"EFM-192B Adherent人乳腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过高时，易造成培养基中细胞碎片增多，黑渣子增多，常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化，对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化，细胞密度过高超过80%时，采用分步消化法。胰酶储存在-20°C，解冻在4°C进行，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于-20°C，避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低，并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤：消化过度细胞碎片增多，黑渣子增多，细胞会成片脱落，严重影响细胞活性，并有部分细胞漂浮，随弃去的胰酶流失；消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下，反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同，胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度，是否含EDTA，胰酶的储存时间，胰酶的储存温度，是否反复冻融，消化加入的胰酶体积，消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞，建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间，可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆，记录消化时间，下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
EFM-192B Adherent人乳腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
SW-13细胞系相关产品：B35细胞、RH35细胞、MCF-7B细胞
EVSA/T细胞系相关产品：OCI/AML-5细胞、NCI-H196细胞、A9细胞
HuPT4细胞系相关产品：MC-38细胞、Loucy细胞、SJSA1细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
H2196细胞系相关产品：LA-N-6(OAN)细胞、MC/CAR细胞、IGR-OV1细胞
COLO-205细胞系相关产品：NCI-H1105细胞、COV 434细胞、NMCG-1细胞
TCC Sup细胞系相关产品：Hs 695.T细胞、OCI-Ly01细胞、OCILY10细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
EFM-192B Adherent人乳腺癌细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。传代细胞培养操作步骤：１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２-５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２-３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。
ROS 17/28细胞系相关产品：A-427细胞、BpRcl细胞、Ly19细胞
aNK细胞系相关产品：OVCA8细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞、NALM-6-M1细胞
Hep-3B细胞系相关产品：Hs445细胞、T24细胞、HOS/MNNG细胞
HS-294T细胞系相关产品：HF-91细胞、Hep 2细胞、LIXC002细胞
MOVAS细胞系相关产品：SUM159PT细胞、KHYG细胞、M-O7e细胞
alphaTC1 Clone 6细胞系相关产品：CCRF.CEM细胞、HBE135-E6E7细胞、ZR-75-1细胞
CL40细胞系相关产品：HEK-293H细胞、Immortal Pig Intestinal-2I细胞、B16BL-6细胞
HTR-8/SV-neo细胞系相关产品：T24细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H1666_DA细胞
HOC1细胞系相关产品：LIXC-002细胞、H1092细胞、OVCA420细胞
H-1930细胞系相关产品：PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞
HCC2108细胞系相关产品：BNCL2细胞、MXI细胞、SW1783细胞
SEM细胞系相关产品：LTEP-a2细胞、OC-3-VGH细胞、WM115细胞
16-HBEo细胞系相关产品：Normal Rat Kidney-49F细胞、OSC-19细胞、NCIH1915细胞
EFM-192B Adherent人乳腺癌细胞系
MESSA细胞系相关产品：M109细胞、KYSE-70细胞、L1210细胞
Hk-2细胞系相关产品：B5537SKIN细胞、BT20细胞、PC-10细胞
K562/ADR细胞系相关产品：LCMS细胞、PG-4细胞、HSC-I细胞
L-Wnt-3A细胞系相关产品：MC3T3-E细胞、A-172细胞、RPMI-1788细胞
