"HB611 Adherent人肝母细胞癌细胞系
细胞背景资料:肝母细胞癌;男性
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HB611 Adherent人肝母细胞癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
Caco-2BBe细胞系相关产品:SW 954细胞、SCC-9细胞、NCI-H2141细胞
KOSC2细胞系相关产品:TALL-104细胞、SU-DHL2细胞、HGF-1细胞
KE 37细胞系相关产品:SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
B16-F10细胞系相关产品:Sp2/mIL-6细胞、HEK293-A细胞、EU-4细胞
HEC1A细胞系相关产品:NCIH2029细胞、GES1细胞、Bac12F5细胞
AMJ2-C8细胞系相关产品:ANA1细胞、CHO K1细胞、SGC 7901细胞
细胞生长特性:贴壁
HB611 Adherent人肝母细胞癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
NCTC clone 929细胞系相关产品:MDAMB157细胞、SU-DHL-1细胞、CCD19Lu细胞
OVCAR3细胞系相关产品:BLO-11细胞、SNB.19细胞、NCI-H711细胞
SKHEP1细胞系相关产品:Rat 1细胞、Human Liver-7702细胞、KHYG1细胞
KCL-22细胞系相关产品:Central Adrenergic TH-expressing a细胞、MKN28细胞、SaOS细胞
HNE-3细胞系相关产品:SK ES 01细胞、SK 1细胞、HOS-MNNG细胞
SHG 44细胞系相关产品:HD-LM-2细胞、Hs840T细胞、RT4-D6P2T细胞
OV 1063细胞系相关产品:Pt K2 (NBL-5)细胞、B6Tert-1细胞、RL细胞
KYSE450细胞系相关产品:NALM 6细胞、HEK293FT细胞、KMBC细胞
DI TNC1细胞系相关产品:H-2172细胞、HREC细胞、ATDC5细胞
NCI H548细胞系相关产品:HCC 38细胞、MDAMB175VII细胞、AQ-Mel细胞
H-716细胞系相关产品:CHL-IU细胞、KYSE140细胞、MGH-U3细胞
Hs-600-T细胞系相关产品:H-1781细胞、TMK1细胞、FM88细胞
52PE细胞系相关产品:Panc04.03细胞、BT-20细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞
HB611 Adherent人肝母细胞癌细胞系
BpRcl细胞系相关产品:HTR-8/SV neo细胞、NCI-H508细胞、ARH 77细胞
NCI-SNU-216细胞系相关产品:KPL4细胞、ANA-1细胞、H4-II-EC3细胞
HRMC细胞系相关产品:Institute for Medical Research-90细胞、3T3-Swiss细胞、Hs852T细胞
HRMC细胞系相关产品:Institute for Medical Research-90细胞、3T3-Swiss细胞、Hs852T细胞
CTV1细胞系相关产品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、NEC细胞、PANC.1细胞
MM134细胞系相关产品:H526细胞、SKOV-433细胞、KFB细胞
BrCL12细胞系相关产品:LM2-4175细胞、HM06.A1细胞、EOL1细胞
HEL-92细胞系相关产品:Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞
C3H/10T1/2-clone8细胞系相关产品:MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞
BNL-CL.2细胞系相关产品:NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞
CATH.a细胞系相关产品:ECC 12细胞、NCIADRRES细胞、SUP-M2细胞
NTERA2-D1细胞系相关产品:TGBC11TKB细胞、H378细胞、BT-549细胞
TE4细胞系相关产品:RKO_AS45细胞、SNB-19细胞、BrCL18细胞
SCL1细胞系相关产品:NCTC clone 1469细胞、HTR-8细胞、RWPE1细胞
E304细胞系相关产品:SR-786细胞、3LL细胞、U138细胞
KU-812F细胞系相关产品:E304细胞、LAN-6细胞、BpRc1细胞
NCIH2106细胞系相关产品:GM03190细胞、RCF细胞、MN 60细胞
SCC-25细胞系相关产品:ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞
DR2R1610细胞系相关产品:253J细胞、50.B1细胞、Tregs细胞
MV-1-Lu细胞系相关产品:BIU-87/Adr细胞、NOZC-1细胞、T 98 G细胞
GM00637F细胞系相关产品:TMD-8细胞、H766T细胞、X63-Ag8细胞
WC00097细胞系相关产品:HCC0202细胞、MFE-296细胞、SEM细胞
786.O细胞系相关产品:NCIH2347细胞、Caov-3细胞、NCIH1838细胞
NCI-SNU-668细胞系相关产品:B16-BL6细胞、PATU-S细胞、L2细胞
H1781细胞系相关产品:MAC1细胞、mREC细胞、HEC151细胞
VK2/E6E7细胞系相关产品:ESC细胞、H660细胞、C17细胞
RPMI-7666细胞系相关产品:T HEECs细胞、NTERA-2/D1细胞、Hs281T细胞
C42细胞系相关产品:LUDLU-1细胞、1E8-H细胞、PLA 802细胞
Hs839T细胞系相关产品:U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞
SNB.19细胞系相关产品:LLC-MK2细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞、KYSE-180细胞
BV-173细胞系相关产品:Hs 940.T细胞、Mv1.Lu细胞、H676细胞
HCT 15细胞系相关产品:COV 434细胞、NCIH2170细胞、MSTO211H细胞
TOV-112细胞系相关产品:SW-626细胞、RWPE2细胞、RCSMC细胞
HuTu-80细胞系相关产品:Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞
NCI-H2170细胞系相关产品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、BHT101细胞、COLO-824细胞
ST细胞系相关产品:HGF-1细胞、THPI细胞、RGM-1细胞
MOLT3细胞系相关产品:NCI-H660细胞、P3 (Jiyoye)细胞、293 c18细胞
NCIH1694细胞系相关产品:GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞
HSKMC细胞系相关产品:C8166-CD4细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、SIRC细胞
PaTu-8988s细胞系相关产品:8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞
NCI-SNU-1细胞系相关产品:HCC-78细胞、MGSMC细胞、MH7A细胞
HK2细胞系相关产品:OCI-Ly 10细胞、2E8细胞、H-4-II-E细胞
HB611 Adherent人肝母细胞癌细胞系
UACC 812细胞系相关产品:RL-952细胞、VMM5细胞、Tu212细胞
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品:HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
Walker256-TC细胞系相关产品:WM239细胞、SW-954细胞、HN4细胞
GOS-3细胞系相关产品:SW-837细胞、8305C_1细胞、OV-90细胞
Granta-519细胞系相关产品:RMS13细胞、RPMI 8226/S细胞、SUM 102PT细胞
HFB细胞系相关产品:SNU484细胞、SUSM-1细胞、BA/F3细胞
OCI-Ly01细胞系相关产品:Hs 578Bst细胞、COLO 699细胞、E6-1细胞
MeT 5A细胞系相关产品:SW1783细胞、IPI-2I细胞、Panc 02.03细胞
MC3T3-E1 Subclone 14细胞系相关产品:P3/X63/Ag8.653细胞、FLS细胞、DMS 53细胞
HT1197细胞系相关产品:190PT细胞、NCIH1395细胞、Tu212细胞
NCIH2110细胞系相关产品:CL1.0细胞、H209细胞、Nb2a细胞
SKHEP1细胞系相关产品:Rat 1细胞、H-1385细胞、P-19细胞
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