"PG13 Adherent逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞系
细胞背景资料：胚胎；成纤维细胞
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
PG13 Adherent逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
HCT8细胞系相关产品：P3 NS1 Ag4细胞、G361mel细胞、MDA MB231细胞
MDA-361细胞系相关产品：MCF7-CTRL细胞、C-28/I2细胞、MFE-280细胞
OV1063细胞系相关产品：KYSE-30细胞、Colon38细胞、KMS-18细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MA-104细胞系相关产品：Rin-M-5F细胞、RT4-D6P2T细胞、UMR106细胞
MA-104细胞系相关产品：Rin-M-5F细胞、RT4-D6P2T细胞、UMR106细胞
Med 341细胞系相关产品：373MG细胞、HG2855细胞、U-87 MG细胞
细胞生长特性：贴壁
PG13 Adherent逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
Reuber H-35细胞系相关产品：STO细胞、Hs940-T细胞、PL 5细胞
WM2664细胞系相关产品：A-172 MG细胞、P3J HR1-K细胞、KYSE 50细胞
HEK.EBNA细胞系相关产品：NCIH2196细胞、WM115F细胞、NCIH226细胞
WSU-DLCL-2细胞系相关产品：UWB1.289+BRCA1细胞、MuM-2C细胞、H.Ep.-2细胞
SW-13细胞系相关产品：B35细胞、RH35细胞、MCF-7B细胞
BE(2)-M17细胞系相关产品：H-774细胞、A2780细胞、beta-TC6细胞
WM-266-4细胞系相关产品：CCD-966SK细胞、T-HSC细胞、MCF-7/ADR-RES细胞
PANC 203细胞系相关产品：TE4细胞、WEHI-3细胞、L-WRN细胞
Vero细胞系相关产品：H3255细胞、A-375SM细胞、32D.3细胞
SKO-007细胞系相关产品：HCC1833细胞、NBL-5细胞、HKBML细胞
Walker 256细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、GBC-SD细胞、BHP 10-3细胞
EOC 20细胞系相关产品：SK-N-BE(1)n细胞、HRMC细胞、CORL23细胞
OSC-19细胞系相关产品：BE2_C细胞、MDA 1386细胞、CL 1-0细胞
PG13 Adherent逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞系
SN12C-PM6细胞系相关产品：NBL-5细胞、SK-N-FI细胞、Strain KB细胞
ECV304细胞系相关产品：H82细胞、3T3L1细胞、GOS-3细胞
CCRF.CEM细胞系相关产品：OCIAML2细胞、SUDHL-16细胞、Hs 688(A).T细胞
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BC-3-H-I细胞系相关产品：CHP126细胞、Lewis Lung细胞、NBL-3细胞
IM 9细胞系相关产品：3T3 J2细胞、16HBEo-细胞、PANC 203细胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞系相关产品：Mono Mac 6细胞、HOS-MNNG细胞、LN-229细胞
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H69C细胞系相关产品：H522细胞、MEF (CF-1)细胞、Jurkat E6-1细胞
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Wien 133细胞系相关产品：NCI-H1404细胞、KLM-1细胞、MNNG细胞
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NIH:OVCAR4细胞系相关产品：Ly8细胞、CHL-1细胞、DK-MG细胞
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Epithelioma Papulosum Cyprini细胞系相关产品：EOMA细胞、McCoy B细胞、MES-SA Dx5细胞
Nthy ori 3.1细胞系相关产品：SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞
Baby Hamster Kidney-21细胞系相关产品：UMC-11细胞、SW527细胞、HCC4006细胞
CEM/C1细胞系相关产品：H-2106细胞、DH-82细胞、NK-92.05细胞
Hs27细胞系相关产品：K299细胞、OS-732细胞、HCC-44细胞
H2009细胞系相关产品：MCF7细胞、OC-316细胞、HEK293-H细胞
RS4-11细胞系相关产品：H1688细胞、H-292细胞、C-643细胞
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HSF2细胞系相关产品：ssMCF-7细胞、Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、NCI-H2196细胞
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KYSE-180细胞系相关产品：SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞
SCC15细胞系相关产品：H1092细胞、NCI-H1694细胞、Colo699细胞
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COLO 320DM细胞系相关产品：4T1.2细胞、R2C细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞
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H-1672细胞系相关产品：PC3M细胞、Calu-3细胞、SK MEL 28细胞
RH30SJ细胞系相关产品：End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞
SK-N-AS细胞系相关产品：FDCP-1细胞、NCI N87细胞、CCRF细胞
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Hs895.T细胞系相关产品：BMU-S1细胞、D10细胞、H1395细胞
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CHL/IU细胞系相关产品：NCI-747细胞、DoTc2细胞、MOLP8细胞
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HuT102细胞系相关产品：PLA-801D细胞、RPMI-8226细胞、NCl-H157细胞
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HEp-2细胞系相关产品：Jurkat-E6细胞、H-889细胞、RGC-6细胞
HEK AD293细胞系相关产品：P3-X63.Ag8.653细胞、LN229细胞、SU4细胞
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