HuCCT-1细胞系相关产品：T-98细胞、AR-42J细胞、RPMI1788细胞
OCLY8细胞系相关产品：PF-382细胞、Hs940T细胞、U251MG细胞
HS-729细胞系相关产品：Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、SKNMC细胞、RPMI 6666细胞
IOSE80细胞系相关产品：NCI-H69C细胞、Jurkat E6-1细胞、MGECs细胞
MOLT-4细胞系相关产品：HEL92.1.7细胞、RGC-5细胞、SNU668细胞
YES2细胞系相关产品：MDAMB175细胞、WM2664细胞、H-295R细胞
LU451细胞系相关产品：J82 COT细胞、NCI-H1238细胞、MRC 5细胞
CT 26细胞系相关产品：NCI/ADR-RES细胞、CMT 64细胞、GM-346细胞
NB-9细胞系相关产品：LYR细胞、HEM细胞、HEK-AD 293细胞
Anip973细胞系相关产品：WI-38细胞、COLO-320-DM细胞、MDCKII细胞
SW954细胞系相关产品：KNS81细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞、HCC15细胞
MDBK细胞系相关产品：ECC10细胞、U-hth74细胞、HBZY1细胞
EA.Hy926细胞系相关产品：NCI-H1770细胞、SCCVII细胞、P36细胞
MOLT 3细胞系相关产品：BC-009细胞、OAW-42细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞
F442A细胞系相关产品：TO 175.T细胞、H23细胞、SN12-PM6细胞
MDA-MB-330细胞系相关产品：U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞
Capan-2细胞系相关产品：H-1341细胞、NOR 10细胞、NG10815细胞
Hs 766细胞系相关产品：SUM52PE细胞、A172细胞、HF-91细胞
NOZC-1细胞系相关产品：F442A细胞、MFE-280细胞、Hs 636.T细胞
A-704细胞系相关产品：CEM C7细胞、HCV29细胞、NCI-H676B细胞
HCC 38细胞系相关产品：NCTC1469细胞、Ku812细胞、NCI-H2171细胞
NCI-H1781细胞系相关产品：253JBV细胞、NHEK细胞、ESC-410细胞
NCI-SNU-520细胞系相关产品：SUM-159细胞、H-2029细胞、NCIH1770细胞
Me-Wo细胞系相关产品：CEM细胞、HO1-N-1细胞、SW837细胞
UMC11细胞系相关产品：U-373-MG细胞、KRC/Y细胞、NTERA-2 cl.D1细胞
JHH-2细胞系相关产品：MRC-9细胞、LP1细胞、IM95细胞
CHL-IU细胞系相关产品：KU-812-F细胞、SK-BR3细胞、QGY-7703细胞
H3255细胞系相关产品：RCC-4细胞、KP4细胞、KU-812F细胞
RCS细胞系相关产品：A375细胞、GM17219细胞、PANC3.27细胞
WiDrTC细胞系相关产品：SNU-251细胞、H-1954细胞、CHO-K1细胞
EBC-1细胞系相关产品：HCMEC细胞、Institute for Medical Research-32细胞、NCI-H650细胞
H6c7细胞系相关产品：Y-1细胞、253JB-V细胞、LL/2细胞
SNU16细胞系相关产品：CAL39细胞、FL 62891细胞、RIN14B细胞
GP2d细胞系相关产品：CCD19Lu细胞、GM2131细胞、GM637细胞
KMS18细胞系相关产品：NS20-Y细胞、UCLA NPA-87-1细胞、JHH-7细胞
HCT 8细胞系相关产品：KNS42细胞、P-388D1细胞、WEHI 231细胞
NCIH2106细胞系相关产品：GM03190细胞、RCF细胞、MN 60细胞
OVCA433细胞系相关产品：EC-9706细胞、JCA-1细胞、NCI-H2029细胞
EFM-192B Adherent人乳腺癌细胞系
RCC4细胞系相关产品：KM933细胞、NCI-SNU-423细胞、HEK 293-F细胞
LIM1215细胞系相关产品：HCC44细胞、HL60细胞、MDAMB468细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞系相关产品：H-676B细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞、RIN-m 14B细胞
HK2细胞系相关产品：OCI-Ly 10细胞、2E8细胞、H-4-II-E细胞
CT26-clone 25细胞系相关产品：MRCV细胞、Hce8693细胞、SF 539细胞
Chang liver细胞系相关产品：COS-7细胞、IB-RS2细胞、L-6TG细胞
KLE细胞系相关产品：Chinese Hamster Ovary细胞、T-CAM2细胞、Madison lung细胞
SUIT-2细胞系相关产品：K1735细胞、GalK 1细胞、HLCL9B10细胞
OVCAR-4细胞系相关产品：WML2细胞、MBT2细胞、H-2591细胞
HS-294T细胞系相关产品：HF-91细胞、A172细胞、NOMO-1细胞
OVCAR 433细胞系相关产品：COLO394细胞、RBL2H3细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞
HEP3B2细胞系相关产品：Hos TE-85细胞、L-6细胞、RGB细胞
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