"KRC/Y Adherent人肾癌细胞系
细胞背景资料:肾透明细胞癌;女性
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
KRC/Y Adherent人肾癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
常见培养细胞预防污染的有效措施:体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手:1)添加抗生素:各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果好,预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性,且对细胞本身也有一定影响,因此为避免诱导抗药细菌,应定期更换培养系统中的抗生素,或尽可能不用抗生素处理;2)从物品、用品消毒灭菌着手:细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增大,滤膜破损的可能性增加,故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作:75%的酒精搽拭培养箱后,使用可移动的紫外灯至少消毒30min,加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制300ml的饱和酸铜加3L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。
95D细胞系相关产品:OCUM-1细胞、C4-2细胞、NTHY-ORI3.1细胞
Simpson细胞系相关产品:RERFLCMS细胞、TE-9细胞、UMRC-2细胞
CAL 39细胞系相关产品:MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Panc8.13细胞系相关产品:GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞
MH-S细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、PC12(高分化)细胞、KE39细胞
Bac 1.2F5细胞系相关产品:130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞
细胞生长特性:贴壁
KRC/Y Adherent人肾癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO) 或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10(7)/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10(5)/ml数量。
Jiyoye细胞系相关产品:ABC-1细胞、LNCaP C4-2细胞、3AO细胞
SK HEP 01细胞系相关产品:HcaF细胞、Wien-133细胞、CAMA-1细胞
Hs 746.T细胞系相关产品:SK_N_BE2C细胞、U87 MG细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞
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LN-382细胞系相关产品:W256细胞、SVGp12细胞、U-266细胞
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NCI-H820细胞系相关产品:P31/FUJ细胞、Caco 2细胞、HHUA细胞
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PC2细胞系相关产品:Nb2细胞、HOP92细胞、HLEB3细胞
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KRC/Y Adherent人肾癌细胞系
UCLA NPA-87-1细胞系相关产品:SNU-16细胞、MHCC97-L细胞、HCC78细胞
H209细胞系相关产品:HN6细胞、SKHEP1细胞、SPCA1细胞
Bovine ENDometrial cells细胞系相关产品:N9细胞、MDA-MB-134-VI细胞、CF Pac1细胞
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HCC1395细胞系相关产品:COLO-829细胞、3T6细胞、Human Fetal Thymocyte-8810细胞
Jiyoye(P-2003)细胞系相关产品:Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、ECC1细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞
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MB39细胞系相关产品:Mc Ardle 7777细胞、JROECL 19细胞、NIH-3T3-L1细胞
KRC/Y Adherent人肾癌细胞系
GA-10 clone 4细胞系相关产品:P388.D1细胞、Hs 636 T细胞、SNU-869细胞
Hs-940细胞系相关产品:UCLA RO-81-A-1细胞、SK-Hep1细胞、751-NA-15细胞
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H-847细胞系相关产品:Li-7细胞、ATDC-5细胞、CMECs细胞
SKNO1细胞系相关产品:MDA-MB-175VII细胞、HCC-1937细胞、CT26细胞
ChaGo-K1细胞系相关产品:U-118 MG细胞、MDA-330细胞、alpha TC1.6细胞
OC-316细胞系相关产品:ZR75_1细胞、HT-115细胞、alpha-TC1.6细胞
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细胞、Hs 888Lu细胞
TOV-21G细胞系相关产品:H22-H8D8细胞、H865细胞、SNU-251细胞
SNU-878细胞系相关产品:HR8348细胞、BMSC/hBMSCs细胞、ARPE19细胞
LLC-PK1细胞系相关产品:TR146细胞、CCRF-CEM/S细胞、ME-180细胞
Hs 742.T细胞系相关产品:High5细胞、RPMI.8226细胞、Ect1/E6E7细胞
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