"DK-MG Adherent人胶质母细胞瘤细胞系
细胞背景资料：胶质母细胞瘤；女性
细胞形态：上皮细胞样
细胞传代后放入培养箱没有摇匀，或者放入时摇匀，但在细胞贴壁前，又移动了培养瓶，频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少，培养箱搁板表面不平整，这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象，大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下，很可能会出现部分细胞抱团生长的现象，聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物，殃及周围的悬浮细胞，因此在培养悬浮细胞时需控制好细胞密度。如果出现了细胞团，可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团，也可以尝试一下方法：将细胞悬液收集到15ml离心管中，静置20min左右，小心取上层细胞上清培养（该方法只能去除部分较大的细胞团）。部分细胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐药株等），这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡，则很可能是细胞状态不佳，可以通过调整血清浓度，控制消化，控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态；如果大部分细胞出现空泡，且单个细胞内空泡数目偏多，则可能细胞代次较高，细胞老化所致，需更换代次较早的细胞。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
DK-MG Adherent人胶质母细胞瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。
TM-4细胞系相关产品：OAC-P4C细胞、HEC-1-B细胞、CCD966SK细胞
WEHI-164细胞系相关产品：HSC 3细胞、3T3(A31)细胞、PC-3M-1E8细胞
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细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
GA-10(Clone 4)细胞系相关产品：hTERTHME1细胞、UCH1细胞、MKN-45细胞
OVCA-433细胞系相关产品：HOS细胞、NCC-IT细胞、Bowes melanoma cells细胞
Panc2_03细胞系相关产品：H-1836细胞、D 407细胞、UCLA SO M21细胞
细胞生长特性：贴壁
DK-MG Adherent人胶质母细胞瘤细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
几种实验室细胞培养基成分的作用：１)NaHCO３的作用是什么？与CO２一起形成缓冲系统，保持培养基PH值稳定；２)酸钠的作用是什么？酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为５０mM，-２０℃保存，培养基中的终浓度为１mM；３)加入HEPES有何好处？培养基中最常用的Buffer system是碳酸盐，它可提供营养，但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer，加入HEPES能使细胞培养基在PH７.２-７.６条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为１M，常温保存。培养基中的终浓度为２５mM，即５ml １M的Hepes加入到２００ml完全培养基中；４)红的作用是什么？红在培养基中被用来作为PH值指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色；５)谷酰胺的作用是什么？几乎所有的细胞对谷酰胺都有胶高的要求。谷酰胺脱掉基后，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定，应置-２０℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基４度冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷酰胺。试验操作中常配制高浓度(１００倍)的谷酰胺溶液(１ml/支)，分装使用，-２０℃保存。使用时，每支１ml的谷酰胺加入到９９ml完全培养基中，使其终浓度为２mM培养基。
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