"M619 Adherent人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞系
细胞背景资料:脉络膜黑色素瘤;女性
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
M619 Adherent人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
购买细胞注意事项:1)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系;2)仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等;3)用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次;4)建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代:1)提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内;2)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞;3)加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用;4)用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡;5)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代:1)将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min;2)弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液;3)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
NCI-H1385细胞系相关产品:TCCSUP细胞、H1703细胞、LYR细胞
TE671/RD细胞系相关产品:WB-F344细胞、NCIH345细胞、SNU739细胞
Hs343T细胞系相关产品:Colon 26细胞、HPDLF细胞、FAO-1细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
H-4-II-E细胞系相关产品:8505C细胞、SNUC2A细胞、U-373-MG细胞
LN299细胞系相关产品:Rat1细胞、ROS 17/28细胞、EB-1细胞
KS-SLK细胞系相关产品:SNU-668细胞、Mink Lung细胞、Nthy-ori 3-1细胞
细胞生长特性:贴壁
M619 Adherent人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
T2细胞系相关产品:HCC-38细胞、Mel-624细胞、Hs-695-T细胞
WEHI231细胞系相关产品:LICR-HN6细胞、McA-RH 7777细胞、VMRC-RCZ细胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞系相关产品:Y3M细胞、HPAF2细胞、MLM细胞
HCC-15细胞系相关产品:MRMT-1细胞、Swiss 3T3细胞、OCI-Ly1细胞
NCI-SNU-761细胞系相关产品:293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞
H1341细胞系相关产品:T47D:A细胞、TE354.T细胞、H-1666细胞
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SCC-15细胞系相关产品:MKN 28细胞、SK-MEL-1细胞、OB2细胞
LNT-229细胞系相关产品:H1435细胞、MAVER-1细胞、C-33A细胞
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HUT 125细胞系相关产品:LTEP a2细胞、TPC1细胞、SW260细胞
Fetal Rhesus Kidney-4细胞系相关产品:IGR-OV1细胞、HOS TE85细胞、LAN-6细胞
Granta-519细胞系相关产品:RMS13细胞、RPMI 8226/S细胞、SUM 102PT细胞
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PGBE1细胞系相关产品:Simpson细胞、Clone 15 HL-60细胞、C6661细胞
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SK-N-BE(2)-C细胞系相关产品:HOS (TE85)细胞、HCC 2185细胞、PL9细胞
MMVECs细胞系相关产品:MFE 280细胞、MOLT16细胞、JIMT1细胞
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Wistar Institute-38细胞系相关产品:PK(15)细胞、WM115细胞、PC 61-5-3细胞
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KP4细胞系相关产品:NS653细胞、F9细胞、VP229细胞
DMS 114细胞系相关产品:MDAMB175VII细胞、BrCL12细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞
NCI-128细胞系相关产品:SL1细胞、SW 48细胞、NCIH1651细胞
18G3.cl 1细胞系相关产品:SNU-216细胞、NCI H157细胞、SKGIIIA细胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞系相关产品:L 540细胞、RMC细胞、P3-X63-Ag8-653细胞
H211细胞系相关产品:UCLA-SO-M21细胞、HCa/16A3-F细胞、HGE细胞
Mel-RM细胞系相关产品:MDAMB436细胞、DR2R1610细胞、SCC 4细胞
SKNBE-2细胞系相关产品:Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、IMCD3细胞、SCL I细胞
NSI/1-Ag4-1细胞系相关产品:NCI-H2066细胞、Nthy-ori 3.1细胞、alpha TC1 clone 6细胞
DMS 153细胞系相关产品:Hs852T细胞、CHO细胞、T/G HA VSMC细胞
HT(H9)细胞系相关产品:Jurkat E6-1细胞、PLA-801C细胞、CG-4细胞
M619 Adherent人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞系
TO175T细胞系相关产品:CMT167细胞、U-343 MG细胞、LM TK negative细胞
H6c7细胞系相关产品:Y-1细胞、253JB-V细胞、LL/2细胞
RFL-6细胞系相关产品:SNUC2B细胞、PG13细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞
RPTC细胞系相关产品:MES13细胞、293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞
SVEC4-10细胞系相关产品:Hx147细胞、CORL88细胞、Hs 729.T细胞
MeSoTheliOma-211H细胞系相关产品:BIU-87细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、SU-DHL-1细胞
T 84细胞系相关产品:SACC83细胞、Strain L-929细胞、BCP1细胞
EM3细胞系相关产品:WISH细胞、BRL3A细胞、Mino细胞
Panc-10.05细胞系相关产品:OVCA432_Bast细胞、GP2-293细胞、Rat1细胞
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COLO-320细胞系相关产品:AML-12细胞、MRC-V细胞、RAT2细胞
HSC-4细胞系相关产品:RPMC细胞、HTSMC细胞、HPAF2细胞
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