-Ly1细胞系相关产品：THPI细胞、Mahlavu细胞、HCC1500细胞
Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品：SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞
CC-LP-1细胞系相关产品：HCC-2279细胞、TE-11细胞、HEC1B细胞
KMM-1细胞系相关产品：MCF12F细胞、RPMI 2650细胞、CCRFCEM细胞
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Jiyoye(P-2003)细胞系相关产品：Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、ECC1细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞
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L615细胞系相关产品：GM02132C细胞、KOSC-2细胞、Earles's cells细胞
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COLO829细胞系相关产品：HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞
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WM266细胞系相关产品：KE-39细胞、NTERA2-cloneD1细胞、293EBNA细胞
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Centre Antoine Lacassagne-51细胞系相关产品：LWnt-3A细胞、HT 1197.T细胞、SRA01/04细胞
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Ej138细胞系相关产品：Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
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HT55细胞系相关产品：SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞
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SUDHL-8细胞系相关产品：SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞
SU-DHL2细胞系相关产品：HCoEpiC细胞、Oka-C1细胞、TMD8细胞
TCCPAN2细胞系相关产品：HLEC细胞、QGP-1细胞、OP9细胞
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MUTZ-1细胞系相关产品：SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞
GM03569细胞系相关产品：UCLA NPA-87-1细胞、NCIH3255细胞、BV2细胞
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