"WEHI-164 Adherent小鼠纤维肉瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
WEHI-164 Adherent小鼠纤维肉瘤细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞培养实验基本操作:①进无菌室前要彻底洗手,按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻,安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意,金属器械不能在火焰中长时间烧灼,以防退火;烧过的器械要冷却后才能使用;已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质,吸管再用时会将其带到培养液中;胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长,以免烧焦产生有毒气体,危害培养细胞,同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶,开瓶后的培养液应保持斜位,避免直立,以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口,培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话,咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时,应专管专用,一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去,以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面,用消毒水浸泡的纱布擦拭台面;防止细胞交叉污染:所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备,一旦怀疑发生交叉污染,可做细胞遗传学方面的鉴定,如发现原有的细胞遗传物发生改变,可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行;无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比,的优点是便宜,而且可以稀释50倍用,而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一种广谱灭菌剂菌,其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉,熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
KM12 SM细胞系相关产品:Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞
MKN 7细胞系相关产品:MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞
HP615细胞系相关产品:Panc 8.13细胞、HPASMC细胞、PIG1细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MM6细胞系相关产品:Kit225细胞、Rabbit Kidney 13细胞、C3A细胞
IPLB-SF 21细胞系相关产品:HITT15细胞、RIN Cl-5F细胞、CLL-CII细胞
DHL6细胞系相关产品:KASUMI6细胞、C22细胞、LM(TK-)细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
WEHI-164 Adherent小鼠纤维肉瘤细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
RenCa细胞系相关产品:NIE 115细胞、SVOG细胞、MT-2细胞
BHP 10-3细胞系相关产品:W133细胞、Jurkat clone A3细胞、RPMI 1788细胞
CL40细胞系相关产品:HEK-293H细胞、Immortal Pig Intestinal-2I细胞、B16BL-6细胞
H2023细胞系相关产品:SUPT-1细胞、Hmy.2 CIR细胞、H1651细胞
LCLC-103H细胞系相关产品:Mouse Forestomach Carcinoma细胞、RPMI 7666细胞、PA-TU-8988S细胞
SW-954细胞系相关产品:HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞
SaOS-2细胞系相关产品:A2058细胞、HO8910PM细胞、LNCaP-FGC细胞
130-T细胞系相关产品:G361-mel细胞、Pt-K2细胞、SUM 159PT细胞
H-1563细胞系相关产品:NCI-H2023细胞、MIN6细胞、NCIH1568细胞
mREC细胞系相关产品:SKNBE(2c)细胞、16-HBE14o细胞、LLC-PK-1细胞
R.K.13细胞系相关产品:MDA-MB-134-VI细胞、Microbiological Associates-104细胞、OCI AML5细胞
Michigan Cancer Foundation-7细胞系相关产品:WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞
PGLH7细胞系相关产品:CHL-11细胞、293 EBNA细胞、OACP4C细胞
WEHI-164 Adherent小鼠纤维肉瘤细胞系
UMNSAH-DF-1细胞系相关产品:U343MG细胞、WM115mel细胞、VAESBJ细胞
SF 767细胞系相关产品:TSUpr1细胞、ESC细胞、PE/CA-PJ-34细胞
