"COLO 824 Adherent人乳腺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
COLO 824 Adherent人乳腺癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞培养无菌操作的演示:凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌,继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处,使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自来水刷洗,除去灰尘。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干:12小时后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清洁液浸泡12小时,然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次,最后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。烘干、包装:洗干净后先烘干,然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒:包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子,打开开关和安全阀,当蒸气成直线上升时,关闭安全阀,当指针指向15磅时,维持20-30分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清洁液(酸液),12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗),再用蒸馏水冲洗3次。烘干、包装:洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
KASUMI6细胞系相关产品:NCIH1435细胞、OCI/AML-3细胞、RMG1细胞
E.L.4细胞系相关产品:HEL9217细胞、HEL299细胞、SVHUC细胞
Jurkat E6.1细胞系相关产品:H-1869细胞、H2291细胞、NCI522细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCMEC(BL12-H)细胞系相关产品:OVCAR10细胞、NCI-H1404细胞、AMO-1细胞
OV 2008细胞系相关产品:FOXNY细胞、HFF-1细胞、NCI-H78细胞
BxPC-3细胞系相关产品:RPMI-7666细胞、M 1细胞、H-345细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
COLO 824 Adherent人乳腺癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
几种实验室细胞培养基成分的作用:1)NaHCO3的作用是什么?与CO2一起形成缓冲系统,保持培养基PH值稳定;2)酸钠的作用是什么?酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为50mM,-20℃保存,培养基中的终浓度为1mM;3)加入HEPES有何好处?培养基中最常用的Buffer system是碳酸盐,它可提供营养,但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer,加入HEPES能使细胞培养基在PH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为1M,常温保存。培养基中的终浓度为25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培养基中;4)红的作用是什么?红在培养基中被用来作为PH值指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色;5)谷酰胺的作用是什么?几乎所有的细胞对谷酰胺都有胶高的要求。谷酰胺脱掉基后,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷酰胺。试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分装使用,-20℃保存。使用时,每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培养基中,使其终浓度为2mM培养基。
Human podocyte细胞系相关产品:L(TK-)细胞、ECC12细胞、Daoy细胞
TYK-nu细胞系相关产品:SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞
MOLM13细胞系相关产品:CAL 85-1细胞、HCC-1954BL细胞、Hep-3B细胞
Tu-686细胞系相关产品:HEK-AD 293细胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、ROS 17/2.8细胞
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IOSE-Mar细胞系相关产品:4T1-A细胞、GM02132细胞、SEG1细胞
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Nittby-Salford 1细胞系相关产品:FAK+/+细胞、H-1522细胞、Dx5细胞
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Vero from pool #76细胞系相关产品:TM-3细胞、DoTc2 4510细胞、HCE-2 [50.B1]细胞
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NCI-H2052细胞系相关产品:KYSE 180细胞、H22细胞、16HBE140细胞
MC3T3-E细胞系相关产品:SK-RC-42细胞、LNCaP细胞、FLC7细胞
IMR32细胞系相关产品:Tu686细胞、TE8细胞、266 Bl细胞
Reuber H35细胞系相关产品:TC-1[JHU-1]细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、JM细胞
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RFL-6细胞系相关产品:SNUC2B细胞、PG13细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞
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MNNG/HOS Clone F-5细胞系相关产品:SJSA1细胞、DHL-16细胞、GM02131A细胞
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293-GP细胞系相关产品:SHG 44细胞、SKES1细胞、Panc2.03细胞
MV(4;11)细胞系相关产品:PC12(高分化)细胞、WISH细胞、451-LU细胞
RL95-2细胞系相关产品:Clone 166细胞、GM03570细胞、Molm 13细胞
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KLE细胞系相关产品:Chinese Hamster Ovary细胞、T-CAM2细胞、Madison lung细胞
SK-N-AS细胞系相关产品:FDCP-1细胞、NCI N87细胞、CCRF细胞
H-1672细胞系相关产品:PC3M细胞、Calu-3细胞、SK MEL 28细胞
BJAB细胞系相关产品:COLO 320 DM细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞、tdott细胞
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FU-OV-1细胞系相关产品:NCIH526细胞、MDA-MB-231-GFP细胞、U-CH1细胞
AU565细胞系相关产品:BV2细胞、COLO-741细胞、RL-952细胞
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