"MC/9 Adherent小鼠肥大细胞系
细胞背景资料:肥大细胞;C57BL/6 x A/J
细胞形态:上皮细胞样
细胞培养无菌操作步骤和注意事项:1.打开无菌工作台及净化室的紫外灯,消毒半小时以上。2.进入净化室前先关闭紫外灯,打开超净台风机,等待30min以上,以排尽臭氧。3.穿好隔离衣,戴好口罩,帽子。4.风淋2分钟。5.0.1%水泡手,擦干。6.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管,滴管,试管,培养瓶等均事先灭菌。7.打开各类瓶盖前先过火,以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰,镊子使用前应经火焰烧灼。8.水平式风机的超净台,应使瓶口斜置,应尽量避免瓶口敞开直立。9.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系;吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口0.5cm,避免伸入培养瓶口或试管口;以防止细胞系的互相混杂污染。10.漏在培养瓶上或台上的液体,立即用酒精棉球擦净。11.操作完毕后恢复工作台面。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
MC/9 Adherent小鼠肥大细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
CT-26 WT细胞系相关产品:Line 697细胞、CAL33细胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞
RC92A细胞系相关产品:NCIH1648细胞、CCC-HEH-2细胞、HUT 125细胞
RH35细胞系相关产品:Hs606T细胞、SK-N-BE(2)C细胞、HCE-T细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Sp 2817细胞系相关产品:RPMI1846细胞、OUMS27细胞、NCI-BL6细胞
TE85细胞系相关产品:tdott细胞、NCIH208细胞、Hs 840.T细胞
no-11细胞系相关产品:MiaPaca.2细胞、KMB-17细胞、HRIF细胞
细胞生长特性:悬浮
MC/9 Adherent小鼠肥大细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
如何进行细胞复苏:1)从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化;2)从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;3)离心,1000rpm,5min;4)弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;5)次日更换一次培养液,继续培养。【温馨提醒】1)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液;2)将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作(戴棉手套),以免冻伤;3)冻存和复苏用新配制的培养液。细胞复苏的时候,有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后,放在室温下,经常发生冻存管爆炸,该怎么避免出现这种情况吗?其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的?一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口,再稍拧松盖子,再放37度水浴锅中摇溶,在将细胞转移到装有37度预热过的培养基的试管中,迅速离心,再用培养基洗一遍。
Blotchy fibroblast-11细胞系相关产品:Mevo细胞、OCI-AML-3细胞、UMC11细胞
NBLAN5T细胞系相关产品:KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞
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MC/9 Adherent小鼠肥大细胞系
HSC-6细胞系相关产品:PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞
EL-4细胞系相关产品:NHDF细胞、16HBE14o-细胞、MHCC-97细胞
NK92-MI细胞系相关产品:MPP 89细胞、CHP 126细胞、BRL3A细胞
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Tadarida brasiliensis 1 lung细胞系相关产品:JCA-1细胞、SCC15细胞、P30/OHK细胞
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OSC19细胞系相关产品:BL-6细胞、SEG-1细胞、SU86_86细胞
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NPC-TW-039细胞系相关产品:MDAMB231细胞、OV433细胞、LWnt3A细胞
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KMBC细胞系相关产品:MKN-28细胞、TE 85 ClF-5细胞、Neukoplast细胞
WM115-mel细胞系相关产品:L-Wnt3A细胞、SK-MES1细胞、Pt K1细胞
HUC-1细胞系相关产品:NCI-H187细胞、Astrocyte type I clone细胞、TE-12细胞
OCI Ly3细胞系相关产品:Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞系相关产品:L 540细胞、RMC细胞、P3-X63-Ag8-653细胞
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RKOE6细胞系相关产品:SUM 190PT细胞、BCECs细胞、BC-3-H-I细胞
MC/9 Adherent小鼠肥大细胞系
NCI-H1648细胞系相关产品:CT26-clone 25细胞、UPCI:SCC154细胞、MSTO-211H细胞
H920细胞系相关产品:HG2855细胞、SPCA-1细胞、MA-c细胞
Farage OL细胞系相关产品:F-36P细胞、SK-RC 52细胞、SK-MEL5细胞
H2081细胞系相关产品:hFOB细胞、NCI-H2171细胞、CP70细胞
H2073细胞系相关产品:253J B-V细胞、CSQT-2细胞、McA-RH8994细胞
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L 929细胞系相关产品:SUNE-1细胞、HPAF-II/CD18细胞、H711细胞
NBL-4细胞系相关产品:UMRC-2细胞、Simpson细胞、NCI-H498细胞
NCI-HUT-520细胞系相关产品:P3J HR-1细胞、H-650细胞、COV 504细胞
VSMC细胞系相关产品:Hce8693细胞、NS20-Y细胞、HPDEC细胞
Mac-1细胞系相关产品:U87细胞、JROECL33细胞、Clone Y-1细胞
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