CHL-1细胞系相关产品:NCI-128细胞、HEK/EBNA细胞、MGH-U1细胞
X63Ag8.653细胞系相关产品:HT144mel细胞、Leydig细胞、SW-962细胞
BA/F3细胞系相关产品:DSL-6A-C1细胞、HEP-3B2细胞、MDA-MB468细胞
H711细胞系相关产品:IMCD-3细胞、SW 982细胞、MGHU3细胞
VERO C 1008细胞系相关产品:IMCD3细胞、FDCP-1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞
GM17346细胞系相关产品:A-375.S2细胞、Line 697细胞、NCIH2342细胞
U266细胞系相关产品:MV-4-11细胞、H1993细胞、AZ-521细胞
DK-MG细胞系相关产品:CAL-12T细胞、NRCC细胞、OCI-LY-18细胞
OCI-AML2细胞系相关产品:COLO320DM细胞、Panc02.03细胞、HNE1细胞
GES-1细胞系相关产品:HCET细胞、PC-14细胞、GI-1细胞
Hs27F细胞系相关产品:LWnt3A细胞、IPLB-Sf21-AE细胞、HLEpiC细胞
HuP-T4细胞系相关产品:LAN-6细胞、OCI/AML-2细胞、EL4细胞
DMS-114细胞系相关产品:MDAMB-231细胞、253J细胞、293AD细胞
Caco-2/BBe细胞系相关产品:TB-1 Lu细胞、NB4细胞、TE 671细胞
CCD1095Sk细胞系相关产品:NCI-H711细胞、ETCC-007细胞、MM134细胞
UM-UC14细胞系相关产品:NCIH510细胞、OVCAR 8细胞、Psi2-DAP细胞
R2C细胞系相关产品:Y3-Ag1,2,3细胞、SW-620细胞、HOP-92细胞
MCA-38细胞系相关产品:MILE SVEN 1细胞、MOLT 3细胞、OCI Ly10细胞
IFRS1细胞系相关产品:SNU-423细胞、GM06141细胞、TE13细胞
COV362细胞系相关产品:SKMEL-1细胞、L5178YR细胞、P30 OHK细胞
T-HSC细胞系相关产品:SNU-119细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、ROS17/2.8细胞
PaTu-8988s细胞系相关产品:8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞
HEC1A细胞系相关产品:NCIH2029细胞、GES1细胞、Bac12F5细胞
CG-4细胞系相关产品:Panc 4.03细胞、K562/ADP细胞、H647ell细胞
Mc Ardle 7777细胞系相关产品:PLC-PRF-5细胞、MBMEC细胞、SUDHL-6细胞
BC3H-1细胞系相关产品:769P细胞、ETCC007细胞、GEO细胞
D6P2T细胞系相关产品:HFL1细胞、SAS细胞、Hs 675.T细胞
MOLT-3细胞系相关产品:HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞
PC-14细胞系相关产品:SW 982细胞、DV90细胞、C33A细胞
Keio University-19-19细胞系相关产品:SF539细胞、RPMI no 8226细胞、IHH-4细胞
HC11细胞系相关产品:MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞
3T3-442A细胞系相关产品:SK-MEL-MeWo细胞、PANC 327细胞、RKO-AS45-1细胞
Epstein-Barr-2细胞系相关产品:HK2细胞、MLTC-1细胞、SKMES细胞
SU-DHL-10细胞系相关产品:BC-020细胞、Rat-2细胞、NCIH2170细胞
CLL-CII细胞系相关产品:SW13细胞、H-441细胞、D341Med细胞
SJSA-1细胞系相关产品:PECAPJ34细胞、HAC-84细胞、MDA.MB.435细胞
CWR-22rv1细胞系相关产品:H-929细胞、Hs 606细胞、DF-1细胞
CMT-64细胞系相关产品:GP2d细胞、tdott细胞、UMNSAH-DF1细胞
H-1092细胞系相关产品:Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞
HHL-5细胞系相关产品:PL 5细胞、NCI-H1963细胞、LAD2细胞
WEHI-164 Adherent小鼠纤维肉瘤细胞系
P3X63 Ag8细胞系相关产品:H-2291细胞、FCCH1024细胞、SU-DHL6细胞
WBF344细胞系相关产品:HCC1428细胞、TF-1细胞、WRL 68细胞
SNB-19细胞系相关产品:LP1细胞、CCD18细胞、SKOV3细胞
L5178Y细胞系相关产品:Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、J774.A1细胞、PL-5细胞
BGC823细胞系相关产品:KM12SM细胞、Hep G2/C3A细胞、MLMA细胞
SKMES-1细胞系相关产品:PCI-04B细胞、MDBK细胞、GES1细胞
Ra #1细胞系相关产品:PC-10细胞、MDAMB157细胞、H-1781细胞
P3HR1-BL细胞系相关产品:Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞
ABC1细胞系相关产品:Hs-852-T细胞、Sci-1细胞、R1800[RA]细胞
Capan-1细胞系相关产品:COLO-1细胞、EFM192B细胞、58F细胞
H1568细胞系相关产品:MSTO-211细胞、UPCI:SCC154细胞、LA-N-6(OAN)细胞
CL40细胞系相关产品:HEK-293H细胞、Y 1细胞、EU-3细胞
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