"FU-MMT-1 Adherent人子宫肉瘤细胞系
细胞背景资料:子宫肉瘤;女性
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
FU-MMT-1 Adherent人子宫肉瘤细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
常见培养细胞预防污染的有效措施:体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手:1)添加抗生素:各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果好,预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性,且对细胞本身也有一定影响,因此为避免诱导抗药细菌,应定期更换培养系统中的抗生素,或尽可能不用抗生素处理;2)从物品、用品消毒灭菌着手:细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增大,滤膜破损的可能性增加,故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作:75%的酒精搽拭培养箱后,使用可移动的紫外灯至少消毒30min,加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制300ml的饱和酸铜加3L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。
MC3T3-L1细胞系相关产品:C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞
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细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
H9细胞系相关产品:8402细胞、TE-10细胞、HEK 293细胞
SMA 560细胞系相关产品:HPAF-II细胞、H2444细胞、I90细胞
SUM102细胞系相关产品:CPAE细胞、GS9L细胞、H2.35细胞
细胞生长特性:贴壁
FU-MMT-1 Adherent人子宫肉瘤细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
几种实验室细胞培养基成分的作用:1)NaHCO3的作用是什么?与CO2一起形成缓冲系统,保持培养基PH值稳定;2)酸钠的作用是什么?酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为50mM,-20℃保存,培养基中的终浓度为1mM;3)加入HEPES有何好处?培养基中最常用的Buffer system是碳酸盐,它可提供营养,但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer,加入HEPES能使细胞培养基在PH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为1M,常温保存。培养基中的终浓度为25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培养基中;4)红的作用是什么?红在培养基中被用来作为PH值指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色;5)谷酰胺的作用是什么?几乎所有的细胞对谷酰胺都有胶高的要求。谷酰胺脱掉基后,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷酰胺。试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分装使用,-20℃保存。使用时,每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培养基中,使其终浓度为2mM培养基。
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