"PT67 Adherent小鼠逆转录病毒包装细胞系
细胞背景资料:逆转录病毒包装细胞;雄性;NIH Swiss
细胞形态:上皮细胞样
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
PT67 Adherent小鼠逆转录病毒包装细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的衰老:体外细胞培养实验证明:成纤维细胞:来自胎儿传代50次后衰老死亡,来自成人传代20次后衰老死亡(与具体年龄有关;来自小鼠传代14--28次后衰老死亡,来自乌龟传代90--125次后衰老死亡。细胞衰老过程中会发生一系列的变化,包括:蛋白质合成速度降低,已有蛋白质结构变化,特异蛋白质成份出现;同时,细胞核,线粒体,膜系统、骨架系统等都有结构、功能的改变。细胞衰老原因,尚无定论,出现过好几种理论与假说,其中得到较广泛认可的是“自由基损伤假说”。细胞凋亡:细胞的死亡是个体存活的正常现象,常见的细胞死亡形式有3种:坏死、凋亡和细胞毒性。多细胞生物的生命活动中,因为环境因素的突然变化或病原物的入侵,导致一部分细胞死去,称为细胞的病理死亡,或细胞坏死。坏死是细胞暴露于严重的物理或化学刺激时导致的细胞死亡;细胞毒性是由细胞或者化学物质引起的单纯的细胞杀伤事件,不依赖于其它两种细胞死亡机理,如杀伤T细胞的细胞毒性作用。还有一种情况,一部分细胞的死亡是生物个体正常生命活动(代谢、生长、发育、分化)的一个必要部分;似乎带有“牺牲局部,保全整体”的意味。这种情况下的细胞死亡,明显地受遗传控制,称为细胞凋亡。凋亡(Apoptosis)则是程序性的、正常的细胞死亡,是机体清除无用的或者不想要的细胞的手段。它与细胞坏死是两个截然不同的过程,无论从形态学、生物学还是生化的特征来说,都有明显的区别。细胞凋亡现象普遍存在于生物界。细胞凋亡与细胞增殖、分化和衰老起着互补与平衡的作用,在多细胞动物的发育、形态建成与维持中扮演至关重要的角色。作为细胞的一种基本生命现象,凋亡失控的结果将是可怕的:凋亡不足时,易发生癌变、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡过量则可能产生获得性免疫缺陷综合征(HIV)、重症肝炎与退行性神经疾病,如老年性痴呆症(Alzheimer""s disease)、帕金森氏症(Parkinson""s disease)。因此研究细胞凋亡及其机理具有重要的理论和实践意义。
OsA-CL细胞系相关产品:TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞
SHZ-88细胞系相关产品:PF382细胞、NCIH1648细胞、Metastatic Variant 522细胞
HSC-4细胞系相关产品:RPMC细胞、COLO 679细胞、SK-N-BE细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
B16BL6细胞系相关产品:HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞
EVSA/T细胞系相关产品:OCI/AML-5细胞、NCI-H196细胞、A9细胞
OV433细胞系相关产品:HMO6细胞、SH-SY5Y细胞、RSC96细胞
细胞生长特性:贴壁
PT67 Adherent小鼠逆转录病毒包装细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
B16/F0细胞系相关产品:P3/ag细胞、SW-839细胞、ATN1细胞
CCC-HPF-1细胞系相关产品:rHSC-99细胞、COLO-205细胞、U138-MG细胞
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PT67 Adherent小鼠逆转录病毒包装细胞系
HB611细胞系相关产品:HTR8/SVneo细胞、Human Kidney-2细胞、HCFB(HCF)细胞
U87细胞系相关产品:PANC1005细胞、ECC10细胞、RCM1细胞
WC00059细胞系相关产品:GM01232细胞、LTEPa2细胞、NCI H157细胞
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Liver-02细胞系相关产品:MC-4细胞、GM00637F细胞、Ca-Ski细胞
OVCAR 420细胞系相关产品:Panc 02.03细胞、GM01232细胞、Hs675T细胞
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16-HBEo细胞系相关产品:Normal Rat Kidney-49F细胞、OSC-19细胞、NCIH1915细胞
HPMEC细胞系相关产品:Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
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4T1-LUC细胞系相关产品:HEL-92.1.7细胞、BT-325细胞、H650细胞
NCI-H23细胞系相关产品:HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞
MMAc.SF细胞系相关产品:PIEC细胞、NCIH2452细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞
PT67 Adherent小鼠逆转录病毒包装细胞系
Det 562细胞系相关产品:Loucy细胞、G402细胞、NCI-H1882细胞
H-838细胞系相关产品:CCLP-1细胞、ACC3细胞、IMR 90细胞
MDA-468细胞系相关产品:HOC-1细胞、SO-Rb 50细胞、TCCPAN2细胞
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