"hEM15A Adherent人永生化子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞系
细胞背景资料：子宫内膜间质细胞；永生化；女性
细胞形态：上皮细胞样
正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！还有一个最重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做好防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
hEM15A Adherent人永生化子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
OP-9细胞系相关产品：MADB-106细胞、RERF-LCMS细胞、Y3-Ag1.2.3细胞
LC1-Sq细胞系相关产品：SCI1细胞、NBL-2细胞、Pa17C细胞
Hs940T细胞系相关产品：A549/ATCC细胞、OCI AML5细胞、SGC-996细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CemT4细胞系相关产品：HCC-1937细胞、X63-Ag8细胞、GM2219C细胞
BALB 3T3 clone A31细胞系相关产品：MG-63细胞、PL45细胞、TM-3细胞
GM00637B细胞系相关产品：Neukoplast细胞、L-M(TK-)细胞、alphaTC1 Clone 6细胞
细胞生长特性：贴壁
hEM15A Adherent人永生化子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或高过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
SNUC1细胞系相关产品：HSC3细胞、PY8119细胞、AML-EOL-1细胞
A2008细胞系相关产品：OsACL细胞、AU-Mel细胞、H-35 Reuber细胞
U373MG细胞系相关产品：TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞
IPLB-SF-21细胞系相关产品：Z-138细胞、COLO320 DM细胞、786O细胞
GM02131A细胞系相关产品：B16/F10细胞、PLC-8024细胞、MDA MB 453细胞
McA-RH7777细胞系相关产品：H-1373细胞、SUM-149细胞、SMC-1细胞
H-676细胞系相关产品：X63-Ag 8.6.5.3细胞、Hs742T细胞、H1238细胞
H1341细胞系相关产品：T47D:A细胞、TE354.T细胞、H-1666细胞
SKMEL28细胞系相关产品：Panc 05.04细胞、Pt K1细胞、PC3M-1E8细胞
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IPLB-Sf21细胞系相关产品：OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞
Tu 177细胞系相关产品：KP-4细胞、NCI-SNU-1细胞、H-82细胞
TCam-2细胞系相关产品：SKMES-1细胞、NB-9细胞、HFF细胞
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Tu-686细胞系相关产品：HEK-AD 293细胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、ROS 17/2.8细胞
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CL MC/9细胞系相关产品：HFL 1细胞、Walker256-TC细胞、NOR-10细胞
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Panc 04.03细胞系相关产品：Mono-Mac-1细胞、T2(174 x CEM.T2)细胞、L428细胞
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NRCC细胞系相关产品：Fu97细胞、8505C细胞、COLO320HSR细胞
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R 2 C细胞系相关产品：CCD-841-CoTr细胞、MDA-468细胞、HCEC-12细胞
293A细胞系相关产品：WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞
OSRC2细胞系相关产品：GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞
NS20Y细胞系相关产品：MA-782细胞、bEnd.3[BEND3]细胞、Mc Coy细胞
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Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞系相关产品：PCI-4B细胞、KATO III细胞、GFP-Olig2细胞
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MCF12F细胞系相关产品：hs 68细胞、MGc80-3细胞、TM4细胞
PK-15细胞系相关产品：PIGI细胞、SK Mel28细胞、GB1细胞
BSC-1细胞系相关产品：COV 504细胞、Tn5B1-4细胞、RBMVEC细胞
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Psi-2 DAP细胞系相关产品：HFT 8810细胞、MDA MB231细胞、HOC1细胞
ES2细胞系相关产品：OCI AML5细胞、Kelly细胞、MZ-CRC-1细胞
U373MG细胞系相关产品：TE85细胞、PANC-02-03细胞、BSC-40细胞
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