"HAPI Adherent大鼠小胶质细胞系
细胞背景资料:小胶质细胞;自发永生;Wistar
细胞形态:上皮细胞样
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制好细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较高,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HAPI Adherent大鼠小胶质细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞培养实验基本操作:①进无菌室前要彻底洗手,按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻,安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意,金属器械不能在火焰中长时间烧灼,以防退火;烧过的器械要冷却后才能使用;已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质,吸管再用时会将其带到培养液中;胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长,以免烧焦产生有毒气体,危害培养细胞,同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶,开瓶后的培养液应保持斜位,避免直立,以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口,培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话,咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时,应专管专用,一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去,以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面,用消毒水浸泡的纱布擦拭台面;防止细胞交叉污染:所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备,一旦怀疑发生交叉污染,可做细胞遗传学方面的鉴定,如发现原有的细胞遗传物发生改变,可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行;无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比,的优点是便宜,而且可以稀释50倍用,而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一种广谱灭菌剂菌,其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉,熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
MOLM-16细胞系相关产品:McA-RH8994细胞、Hs 766T细胞、L-428细胞
UM-UC14细胞系相关产品:NCIH510细胞、OVCAR 8细胞、Psi2-DAP细胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品:H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCC-366细胞系相关产品:NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞
NTERA2-cloneD1细胞系相关产品:GL-261细胞、MB49细胞、SUNE 1细胞
MMAc-Serum Free细胞系相关产品:OCI-Ly18细胞、TE-4细胞、KTCTL140细胞
细胞生长特性:半贴壁
HAPI Adherent大鼠小胶质细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
NCI-H146细胞系相关产品:B16-F10细胞、HCC1143细胞、DLD-1细胞
NCIH1618细胞系相关产品:CFSC-2G细胞、LAN1细胞、KP-N-YN细胞
SKRC-39细胞系相关产品:H1155细胞、SPDC-CCL141细胞、MOLT-3细胞
SUPT-1细胞系相关产品:RIN14B细胞、Hs852T细胞、Cates 1B细胞
HOS/MNNG细胞系相关产品:H-2347细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞、JROECL19细胞
ECV 304细胞系相关产品:SK-MEL24细胞、NCI-H596细胞、THLE-2细胞
WM2664细胞系相关产品:A-172 MG细胞、P3J HR1-K细胞、KYSE 50细胞
SKMEL5细胞系相关产品:C57 Mouse Tumor 93细胞、PC-3M-1E8细胞、293-EBNA1细胞
DHL-2细胞系相关产品:Normal Rat Kidney细胞、PL11细胞、Fu97细胞
NCIH2228细胞系相关产品:KCL-22细胞、FHL-124细胞、ZYM-SVEC01细胞
D-283细胞系相关产品:NP69细胞、NCIH2023细胞、Vero-E6细胞
RMC-1细胞系相关产品:VM-CUB-I细胞、LC-1-sq细胞、HuT102细胞
SKMEL5细胞系相关产品:C57 Mouse Tumor 93细胞、PC-3M-1E8细胞、293-EBNA1细胞
HAPI Adherent大鼠小胶质细胞系
KYSE-70细胞系相关产品:HEK/293细胞、NCI-H82细胞、Nthy-ori 3.1细胞
