"H22-H8D8 Adherent小鼠肝癌细胞系
细胞背景资料:肝癌
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
H22-H8D8 Adherent小鼠肝癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的衰老:体外细胞培养实验证明:成纤维细胞:来自胎儿传代50次后衰老死亡,来自成人传代20次后衰老死亡(与具体年龄有关;来自小鼠传代14--28次后衰老死亡,来自乌龟传代90--125次后衰老死亡。细胞衰老过程中会发生一系列的变化,包括:蛋白质合成速度降低,已有蛋白质结构变化,特异蛋白质成份出现;同时,细胞核,线粒体,膜系统、骨架系统等都有结构、功能的改变。细胞衰老原因,尚无定论,出现过好几种理论与假说,其中得到较广泛认可的是“自由基损伤假说”。细胞凋亡:细胞的死亡是个体存活的正常现象,常见的细胞死亡形式有3种:坏死、凋亡和细胞毒性。多细胞生物的生命活动中,因为环境因素的突然变化或病原物的入侵,导致一部分细胞死去,称为细胞的病理死亡,或细胞坏死。坏死是细胞暴露于严重的物理或化学刺激时导致的细胞死亡;细胞毒性是由细胞或者化学物质引起的单纯的细胞杀伤事件,不依赖于其它两种细胞死亡机理,如杀伤T细胞的细胞毒性作用。还有一种情况,一部分细胞的死亡是生物个体正常生命活动(代谢、生长、发育、分化)的一个必要部分;似乎带有“牺牲局部,保全整体”的意味。这种情况下的细胞死亡,明显地受遗传控制,称为细胞凋亡。凋亡(Apoptosis)则是程序性的、正常的细胞死亡,是机体清除无用的或者不想要的细胞的手段。它与细胞坏死是两个截然不同的过程,无论从形态学、生物学还是生化的特征来说,都有明显的区别。细胞凋亡现象普遍存在于生物界。细胞凋亡与细胞增殖、分化和衰老起着互补与平衡的作用,在多细胞动物的发育、形态建成与维持中扮演至关重要的角色。作为细胞的一种基本生命现象,凋亡失控的结果将是可怕的:凋亡不足时,易发生癌变、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡过量则可能产生获得性免疫缺陷综合征(HIV)、重症肝炎与退行性神经疾病,如老年性痴呆症(Alzheimer""s disease)、帕金森氏症(Parkinson""s disease)。因此研究细胞凋亡及其机理具有重要的理论和实践意义。
KS-1 [Human glioblastoma]细胞系相关产品:BEL 7405细胞、BC-021细胞、TE-7细胞
GCT细胞系相关产品:BRL-3A细胞、M1细胞、EFM-192B细胞
RKO_AS45细胞系相关产品:NCL-H548细胞、X63-Ag8.653细胞、Saos2细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
AGS细胞系相关产品:Glioma 261细胞、B 95.8细胞、H-596细胞
SCC9细胞系相关产品:NCI-H2135细胞、CCD-841-CoTr细胞、NIH:OVCAR-10细胞
LC-1Sq细胞系相关产品:NCIH2172细胞、Hs 281.T细胞、Ramos G6.C10细胞
细胞生长特性:半贴壁
H22-H8D8 Adherent小鼠肝癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
Caco-2/BBe细胞系相关产品:TB-1 Lu细胞、NB4细胞、TE 671细胞
U-118-MG细胞系相关产品:KP4细胞、Hs611T细胞、NB-9细胞
PNT-1A细胞系相关产品:SV40 MES 13细胞、A9 (Hamprecht)细胞、GMK,BSC-1细胞
H-524细胞系相关产品:SRA01/04细胞、FC33细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞
KM932细胞系相关产品:T-24细胞、Caco-2细胞、HRC-99细胞
NCI-H1155细胞系相关产品:H-146细胞、MDCK-II细胞、RSMC细胞
SNK6细胞系相关产品:BJA-B1细胞、H69C细胞、CCC-HPF-1细胞
HPDLF细胞系相关产品:HCC2935细胞、MLO-Y4细胞、J774 A.1细胞
SNU-869细胞系相关产品:P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞
MDA-MB-134-VI细胞系相关产品:MDA-MB436细胞、TGW-nu细胞、RAOEC细胞
RAOEC细胞系相关产品:KNS62细胞、WSU-HN13细胞、H-1355细胞
AAV293细胞系相关产品:COS1细胞、MLE12细胞、NCIH2171细胞
HuCCT-1细胞系相关产品:T-98细胞、AR-42J细胞、RPMI1788细胞
H22-H8D8 Adherent小鼠肝癌细胞系
COLO-320细胞系相关产品:AML-12细胞、LLCMK2细胞、SSP-25细胞
R1800[RA]细胞系相关产品:EFM-192A细胞、NCI H716细胞、NCI-SNU-398细胞
Jurkat-E6细胞系相关产品:Baby Hamster Kidney-21细胞、WM-451Lu细胞、NIH 3T6细胞
Jurkat-E6细胞系相关产品:Baby Hamster Kidney-21细胞、WM-451Lu细胞、NIH 3T6细胞
CCD33Co细胞系相关产品:T-47D细胞、U118-MG细胞、Leukemia L1210细胞
HAPI细胞系相关产品:ARO细胞、H1944细胞、NCIH2227细胞
HCT GEO细胞系相关产品:ISHI细胞、Rainbow Trout Embryo细胞、T_T_细胞
