"KMH-2 Adherent人甲状腺癌细胞系
细胞背景资料:未分化甲状腺癌;男性
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
KMH-2 Adherent人甲状腺癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代培养的胰酶消化法:传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤:①入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;②倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热;③超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;⑤点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内;⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上;⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱;⑩对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
LU-65M细胞系相关产品:OE19细胞、LL/2细胞、NCIH1436细胞
HR-1细胞系相关产品:HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞
MDA-435细胞系相关产品:GA-10 (Clone 4)细胞、SK-RC-20细胞、F-36P细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCC1359细胞系相关产品:SU-DHL2细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞、LL/2 (LLC1)细胞
HT 1080.T细胞系相关产品:SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞
S16细胞系相关产品:MS751细胞、Hep 3B2细胞、BEL-7404细胞
细胞生长特性:贴壁
KMH-2 Adherent人甲状腺癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
以下对初次培养细胞人员来说,是非常好的开门教程:准备室的设备:单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台;配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液);培养室的设备:液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-80℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录);必须放在无菌间的设备:离心机(收集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱(孵育培养物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱(放置serum和培养用液)。无菌室的灭菌:定期打扫无菌室:每周打扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5%擦拭;CO2孵箱(培养箱)灭菌:先用3‰新洁尔灭擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%,再用紫外灯照射;实验前灭菌:打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟;实验后灭菌:用75%酒精(3‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台;实验人员的无菌准备:肥皂洗手、穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦净双手。
Jurkat-77细胞系相关产品:Human fetal lung fibroblast 1细胞、CP-70细胞、686LN-M4e细胞
RT4P细胞系相关产品:Hep 3B2细胞、DMS153细胞、FRhK-4细胞
T_T_细胞系相关产品:BN-CL2细胞、NCIH82细胞、LP1细胞
NBLAN5T细胞系相关产品:KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞
KYSE 510细胞系相关产品:NCIH1105细胞、RK 13细胞、Hs737T细胞
RBL-2H3细胞系相关产品:EFM192B细胞、KB细胞、C4-2 Bone metastatic细胞
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PLA-801D细胞系相关产品:THP1细胞、PMVEC细胞、NCIH64细胞
SK N SH细胞系相关产品:MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
LC-1细胞系相关产品:NCI-H1836细胞、JB6 clone 30, subclone 7b细胞、CO115细胞
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PC 61-5-3细胞系相关产品:GM637细胞、NIH-3T3细胞、BNL.CL2细胞
SW-1088细胞系相关产品:CEMO-1细胞、C17细胞、PL45细胞
KMH-2 Adherent人甲状腺癌细胞系
MB157细胞系相关产品:SNU-1细胞、18G3.cl 1细胞、SK-ChA-1细胞
H-716细胞系相关产品:CHL-IU细胞、KYSE140细胞、MGH-U3细胞
Caco2-BBE细胞系相关产品:Hs729细胞、OCI-AML5细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞
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RPTEC/TERT 1细胞系相关产品:RFL6细胞、NCIH1568细胞、Psi2 DAP细胞
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Potorous tridactylus Kidney 2细胞系相关产品:KYSE30细胞、RCC 7860细胞、Farage细胞
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Y1细胞系相关产品:CaSki细胞、28SC细胞、LS-123细胞
3T3-Swiss albino细胞系相关产品:RPTEC/TERT1细胞、SVG(P12)细胞、ANA-1细胞
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HCC1569细胞系相关产品:MC57细胞、UPCI-SCC-154细胞、SU86-86细胞
ME1细胞系相关产品:TE9细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、NCI-H2228细胞
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NCI/ADRRES细胞系相关产品:118 MG细胞、WiDr/S细胞、ACCM细胞
NCIH1836细胞系相关产品:WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞
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CD 18细胞系相关产品:KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞
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MES-13细胞系相关产品:OSK-1细胞、CTLL(2)细胞、Calu3细胞
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P3X63Ag8653细胞系相关产品:A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞
HEK-AD 293细胞系相关产品:H184A1细胞、M059K细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞
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HEYA8细胞系相关产品:Hs675T细胞、SJRH30细胞、FET细胞
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