"OVSAHO Adherent人卵巢癌细胞系
细胞背景资料:卵巢癌;女性
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
OVSAHO Adherent人卵巢癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
P560细胞系相关产品:HuT-78细胞、H889细胞、OVCAR-10细胞
KYSE30细胞系相关产品:MCF7/WT细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞、HCA7细胞
C4-2 B细胞系相关产品:AR41P细胞、EB-3细胞、Panc-813细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HBE135-E6E7细胞系相关产品:WERIRb1细胞、NFS 60细胞、GalK1细胞
OKT3细胞系相关产品:TNC-1B12B4细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞、343 MG细胞
T/G HA VSMC细胞系相关产品:10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞
细胞生长特性:贴壁
OVSAHO Adherent人卵巢癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
UMNSAH/DF#1细胞系相关产品:SUM 149细胞、HELF细胞、IEC-18细胞
HOK细胞系相关产品:T98 G细胞、HSC-2细胞、SW962细胞
Blotchy fibroblast-11细胞系相关产品:Mevo细胞、OCI-AML-3细胞、UMC11细胞
16HBE14o-细胞系相关产品:Panc 3.27细胞、SGC7901细胞、HeLa/S3细胞
NCIH2009细胞系相关产品:FD-LSC-1细胞、CCD1095Sk细胞、CT26.WT细胞
U-251_MG细胞系相关产品:SKGT4细胞、MDA-MB-134VI细胞、A673细胞
DLD 1细胞系相关产品:PC-3细胞、MCF-12A细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞
ME16C细胞系相关产品:NCI-H250细胞、Hs-611-T细胞、3T3J2细胞
H-2227细胞系相关产品:HT1197细胞、HUT 125细胞、J.E6-1细胞
HEK-AD 293细胞系相关产品:H184A1细胞、M059K细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞
CA-46细胞系相关产品:B-95-8细胞、Daoy细胞、9L细胞
CC-LP-1细胞系相关产品:HCC-2279细胞、TE-11细胞、HEC1B细胞
H35细胞系相关产品:OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞
OVSAHO Adherent人卵巢癌细胞系
WPMY-1细胞系相关产品:8226细胞、K7M2-WT细胞、VM Cub 1细胞
NCI-H524细胞系相关产品:DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞
NCIH727细胞系相关产品:NCI-N87细胞、TN5B14细胞、SW1573细胞
Mouse Forestomach Carcinoma细胞系相关产品:MCA 205细胞、GM00346B细胞、Capan-1细胞
hTERT RPE-1细胞系相关产品:QGY-7703细胞、CCRFCEM细胞、G519细胞
CAL120细胞系相关产品:IMR90细胞、OCILY-19细胞、RK-13细胞
NCI-H2170细胞系相关产品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、BHT101细胞、COLO-824细胞
751细胞系相关产品:SK-NEP-1细胞、H-1792细胞、RIN-14B细胞
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16-HBE细胞系相关产品:MN60细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、IPLB-Sf21-AE细胞
Sc-1细胞系相关产品:RS 4;11细胞、SCI1细胞、D283MED细胞
Alexander cells细胞系相关产品:HEK 293 c18细胞、M2-10B4细胞、CAL 85-1细胞
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D-283MED细胞系相关产品:293 Ad5细胞、KMS-18细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞
LA-N-6细胞系相关产品:NCIH1781细胞、HLEC-SRA 01/04细胞、KLN 205细胞
WM239A细胞系相关产品:PC-3M-IE8细胞、OVCAR420细胞、TCMK1细胞
H1793细胞系相关产品:TGW-nu-1细胞、SVEC 4-10细胞、SK Mel 1细胞
EFM-192B细胞系相关产品:NCIH548细胞、CEK细胞、Hs 578T细胞
MKN 28细胞系相关产品:AG06814-N细胞、RPMI #1846细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞
HT 1080细胞系相关产品:KG1A细胞、SKNBE(2)细胞、RMG-1细胞
BC-020细胞系相关产品:C-8161细胞、Vero E6细胞、B-16细胞
H1573细胞系相关产品:HUT 125细胞、OSK-1细胞、NK-10A细胞
OE-33细胞系相关产品:MEC1细胞、Hs 934.T细胞、KM12 SM细胞
Hs 636.T细胞系相关产品:EFO-27细胞、HCC1428细胞、PAa细胞
HT144-mel细胞系相关产品:MDA MB 436细胞、C6细胞、IHH细胞
MKN 7细胞系相关产品:MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞
ACC-2细胞系相关产品:NCIH226细胞、U373 MG细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞
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rHSC-99细胞系相关产品:624细胞、Onda 11细胞、Panc327细胞
GEO细胞系相关产品:NCI-H1373细胞、BSC-40细胞、OCI-LY-7细胞
EBNA-293细胞系相关产品:SKNBE(1)细胞、QBC(939)细胞、GP5d细胞
PASMCS细胞系相关产品:138MG细胞、P3 88 D1细胞、DLD1细胞
MA104细胞系相关产品:ONS-76细胞、MOLM16细胞、HSC1细胞
P3/X63/Ag8细胞系相关产品:NCI-H1666细胞、HFSF细胞、CAL-62细胞
SK BR 03细胞系相关产品:3T3NIH细胞、KTC1细胞、Hs 739.T细胞
SW 1463细胞系相关产品:HCC202细胞、H-345细胞、GT38细胞
RCK-8细胞系相关产品:University of Arizona Cell Culture-893细胞、WC00079细胞、RPMI 7666细胞
RPMI #8226细胞系相关产品:He La细胞、LICR-LON-HN6-R细胞、SKNBE-2细胞
UMNSAH/DF-1细胞系相关产品:NCM-460细胞、NCIH1666细胞、H-1993细胞
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Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞系相关产品:U251细胞、SNU1040细胞、MLFC细胞
LA-795细胞系相关产品:NR 8383细胞、HTori 3细胞、DHL6细胞
OVSAHO Adherent人卵巢癌细胞系
TE-85 clone 5细胞系相关产品:TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞
OVCA5细胞系相关产品:PANC-10-05细胞、ML2细胞、MDA-MB-134-VI细胞
Homo sapiens No. 578, breast cells细胞系相关产品:TMK-1细胞、Ramos.2G6.4C10细胞、COLO 206F细胞
NCIH1048细胞系相关产品:SW-1573细胞、OCIAML5细胞、MDCC-MSB1细胞
Experimental Mammary Tumour-6细胞系相关产品:TE 354.T细胞、bEND.3细胞、QGY7703细胞
E.G7-OVA细胞系相关产品:EOC20细胞、CAKI 1细胞、AD-293细胞
P3X63Ag8653细胞系相关产品:A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞
C22 (Clara)细胞系相关产品:EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞
RPMI8226细胞系相关产品:TERT-RPE1细胞、PLA801-95C细胞、LIPF178C细胞
HT55细胞系相关产品:SUM 159PT细胞、MDA-MB-175VII细胞、OSC19细胞
SCC25细胞系相关产品:Hs-940细胞、S16细胞、BRL-3A细胞
Blotchy fibroblast-11细胞系相关产品:Mevo细胞、MOLT-16细胞、H1666细胞
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