HCC-44 Adherent人肺癌细胞系

"HCC-44 Adherent人肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HCC-44 Adherent人肺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
NHLF细胞系相关产品：149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞
MEF细胞系相关产品：OKAC1细胞、SNT-8细胞、C8-D1A细胞
GB1细胞系相关产品：COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
U-87-MG细胞系相关产品：MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞
H1048细胞系相关产品：IGROV1细胞、HT55细胞、NL20细胞
FAT细胞系相关产品：Dunn LM8细胞、IPLB-SF 21AE细胞、H1650_CO细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
HCC-44 Adherent人肺癌细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：１)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；２)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；３)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，３７度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。
H-2107细胞系相关产品：rUCMSCs细胞、HDQP1细胞、H-1688细胞
SMC-1细胞系相关产品：GM07404A细胞、FRTL5细胞、Caki-2细胞
MHCCLM3细胞系相关产品：HCC0095细胞、H2110细胞、SNU-719细胞
Hs888 Lu细胞系相关产品：NE-4C细胞、NTERA-2 cl.D1细胞、Ca9-22细胞
THLE2细胞系相关产品：7860细胞、SCC90细胞、SNK-6细胞
CHL细胞系相关产品：Panc-03.27细胞、MALME.3M细胞、SUDHL-8细胞
NCI-SNU-520细胞系相关产品：SUM-159细胞、H-2029细胞、NCIH1770细胞
Rca-B细胞系相关产品：GT39细胞、MDA-MB 231细胞、NCI-H1792细胞
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SEG-1细胞系相关产品：H-1522细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞、AR4-2J细胞
Jurkat FHCRC细胞系相关产品：SCC-1395细胞、KMY1022细胞、SNK6细胞
CAL27细胞系相关产品：MDA MB 231细胞、R.K.13细胞、TO175T细胞
HEM-L细胞系相关产品：Z310细胞、SU.86.86细胞、ECC-12细胞
HCC-44 Adherent人肺癌细胞系
H650细胞系相关产品：K1细胞、SK HEP 01细胞、RLE-6TN细胞
NCI.H522细胞系相关产品：PG-4 (S+L-)细胞、GM03573A细胞、NS1-1 Ag4.1细胞
IGROV-1细胞系相关产品：G361细胞、PC-9/GR细胞、RPE-1细胞
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SKRC-42细胞系相关产品：H-1618细胞、Ra No. 1细胞、NK-92MI细胞
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Panc-3_27细胞系相关产品：WiDr细胞、SUIT 2细胞、PC3M-2B4细胞
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CCD-1112sk细胞系相关产品：Renal Carcinoma细胞、Vertebral Cancer of the Prostate细胞、H727细胞
MEF (CF-1)细胞系相关产品：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞
U-hth74细胞系相关产品：MEL-526细胞、HuT-78细胞、P3HR1细胞
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COLO206F细胞系相关产品：TC7细胞、INS1细胞、MonoMac6细胞
HEK (AD293)细胞系相关产品：WI 38细胞、HT 1197细胞、BAEC细胞
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OVCA433细胞系相关产品：EC-9706细胞、JCA-1细胞、NCI-H2029细胞
Tn5B1-4细胞系相关产品：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、B16/F10细胞、RCC10RGB细胞
BT-549细胞系相关产品：H719细胞、Karpas-422细胞、Dami细胞
H-1819细胞系相关产品：5637细胞、SKNDZ细胞、OCI-Ly3细胞
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VMRC-RCZ细胞系相关产品：SW-839细胞、H-358细胞、Panc02.03细胞
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H-889细胞系相关产品：NCI-H1930细胞、NS-I/1细胞、SCL-1细胞
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MILE SVEN 1细胞系相关产品：AN3 CA细胞、Ha Fe细胞、GM04154细胞
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V79-1细胞系相关产品：MM96L细胞、Capan1细胞、HEY-A8细胞
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