"M2-10B4 Adherent小鼠骨髓纤维原细胞系
细胞背景资料:骨髓;纤维原细胞;C57BL/6J X C3H/HeJ
细胞形态:上皮细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
M2-10B4 Adherent小鼠骨髓纤维原细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞复苏基本方法:1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。收到T25 flask细胞时,处理方式为:在寄送过程中,为避免起泡造成细胞脱落死亡,T25 flask均加满培养基。请检查flask外观,并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象,若有任何问题,不要打开盖子,请立即通知细胞实验室。将原封之T25 flask静置于37°C,5%CO2培养箱中,使细胞回温至37°C,并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后,于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用),仅留约5-10ml培养基于flask内,依一般培养方式再将细胞置入培养箱中,或细胞已长满盘,则将细胞做传代培养。
PSN1细胞系相关产品:SVEC4-10细胞、TOV21G细胞、DiFi细胞
SK-N-MC细胞系相关产品:Panc-02细胞、TE354T细胞、MDA-MB231细胞
SP2-0-Ag14细胞系相关产品:KNS-81细胞、Toledo细胞、MHH-CALL2细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCC-1833细胞系相关产品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、Panc 5.04细胞、HOCF细胞
HCC-1833细胞系相关产品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、Panc 5.04细胞、HOCF细胞
QGY7703细胞系相关产品:Jurkat77细胞、PK-15细胞、SuDHL 5细胞
细胞生长特性:贴壁
M2-10B4 Adherent小鼠骨髓纤维原细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
KOSC2细胞系相关产品:TALL-104细胞、SU-DHL2细胞、HGF-1细胞
NB4细胞系相关产品:Hep G2细胞、H524细胞、COR-L105细胞
NCIH3255细胞系相关产品:EAhy 926细胞、A-375细胞、VK2 (E6/E7)细胞
SUM 102细胞系相关产品:Swiss-3T3细胞、ID8/MOSEC细胞、NFS60细胞
CAL 62细胞系相关产品:NTC200细胞、TB1 Lu细胞、SP2-0-Ag14细胞
SVG p12细胞系相关产品:NCI-H1688细胞、HEP3B2细胞、CAL78细胞
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SCC090细胞系相关产品:A673细胞、MOLM13细胞、Lewis Lung细胞
NL20SV细胞系相关产品:MA-c细胞、NCI-SNU-398细胞、Jiyoye细胞
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HuH-6细胞系相关产品:CEM-C7细胞、4-1st细胞、M-1 myeloid leukemia细胞
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526-mel细胞系相关产品:MMAc-Serum Free细胞、LLC-MK2细胞、JROECL 19细胞
Tu-212细胞系相关产品:SNU-475细胞、NCI-H526细胞、V79-4细胞
GM02132C细胞系相关产品:HR-8348细胞、GLC82细胞、MC57G细胞
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SNU-16细胞系相关产品:2E8细胞、JurkatE6-1细胞、X63-Ag8.653细胞
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RCC10细胞系相关产品:LAPC4细胞、H2108细胞、P116细胞
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NCIH1299细胞系相关产品:H1650_CO细胞、JS1细胞、Swiss 3T6细胞
LAN5细胞系相关产品:SW 1463细胞、293GP细胞、H295细胞
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M-1 myeloid leukemia细胞系相关产品:NCI H69细胞、H69/P细胞、RAT2细胞
SUM190PT细胞系相关产品:PLA-801C细胞、MLE 12细胞、NOMO1细胞
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M2-10B4 Adherent小鼠骨髓纤维原细胞系
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