BaF3细胞系相关产品:ECV304细胞、NCIH526细胞、H-1437细胞
CL-34细胞系相关产品:MDA134细胞、IOSE-29细胞、Hep 3B细胞
Reuber H-35细胞系相关产品:STO细胞、Hs940-T细胞、PL 5细胞
Ku812F细胞系相关产品:159PT细胞、GC-2细胞、CD-18细胞
CNE-2细胞系相关产品:HCT15细胞、RMC-1细胞、MDA-330细胞
hSCC-25细胞系相关产品:SF 295细胞、K1735细胞、HDF-a细胞
no.11细胞系相关产品:HCE-2 [50.B1]细胞、THC-8307细胞、HCA-7细胞
RPMI-6666细胞系相关产品:SKG3A细胞、MC-116细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞
Chinese Hamster Lung细胞系相关产品:H-1568细胞、PNT1-a细胞、COLO-320-DM细胞
LNCaP-ATCC细胞系相关产品:MLA 144细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞、P3HRI细胞
EFM-19细胞系相关产品:SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞
SU86_86细胞系相关产品:HFL-I细胞、Melan-a细胞、L-Wnt3A细胞
CAL78细胞系相关产品:MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞
CL34细胞系相关产品:HuP-T4细胞、RCCJF细胞、OCI AML3细胞
NCC-IT细胞系相关产品:NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞
MDAMB415细胞系相关产品:293F细胞、SCL-I细胞、MDA436细胞
NCIH889细胞系相关产品:LS180细胞、SK-HEP-1细胞、FHL 124细胞
DF1细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、H838细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞
TE8细胞系相关产品:RASMC细胞、NKM-1细胞、PLA-801D细胞
McCoy B细胞系相关产品:SNU16细胞、NCIH1373细胞、BEL-7405细胞
LS513细胞系相关产品:OCI Ly1细胞、A-10细胞、NCI-H102细胞
SKOV-433细胞系相关产品:H1703细胞、Hs 729.T细胞、MC-26细胞
Ca9-22细胞系相关产品:C643细胞、MV-4-11细胞、NCIH128细胞
HNE-3细胞系相关产品:SK ES 01细胞、SK 1细胞、HOS-MNNG细胞
CMT-93细胞系相关产品:Bac1 2F5细胞、D341MD细胞、H1105细胞
AE1201细胞系相关产品:COLO 357细胞、WM-266-mel细胞、MM1S细胞
AgC11x3A细胞系相关产品:Cloudman M3细胞、SUM 102细胞、NTera 2/cl.D1细胞
MDAPC2B细胞系相关产品:M07e细胞、H2106细胞、SF539细胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞系相关产品:Mono Mac 6细胞、HOS-MNNG细胞、LN-229细胞
TCC Sup细胞系相关产品:Hs 695.T细胞、OCI-Ly01细胞、OCILY10细胞
HBVSMC细胞系相关产品:CAL-27细胞、Kelly细胞、OCI AML4细胞
HSAS1细胞系相关产品:hEM15A细胞、NSH细胞、rHSC-99细胞
SNU1040细胞系相关产品:16HBE14o-细胞、PLA-801D细胞、RSC 96细胞
NS20Y细胞系相关产品:MA-782细胞、bEnd.3[BEND3]细胞、Mc Coy细胞
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞系相关产品:HS940细胞、S.B.细胞、Ca761细胞
H22-H8D8 Adherent小鼠肝癌细胞系
NTC200细胞系相关产品:SUPB15细胞、SK-ES细胞、P815细胞
OAW-42细胞系相关产品:SKNDZ细胞、Granta519细胞、NCIH2085细胞
MDA-MB 453细胞系相关产品:LoVo细胞、NCI-H727细胞、2780CP细胞
OCI-AML-2细胞系相关产品:PSN1细胞、DMS79细胞、KLE细胞
CCD-841-CoTr细胞系相关产品:MEF (CF-1)细胞、LS513细胞、HCoEpiC细胞
DU-145细胞系相关产品:HRGEC细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、Hx-147细胞
LU451细胞系相关产品:J82 COT细胞、NCI-H1238细胞、MRC 5细胞
N1S1细胞系相关产品:NTera2 cl.D1细胞、373MG细胞、RCF细胞
YD-15细胞系相关产品:Ketr3细胞、NSC34细胞、Panc-10.05细胞
KYSE520细胞系相关产品:TE-85细胞、CMT64细胞、HPDE细胞
PC2细胞系相关产品:Nb2细胞、NCI-SNU-1040细胞、H-2110细胞
PNT-1A细胞系相关产品:SV40 MES 13细胞、H-841细胞、EPC细胞
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