"RL-65 Adherent大鼠肺上皮细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
传代24h-48h处于对数期的细胞,在冻存前24h换液;按照常规方法消化,离心,收集细胞沉淀;用血清重悬细胞沉淀,用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数;配制细胞冻存液,将冻存液加到细胞液中,吹打混匀,控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml;将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记好的冻存管中,旋紧管盖;将冻存管放入程序冻存盒中,冻存盒立即移至-80°C冰箱中,过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳,会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存,冻存前一天细胞进行换液;消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率;冻存细胞时为按照温度梯度进行操作,会严重影响细胞活率。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
RL-65 Adherent大鼠肺上皮细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
TE13细胞系相关产品:H1944细胞、GM05372细胞、CT26.CL25细胞
KBM-7细胞系相关产品:KY-50细胞、GS-9L细胞、SK-N-MC细胞
Ramos-RA1细胞系相关产品:H-740细胞、H2052_MM细胞、870细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LN-18细胞系相关产品:SLK细胞、RH30SJ细胞、WM 266-4细胞
RCCJF细胞系相关产品:HSC-1细胞、UMUC1细胞、CLONE M3细胞
MTEC1细胞系相关产品:HCC-1833细胞、Vero 76 clone E6细胞、HS-294细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
RL-65 Adherent大鼠肺上皮细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
几种实验室细胞培养基成分的作用:1)NaHCO3的作用是什么?与CO2一起形成缓冲系统,保持培养基PH值稳定;2)酸钠的作用是什么?酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为50mM,-20℃保存,培养基中的终浓度为1mM;3)加入HEPES有何好处?培养基中最常用的Buffer system是碳酸盐,它可提供营养,但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer,加入HEPES能使细胞培养基在PH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为1M,常温保存。培养基中的终浓度为25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培养基中;4)红的作用是什么?红在培养基中被用来作为PH值指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色;5)谷酰胺的作用是什么?几乎所有的细胞对谷酰胺都有胶高的要求。谷酰胺脱掉基后,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷酰胺。试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分装使用,-20℃保存。使用时,每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培养基中,使其终浓度为2mM培养基。
STO细胞系相关产品:NCIH1092细胞、WEHI3B细胞、H-146细胞
SW-1222细胞系相关产品:SEG1细胞、GTL 16细胞、RCK-8细胞
EFM-192C细胞系相关产品:C-33A细胞、MDAPC2B细胞、293-H细胞
HUCEC细胞系相关产品:RKO细胞、SUD-4细胞、HT-29/CX-1细胞
SUM149细胞系相关产品:KBM7细胞、PA317细胞、SP-2/0-AG14细胞
NALM-6-M1细胞系相关产品:HCC-15细胞、KRCY细胞、LAD 2细胞
DF1细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、H838细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞
A375.S2细胞系相关产品:DMS-153细胞、NH6细胞、NOZAWA细胞
SkMel31细胞系相关产品:CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞
H2085细胞系相关产品:Epstein-Barr-1细胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、H1618细胞
U-138 MG细胞系相关产品:NCIH196细胞、A549/DDP细胞、VMRCRCZ细胞
aTC1-6细胞系相关产品:WM115mel细胞、P31FUJ细胞、RCC-4细胞
MeWo细胞系相关产品:OCI-Ly3细胞、HBVSMC细胞、OPM-2细胞
RL-65 Adherent大鼠肺上皮细胞系
HCC95细胞系相关产品:RN-c细胞、Neuro-2a细胞、SV-HUC细胞
526细胞系相关产品:SK-RC-52细胞、LUDLU-1细胞、H548细胞
