"HMEL Adherent永生上皮细胞系
细胞背景资料:上皮细胞;永生化
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HMEL Adherent永生上皮细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞培养实验基本操作:①进无菌室前要彻底洗手,按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻,安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意,金属器械不能在火焰中长时间烧灼,以防退火;烧过的器械要冷却后才能使用;已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质,吸管再用时会将其带到培养液中;胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长,以免烧焦产生有毒气体,危害培养细胞,同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶,开瓶后的培养液应保持斜位,避免直立,以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口,培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话,咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时,应专管专用,一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去,以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面,用消毒水浸泡的纱布擦拭台面;防止细胞交叉污染:所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备,一旦怀疑发生交叉污染,可做细胞遗传学方面的鉴定,如发现原有的细胞遗传物发生改变,可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行;无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比,的优点是便宜,而且可以稀释50倍用,而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一种广谱灭菌剂菌,其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉,熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
343 MG细胞系相关产品:SUD6细胞、alpha-TC1.6细胞、H-747细胞
SU-DHL-4细胞系相关产品:NCI-522细胞、SW 579细胞、NIHOVCAR3细胞
TT细胞系相关产品:IEC 6细胞、no.11细胞、GM04154B细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
BEL 7402细胞系相关产品:HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞
Calu 6细胞系相关产品:LAN6细胞、H220细胞、K299细胞
NS-I/1细胞系相关产品:3T3J2细胞、WRL-68细胞、SNUC2B细胞
细胞生长特性:贴壁
HMEL Adherent永生上皮细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养常见问题及解决方案:1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决;2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以离心去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决;3)对于生长缓慢的贴壁细胞:可采用适当的提高培养基中血清浓度,或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度;4)对于生长不均的贴壁细胞:在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长,而旁边则为一块空白),此时可将细胞进行消化,重新打散,贴壁,加入新培养基进行培养。
COLO 206细胞系相关产品:H-1650细胞、MC-3T3-E1细胞、HEC-1-A细胞
BALB/3T3 (clone A31)细胞系相关产品:OVCAR5细胞、MUTZ3细胞、BNL CL2细胞
Ca759细胞系相关产品:130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
HOS/MNNG细胞系相关产品:H-2347细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞、JROECL19细胞
293A细胞系相关产品:WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞
HT 1376.T细胞系相关产品:U138细胞、hADSCs细胞、OVCA432细胞
SK-NM-C细胞系相关产品:HUVSMC细胞、WM 2664细胞、SO-Rb 50细胞
JF305细胞系相关产品:HT115细胞、HT22细胞、HTh74细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞系相关产品:HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞
Tregs细胞系相关产品:Epstein-Barr-3细胞、SCC9细胞、SKNBE2细胞
CCD 1112SK细胞系相关产品:OVCAR-432细胞、OV1-P细胞、H-1650细胞
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KM12-SM细胞系相关产品:143B TK-细胞、Potorous tridactylus Kidney 2细胞、HLFa细胞
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HBEpiC细胞系相关产品:RWPE-2细胞、SKO3细胞、GM03571细胞
E.L.4细胞系相关产品:HEL9217细胞、HEL299细胞、SVHUC细胞
DOK细胞系相关产品:GM12878细胞、Nthy ori 3.1细胞、NB-19细胞
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H1876细胞系相关产品:22Rv-1细胞、Mo7e细胞、GC9811-P细胞
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NCI-H1581细胞系相关产品:ROS1728细胞、NCI-SNU-C2A细胞、GBC-SD细胞
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Meat Animal Research Center-145细胞系相关产品:Hu-P-T3细胞、CWR22R细胞、CCD-841-CoN细胞
HSC/mHSC细胞系相关产品:Human Embryonic Kidney 293细胞、Danio rerio Gill细胞、hESC细胞
NCIH446细胞系相关产品:Medical University of Graz-Chordoma 1细胞、Ketr3细胞、HRA 19细胞
Caki2细胞系相关产品:BE2C细胞、OKT 3细胞、CAL-78细胞
RCM1细胞系相关产品:J-82细胞、RMS 1598细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞
H-4细胞系相关产品:MV522细胞、EOC20细胞、RBL 1细胞
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Dunn LM8细胞系相关产品:343MG细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞、BMSCs(mBMSCs)细胞
MESSA Dx5细胞系相关产品:PASMCS细胞、CCD19-Lu细胞、U251细胞
SNU-368细胞系相关产品:AML12细胞、MS 751细胞、5-8F细胞
WM-239-A细胞系相关产品:Daudi细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞、MKN-28细胞
BT20细胞系相关产品:OV-90细胞、MDAMB361细胞、PANC-04-03细胞
MCF-12F细胞系相关产品:COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
NCI-H1693细胞系相关产品:MARC 145细胞、RCK8细胞、Hs888Lu细胞
MDA PCa 2b细胞系相关产品:COLO357细胞、NCI-H78细胞、HCT/FU细胞
H-1915细胞系相关产品:S180细胞、NPC-TW039细胞、Pt-K2细胞
NCI-H1437细胞系相关产品:H2141细胞、MV 3细胞、KBM-7/Hap8细胞
OVCAR432细胞系相关产品:LU-65M细胞、Malme-3M细胞、H-2030细胞
P3X63 Ag8.653细胞系相关产品:Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、HHL-5细胞、MDA231-LM2-4175细胞
MCF7细胞系相关产品:CHG5细胞、GES-1细胞、L132细胞
HCC-2108细胞系相关产品:Human Embryonic Skin细胞、N-9细胞、KYSE-520细胞
Clone 166细胞系相关产品:CCD-33Co细胞、COLO 320F细胞、SV40 MES 13细胞
HMEL Adherent永生上皮细胞系
Hs 737.T细胞系相关产品:293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞
HEK 293细胞系相关产品:WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞
EM-3细胞系相关产品:WERI-Rb-1细胞、SUP T1细胞、CNE-2细胞
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SUM-190细胞系相关产品:NCI-H1355细胞、FL62891细胞、Oka-C1细胞
CAL-33细胞系相关产品:COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞
SKNFI细胞系相关产品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞、NCI-H1155细胞、WBF344细胞
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HEK 293细胞系相关产品:WM266细胞、MDA.MB.231细胞、PF-382细胞
Madison lung细胞系相关产品:WEHI-279细胞、A431细胞、U118-MG细胞
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