"ECV-304 Adherent人脐静脉内皮细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过高时,易造成培养基中细胞碎片增多,黑渣子增多,常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化,对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化,细胞密度过高超过80%时,采用分步消化法。胰酶储存在-20°C,解冻在4°C进行,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于-20°C,避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低,并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤:消化过度细胞碎片增多,黑渣子增多,细胞会成片脱落,严重影响细胞活性,并有部分细胞漂浮,随弃去的胰酶流失;消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下,反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同,胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度,是否含EDTA,胰酶的储存时间,胰酶的储存温度,是否反复冻融,消化加入的胰酶体积,消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞,建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间,可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆,记录消化时间,下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
ECV-304 Adherent人脐静脉内皮细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
常见培养细胞预防污染的有效措施:体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手:1)添加抗生素:各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果好,预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性,且对细胞本身也有一定影响,因此为避免诱导抗药细菌,应定期更换培养系统中的抗生素,或尽可能不用抗生素处理;2)从物品、用品消毒灭菌着手:细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增大,滤膜破损的可能性增加,故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作:75%的酒精搽拭培养箱后,使用可移动的紫外灯至少消毒30min,加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制300ml的饱和酸铜加3L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。
SUM-52细胞系相关产品:AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞
TE 32.T细胞系相关产品:SF 767细胞、WEHI-3B细胞、C1498细胞
H-1954细胞系相关产品:OV 1063细胞、ZR75_1细胞、C-Lu65细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
ST细胞系相关产品:HGF-1细胞、THPI细胞、RGM-1细胞
ST细胞系相关产品:HGF-1细胞、THPI细胞、RGM-1细胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞系相关产品:SW-1088细胞、NK92-MI细胞、HAEC细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
ECV-304 Adherent人脐静脉内皮细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。传代细胞培养操作步骤:1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2-5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2-3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。
3T3-A31细胞系相关产品:RBE细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、SupB15WT细胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞系相关产品:GH3细胞、DrG细胞、Hs 819.T细胞
HFL 1细胞系相关产品:MIA Paca2细胞、Panc 04.03细胞、HCC-1937细胞
B16 F10细胞系相关产品:A-704细胞、253JBV细胞、LNCaP subline C4-2细胞
HL 60细胞系相关产品:SW 948细胞、B-104细胞、RERFLCMS细胞
PNT-1A细胞系相关产品:SV40 MES 13细胞、A9 (Hamprecht)细胞、GMK,BSC-1细胞
HepaRG细胞系相关产品:Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞
RTMC细胞系相关产品:PL 45细胞、J-111细胞、KMH-2细胞
NCI H929细胞系相关产品:SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞
CL40细胞系相关产品:HEK-293H细胞、Immortal Pig Intestinal-2I细胞、B16BL-6细胞
SW 1116细胞系相关产品:WM239A细胞、PF382细胞、MCF-12A细胞
RS(4;11)细胞系相关产品:Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、MUTZ1细胞、THLE2细胞
HLEC-B3细胞系相关产品:MOLT 16细胞、BN-CL2细胞、MTEC1细胞
ECV-304 Adherent人脐静脉内皮细胞系
GM00637H细胞系相关产品:A101D细胞、SUDHL16细胞、IM-95细胞
SNU-182细胞系相关产品:B-104细胞、Hep 3B细胞、MDA-MB-175细胞
NCI-ADR-RES细胞系相关产品:Wayne State University-Head and Neck 13细胞、RPMI1846细胞、WEHI164细胞
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NCI-H441-4细胞系相关产品:H1975细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞
H-1417细胞系相关产品:CFPAC1细胞、NCIH1581细胞、KOSC-2 cl3-43细胞
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AML 12细胞系相关产品:Kit225 K6细胞、NCI-H1882细胞、NCIN87细胞
HT 1080.T细胞系相关产品:SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞
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EAC-E2G8细胞系相关产品:OVCAR3细胞、TM-3细胞、A9 (Hamprecht)细胞
SW-948细胞系相关产品:SW 1573细胞、CL-34细胞、SKG-3a细胞
SHIN-3细胞系相关产品:Ball 1细胞、N2a细胞、HTR8细胞
hFOB 1.19细胞系相关产品:HTR8细胞、MiaPaCa2细胞、THP-1(ATCC)细胞
PNT1-a细胞系相关产品:DHL4细胞、GC-1细胞、MSTO-211细胞
LS 174T细胞系相关产品:HS 445T细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞、L 540细胞
8505C细胞系相关产品:BGC823细胞、NCI-H1930细胞、Danio rerio Gill细胞
H-157细胞系相关产品:U266 B1细胞、NCI-H1876细胞、Panc10.05细胞
NCI-H1581细胞系相关产品:ROS1728细胞、NCI-SNU-C2A细胞、GBC-SD细胞
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MKN7细胞系相关产品:Panc 1细胞、HS-445细胞、WM266mel细胞
P-388D1细胞系相关产品:OV1063细胞、L-Wnt3A细胞、Neuro 2a细胞
HTR-8/SV neo细胞系相关产品:BDCM细胞、RMa-bm细胞、NCI-H747细胞
COLO 206细胞系相关产品:H-1650细胞、MC-3T3-E1细胞、HEC-1-A细胞
HTR-8/SV neo细胞系相关产品:BDCM细胞、RMa-bm细胞、NCI-H747细胞
NTERA-2cl.D1细胞系相关产品:DHBE细胞、MDA PCa 2b细胞、KCL22S细胞
H8细胞系相关产品:SNU-354细胞、HCC-78细胞、Jurkat Clone E6-1细胞
H35细胞系相关产品:OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞
HSC3细胞系相关产品:Panc3_27细胞、NCI-H498细胞、HuTu-80细胞
SNUC2B细胞系相关产品:PaTu 8988 S细胞、H-727细胞、C-28/I2细胞
SNUC2B细胞系相关产品:PaTu 8988 S细胞、H-727细胞、C-28/I2细胞
U-266 AR1细胞系相关产品:DI TNC1细胞、SU86.86细胞、H1819细胞
IBRS2细胞系相关产品:DoTc2-4510细胞、NCI-H1092细胞、SW780细胞
SK-N-BE(2)C细胞系相关产品:MDA-MB157细胞、NCI-H64细胞、J-111细胞
SKNBE(2)细胞系相关产品:786-0WT细胞、HEL细胞、MDCK-2细胞
ECV-304 Adherent人脐静脉内皮细胞系
GES1细胞系相关产品:HEK293FT细胞、Hs832.Tc细胞、MG-HU-3细胞
VMM-5A细胞系相关产品:CC-LP-I细胞、AtT20细胞、PL-9细胞
SK-GT-2细胞系相关产品:D-407细胞、KP-N-RT-BM-1细胞、H-774细胞
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H-82细胞系相关产品:NCIH295R细胞、HEL 299细胞、PG-BE1细胞
DMS-273细胞系相关产品:Hs840_T细胞、2780细胞、201T细胞
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MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞系相关产品:GM17219细胞、SupB15W细胞、HEC1A细胞
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