Swiss-3T3细胞系相关产品:H-1688细胞、Capan2细胞、HCC1395细胞
Swiss-3T3细胞系相关产品:H-1688细胞、Capan2细胞、HCC1395细胞
769P细胞系相关产品:AHH1细胞、AU-565细胞、H-1770细胞
MLA-144细胞系相关产品:H-1963细胞、WEHI 231细胞、P3X63Ag8653细胞
HBVSMC细胞系相关产品:CAL-27细胞、Kelly细胞、OCI AML4细胞
SW1573细胞系相关产品:JEKO细胞、MOLM-16细胞、Hs1.Tes细胞
MDA-134细胞系相关产品:CV1细胞、OACP4C细胞、LLC细胞
PTK-1细胞系相关产品:H2052细胞、CFPAC细胞、MuM-2B细胞
KYSE410细胞系相关产品:PTK-1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、WPE-int细胞
LLC-MK2细胞系相关产品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、PC3细胞、L-M (TK-)细胞
B16-F10--RED细胞系相关产品:3T3(A31)细胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞、HO-8910PM细胞
MNNG-HOS细胞系相关产品:OCI-LY-3细胞、GB1细胞、TMD-8细胞
SW-1573细胞系相关产品:MDBK (NBL-1)细胞、IM 9细胞、NR 8383细胞
GM05862细胞系相关产品:H-1404细胞、Hs695T细胞、OVCA-433细胞
Hs 683细胞系相关产品:RDES细胞、Hs606细胞、HuH-6细胞
BE2C细胞系相关产品:H.Ep.-2细胞、DLD1细胞、LA4细胞
SCL-2细胞系相关产品:BNCL-2细胞、LNCaP subline C4-2细胞、PIG3细胞
PA-1细胞系相关产品:Becker细胞、NUGC-2细胞、NCIH1819细胞
KYSE 30细胞系相关产品:P3HR1细胞、EA.Hy926细胞、PCI-04B细胞
OS-732细胞系相关产品:6T-CEM细胞、H-EMC-SS细胞、M-1细胞
HCC-15细胞系相关产品:MRMT-1细胞、Swiss 3T3细胞、OCI-Ly1细胞
PGBE1细胞系相关产品:Simpson细胞、Clone 15 HL-60细胞、C6661细胞
GM02132C细胞系相关产品:HR-8348细胞、GLC82细胞、MC57G细胞
IBRS-2细胞系相关产品:Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞
IHH细胞系相关产品:HS5细胞、Jurkat-E6细胞、LPC-H12细胞
SK RC 52细胞系相关产品:RCC-10细胞、NCI-BL2141细胞、H-322细胞
FET细胞系相关产品:CTLL-2细胞、N-Tera-2细胞、H-1563细胞
U266-B1细胞系相关产品:PANC0403细胞、SK-MEL-5细胞、Super Tube细胞
624 MEL细胞系相关产品:SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞
SUM 102PT细胞系相关产品:H660细胞、BC-009细胞、SK-LU-1细胞
OVCA5细胞系相关产品:PANC-10-05细胞、ML2细胞、MDA-MB-134-VI细胞
SNU-668细胞系相关产品:Mac-1细胞、EU-4细胞、NCI-H660细胞
Hs 839.T细胞系相关产品:NCI-H661细胞、HEK 293细胞、HEK293-A细胞
alphaTC1 Clone 6细胞系相关产品:CCRF.CEM细胞、HBE135-E6E7细胞、ZR-75-1细胞
HCC0038细胞系相关产品:U-373MG细胞、Hs688(A)T细胞、J-774细胞
Hs604T细胞系相关产品:TSCCa细胞、P3X63细胞、GA-10 clone 4细胞
BL-6细胞系相关产品:CAL62细胞、Hs729细胞、HemECs细胞
RDES细胞系相关产品:RC-4B/C细胞、CD 18细胞、BT 549细胞
RWPE2细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、DMS 153细胞、SCLC21H细胞
P388-D1细胞系相关产品:SCL-I细胞、SU8686细胞、CoCL3细胞
RL-65 Adherent大鼠肺上皮细胞系
CDC/EU.HMEC-1细胞系相关产品:NCIH2227细胞、SKN-SH细胞、NCI-H209细胞
COLO 357细胞系相关产品:MB-49细胞、PC 61-5-3细胞、AR42J细胞
MOLP-2细胞系相关产品:NCI-H157细胞、H-510A细胞、HCC-2935细胞
HT 115细胞系相关产品:SBC5细胞、H2171细胞、KYSE520细胞
A-498细胞系相关产品:Raji细胞、HBSMC细胞、A2780/CP细胞
TSCC1细胞系相关产品:SW-756细胞、M4e细胞、HuP-T4细胞
Sarcoma OSteogenic-2细胞系相关产品:8305C_1细胞、MZ-CRC-1细胞、MC116细胞
H-498细胞系相关产品:NHRF细胞、SNU368细胞、COLO 320 DM细胞
UMUC3细胞系相关产品:JJN3细胞、hTERT-RPE1细胞、Rat Lung-65细胞
HS-294-T细胞系相关产品:HSAEC1-KT细胞、NCI-H358细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞
CD18/HPAF细胞系相关产品:NB-9细胞、SuperTube细胞、H-1770细胞
EFM-192C细胞系相关产品:C-33A细胞、MAVER-1细胞、T 98 G细胞
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