"L-M(TK-) Adherent小鼠结缔组织细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
L-M(TK-) Adherent小鼠结缔组织细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点,要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
MDA MB231细胞系相关产品:GS-9L细胞、T-ALL1细胞、KMST-6细胞
PFSK-1细胞系相关产品:GT38细胞、Tu-212细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞
TE15细胞系相关产品:N-Tera-2细胞、PAEC细胞、4T1-LUC细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
TCC Sup细胞系相关产品:Hs 695.T细胞、OCI-Ly01细胞、OCILY10细胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞系相关产品:GTL16细胞、T47-D细胞、MDA-468细胞
BNCL-2细胞系相关产品:CAKI 2细胞、QGY-7701细胞、A72细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
L-M(TK-) Adherent小鼠结缔组织细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
BSC-1细胞系相关产品:COV 504细胞、Tn5B1-4细胞、RBMVEC细胞
P3J细胞系相关产品:SW48细胞、P3-x63-Ag8 653细胞、CHOK1细胞
SKMel-5细胞系相关产品:WC00097细胞、Hepatoma-22细胞、HL-1细胞
G-401细胞系相关产品:NCIH889细胞、OC316细胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞
hA549细胞系相关产品:MOLT16细胞、OVCA420细胞、Hs863T细胞
Kupffer细胞系相关产品:Hs-729-T细胞、HN 4细胞、SUM 190PT细胞
U-251-MG细胞系相关产品:SW-962细胞、RPTEC TERT1细胞、Hs840T细胞
FET细胞系相关产品:CTLL-2细胞、N-Tera-2细胞、H-1563细胞
KYSE0520细胞系相关产品:Caki-1细胞、RM-1细胞、S16细胞
SK-ChA1细胞系相关产品:Sc-1细胞、BetaTC6细胞、SCaBER细胞
K562细胞系相关产品:SUM52细胞、LWnt-3A细胞、EO771细胞
KRC Y细胞系相关产品:L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
TK-1细胞系相关产品:TM3细胞、PC-3M细胞、GLC-15细胞
L-M(TK-) Adherent小鼠结缔组织细胞系
Adeno 293细胞系相关产品:COLO-824细胞、Hep-G2/C3A细胞、HCAEC细胞
OV1/P细胞系相关产品:CA46细胞、MDAMB435细胞、CCD18细胞
NCI-H2291细胞系相关产品:NCI-H1299细胞、OCI-LY-19细胞、H1435细胞
NCI-H2291细胞系相关产品:NCI-H1299细胞、OCI-LY-19细胞、H1435细胞
B16细胞系相关产品:Panc-08.13细胞、CCD33Co细胞、Panc-8_13细胞
BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品:NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
MDCK细胞系相关产品:SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞
MDA MB 453细胞系相关产品:M-G63细胞、T47D:A细胞、C32-mel细胞
Colon38细胞系相关产品:H125细胞、RC13细胞、JF305细胞
BE(2)-C细胞系相关产品:NCI-H209细胞、MESSA/Dx5细胞、COLO679细胞
NE-1细胞系相关产品:159 PT细胞、MGC803细胞、HSC-6细胞
Hs822T细胞系相关产品:BL6细胞、HR-1细胞、HLE细胞
NCIH747细胞系相关产品:SK Mel 1细胞、RFL-6细胞、U266BL细胞
HNE-2细胞系相关产品:KOPN-8细胞、CL1.0细胞、Hepa 1-6细胞
HEK293E细胞系相关产品:RPMI-7951细胞、H920细胞、Tn-5B1-4细胞
RC-4B细胞系相关产品:RIN-14B细胞、MDA468细胞、MonoMac1细胞
MHHCALL2细胞系相关产品:SK-MEL-24细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞、WM35细胞
RMS13细胞系相关产品:WM115-mel细胞、P3 NS1 Ag4细胞、SP2细胞
NCIH1092细胞系相关产品:RCC-JF细胞、D283细胞、SK-OV-433细胞
NE1-E6E7细胞系相关产品:SNU668细胞、H-1105细胞、MOLT 4细胞
ECV 304细胞系相关产品:SK-MEL24细胞、NCI-H596细胞、THLE-2细胞
WI38细胞系相关产品:NCIH748细胞、WC00059细胞、CCRF/CEM-C7细胞
H660细胞系相关产品:TE5细胞、MC3T3-E1(C4)细胞、UPCI-SCC-90细胞
H1703细胞系相关产品:DAKIKI Clone 1细胞、MDA1386细胞、CACO2细胞
NBL-12细胞系相关产品:PT-K75细胞、GM-637细胞、WI 38细胞
NCTC clone 929细胞系相关产品:MDAMB157细胞、SU-DHL-1细胞、CCD19Lu细胞
SPDC-CCL141细胞系相关产品:CCC-HEH-2细胞、CHP-126细胞、LTEP a2细胞
H-87细胞系相关产品:Panc813细胞、Karpas299细胞、ZR75-30细胞
BGC-823细胞系相关产品:Pa17C细胞、7404细胞、H-2106细胞
3T3细胞系相关产品:Me-Wo细胞、WERIRb1细胞、Line 207细胞
PANC-04-03细胞系相关产品:MPC-83细胞、ADR-RES细胞、H-II-E-C3细胞
HEK293S细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-12A细胞、SUM149PT细胞、LNCaP.FGC细胞
NUGC-3细胞系相关产品:H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞
RASMCs细胞系相关产品:U2932细胞、JIMT1细胞、SKNBE2C细胞
Tca8113细胞系相关产品:Hs 695T细胞、SUDHL-5细胞、Tu-212细胞
PIG3细胞系相关产品:HT 29细胞、786-O RCC细胞、JURKAT E-61细胞
NCIH548细胞系相关产品:COLO 679细胞、HGC27细胞、NCI-H838细胞
A431细胞系相关产品:HS688AT细胞、H740细胞、HCC 94细胞
SKGT2细胞系相关产品:Hs 895 T细胞、SK LU 1细胞、TE 32细胞
HCV-29细胞系相关产品:E.L.4细胞、NCI-H-295细胞、Hmy.2 CIR细胞
P815细胞系相关产品:SKMEL2细胞、NPA'87细胞、hFOB 1.19细胞
Plaepi 34细胞系相关产品:MDA PCa 2b细胞、NBL_S细胞、CA922细胞
L-M(TK-) Adherent小鼠结缔组织细胞系
Huh-7.5.1细胞系相关产品:L-cells细胞、NPA87细胞、SMA-560细胞
MPC11细胞系相关产品:GalK 1细胞、H1238细胞、CF-PAC1细胞
LS-411N细胞系相关产品:N-87细胞、H1648细胞、MESSA细胞
VP 229细胞系相关产品:COLO-680N细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞、UM-UC3细胞
SJSA-1细胞系相关产品:PECAPJ34细胞、HAC-84细胞、MDA.MB.435细胞
aNK细胞系相关产品:OVCA8细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞、NALM-6-M1细胞
RIMEC细胞系相关产品:AKR细胞、H-2081细胞、H8细胞
H-II-E-C3细胞系相关产品:beta-TC6细胞、MDCK-2细胞、NE1细胞
SKG-3a细胞系相关产品:TALL1细胞、NIT-1细胞、Hs 604.T细胞
PLA-802细胞系相关产品:BC-025细胞、SKMES-1细胞、IPLB-Sf21细胞
CEM T4细胞系相关产品:DHL5细胞、AAV293细胞、Mevo细胞
SKMel-5细胞系相关产品:WC00097细胞、Hs-729-T细胞、Duck embryo细胞
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