Panc02.03细胞系相关产品:H2198细胞、U118MG细胞、UWB1-289细胞
HSC(Human Schwann)细胞系相关产品:CCC-HHM-2细胞、SupB15W细胞、GM17219细胞
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MDCK-2细胞系相关产品:Ku812F细胞、HS578T细胞、Swiss/3T3细胞
KYSE410细胞系相关产品:PTK-1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、WPE-int细胞
HeLa S3细胞系相关产品:NCI-H82细胞、H676B细胞、Mink细胞
NIH:OVCAR-8细胞系相关产品:X63-Ag8.653细胞、QBI-HEK 293A细胞、IEC-6细胞
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SNU398细胞系相关产品:G 401细胞、SKUT-1细胞、SK-N-BE(2)-C细胞
WI 38细胞系相关产品:GM-346细胞、MOLT-4细胞、Okayama University Medical School-27细胞
NCI-SNU-620细胞系相关产品:NCI-441细胞、MKN 28细胞、MHCC97-L细胞
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PT-K75细胞系相关产品:KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞
NK-92.05细胞系相关产品:32D-Cl3细胞、H1573细胞、NCI-H146细胞
LC1细胞系相关产品:PAa细胞、EA. hy 926细胞、AN3 CA细胞
MDCK-II细胞系相关产品:C-Lu-65细胞、MN-60细胞、HCC94细胞
Hs739T细胞系相关产品:OCI-Ly 7细胞、B-cell with DC Morphology细胞、H-2171细胞
NCI-SNU-601细胞系相关产品:U87 MG细胞、NIH3T3-L1细胞、H2591细胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞系相关产品:Hs 766细胞、H-676细胞、RPVSMC细胞
KYSE510细胞系相关产品:Eph4 1424细胞、AE1201细胞、Ramos 2G6.4C10细胞
TE-11细胞系相关产品:HuPT4细胞、COV434细胞、RPMI6666细胞
CCFSTTG1细胞系相关产品:CORL105细胞、HSAEC1-KT细胞、HCC2279细胞
UMNSAH-DF-1细胞系相关产品:U343MG细胞、WM115mel细胞、VAESBJ细胞
BXPC3细胞系相关产品:ARPE-19细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、H-7721细胞
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SUPM2细胞系相关产品:GM05887A细胞、JAR细胞、Tu177细胞
AD-293细胞系相关产品:C4-2 Bone metastatic细胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞、Hs 888Lu细胞
MA 104细胞系相关产品:IHHA-1细胞、NCIH1876细胞、NCI-H1568细胞
SNU1细胞系相关产品:K-1735细胞、SNU449细胞、MM-1S细胞
TW 01细胞系相关产品:A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
526mel细胞系相关产品:MC3T3-E1(C4)细胞、RPMI7951细胞、HD11细胞
LIM-1215细胞系相关产品:PANC0327细胞、CEMx721.174.T2细胞、GM00637F细胞
ChaGo-K-1细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-7细胞、LS123细胞、CAKI1细胞
H508细胞系相关产品:ADR-RES细胞、U 138 MG细胞、H-1819细胞
HAPI Adherent大鼠小胶质细胞系
WI38细胞系相关产品:NCIH748细胞、WC00059细胞、CCRF/CEM-C7细胞
HS578细胞系相关产品:CAMA-1细胞、SCCVII/St细胞、MT-3 [Human leukocytes]细胞
RIN14B细胞系相关产品:CFSC-8B细胞、SCC-15细胞、LC-1-sq细胞
NCIH460细胞系相关产品:Panc02-H0细胞、COLO-357细胞、NCIH292细胞
SW-403细胞系相关产品:TF-1a细胞、HSC5细胞、Lewis-Lung细胞
32Dc3细胞系相关产品:L-M(TK-)细胞、BMSCs(mBMSCs)细胞、BE(2)M-17细胞
AN-3细胞系相关产品:U373MG细胞、COLO 320细胞、HCM细胞
SN12CPM6细胞系相关产品:SV40-HCEC细胞、COLO 320HSR细胞、Hs-274-T细胞
SW 1222细胞系相关产品:H-2029细胞、T. T细胞、CAL 51细胞
B16 subline B78细胞系相关产品:SKMEL-2细胞、AtT-20细胞、INS1-E细胞
Sarcoma OSteogenic-2细胞系相关产品:8305C_1细胞、LS-1034细胞、MC116细胞
SKRC-39细胞系相关产品:H1155细胞、NCM356细胞、HC11细胞
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