"Kelly Adherent人神经母细胞瘤细胞系
细胞背景资料:神经母细胞瘤;女性
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Kelly Adherent人神经母细胞瘤细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
常见培养细胞预防污染的有效措施:体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手:1)添加抗生素:各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果好,预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性,且对细胞本身也有一定影响,因此为避免诱导抗药细菌,应定期更换培养系统中的抗生素,或尽可能不用抗生素处理;2)从物品、用品消毒灭菌着手:细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增大,滤膜破损的可能性增加,故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作:75%的酒精搽拭培养箱后,使用可移动的紫外灯至少消毒30min,加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制300ml的饱和酸铜加3L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。
Mhh-Call 2细胞系相关产品:GP2-293细胞、RBVEC细胞、J 774A.1细胞
BGC-823细胞系相关产品:Pa17C细胞、7404细胞、H-2106细胞
CCD-1095Sk细胞系相关产品:SCC 9细胞、hFOB 1.19细胞、HCO细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
TE 354.T细胞系相关产品:NFHIOSE-80细胞、EB-1细胞、RPMI 7951细胞
KNS-62细胞系相关产品:UMNSAH-DF-1细胞、SK-N-BE(2)细胞、MNNG/HOS细胞
Panc2.03细胞系相关产品:AMJ2-C8细胞、U266BL细胞、C 6细胞
细胞生长特性:贴壁
Kelly Adherent人神经母细胞瘤细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养相关培养基选购基本指南:如何选择培养基:经常听到有人问,这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单,也可以好复杂。为什么这样说呢?如果这种细胞是购自一些细胞库,那很简单,问供应商就行了。或者找到相关的文献,作为参考。培养基这么多种,要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的,或者是专门针对某一种细胞的,如昆虫基本培养基和神经祖细胞基础培养基, 但是大部分液体培养基都是专利配方的,也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐,然后用自己的细胞做几次传代培养来选出最合适的培养基。毕竟实践出真知。怎么样才可以买到好的培养基产品:首先,当然需要找对品牌,其次是找对自己所在区域的品牌代理商,针对自己所养的细胞,咨询供应商该选用哪种的培养基进行培养,这样就可以买到好的而且适合自己的培养基产品。关于培养基品牌,目前公司所知道的高校实验室有些同学在用Corning系列培养产品,也有同学在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的产品。培养基的选择和使用;MEM:成分简单,贴壁细胞;DMEM:分高糖型和低糖型;IDMEM:适合细胞密度低,生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选,DNA转染后转化细胞的筛选培养;RPM1640:应用最广泛的培养基之一。悬浮细胞培养,主要针对淋巴细胞,也适合其他细胞;199、109培养基:成分齐全,培养效果较好;F10培养基:适合小鼠及人类二倍体细胞培养;F12培养基:适合单细胞分离培养及无血清培养;McCoy’s5A培养基:特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。
MC3T3-E细胞系相关产品:SK-RC-42细胞、LNCaP细胞、FLC7细胞
CAKI1细胞系相关产品:Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞
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SW 620细胞系相关产品:H-650细胞、SKMEL2细胞、Hs695细胞
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Kelly Adherent人神经母细胞瘤细胞系
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SW 13细胞系相关产品:CCD18Co细胞、UMUC-14细胞、CAOV4细胞
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细胞、Colo741细胞、D10G41细胞
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