"TH1 Adherent小鼠调节T细胞系
细胞背景资料：调节T细胞
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
TH1 Adherent小鼠调节T细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-７０℃~-１９６℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-７０℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过０~２０℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。１ml冻存细胞使用１０~２０ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在３×１０(５)活细胞/ml；培养细胞１２到２４小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml冻存细胞加入到大约２５ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约８０x离心２到３分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为３×１０(５)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约１０１２个，可以区分为２００多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G１期开始时一个确定的点G０点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
IGR.OV1细胞系相关产品：HT 1197细胞、C38细胞、GM17346细胞
PLC/PRF/5细胞系相关产品：Ramos.G6.C10细胞、HEY A8细胞、OS-RC-2细胞
751-NA-15细胞系相关产品：SMA-560细胞、SW 480细胞、KYSE 70细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCIH2405细胞系相关产品：H-865细胞、SHG 44细胞、143TK-细胞
MG-63细胞系相关产品：TEV-1细胞、NRK-52E细胞、FK81细胞
alphaTC clone 6细胞系相关产品：L细胞、PK(15)细胞、Hs 683.T细胞
细胞生长特性：悬浮
TH1 Adherent小鼠调节T细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
SNUC2B细胞系相关产品：PaTu 8988 S细胞、H-727细胞、C-28/I2细胞
BEL-7402细胞系相关产品：5-8F细胞、P-36细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞
HuPT3细胞系相关产品：LU165细胞、624-mel细胞、COLO-738细胞
NG-108-15细胞系相关产品：TC-1 [Mouse lung]细胞、CL11细胞、BNL CL.2细胞
G-292, clone A141B1细胞系相关产品：Hs 766.T细胞、SCC-1395细胞、MT4细胞
BEL 7402细胞系相关产品：HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞
EU-4细胞系相关产品：FUOV1细胞、ZYM-DIEC02细胞、HEK-293F细胞
Leydig细胞系相关产品：CTSC-3细胞、BPH-1细胞、MC3T3-L1细胞
PE CA PJ34细胞系相关产品：H-716细胞、H-2286细胞、U-hth74细胞
TGW-I-nu细胞系相关产品：NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞
DHL-8细胞系相关产品：NS-1细胞、CAL-51细胞、PTK 2细胞
MDAMB-231细胞系相关产品：KTCTL140细胞、SUM 149PT细胞、PC3-M细胞
SF17细胞系相关产品：HCC2157细胞、OCI-Ly3细胞、SK-N-BE-2细胞
TH1 Adherent小鼠调节T细胞系
SL-29细胞系相关产品：MB39细胞、LED-WiDr细胞、E0771细胞
SKNF1细胞系相关产品：HAC-84细胞、SNU638细胞、AtT-20细胞
4175细胞系相关产品：OVCAR433细胞、MDCK II细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞
4175细胞系相关产品：OVCAR433细胞、MDCK II细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞
IPAM-WT细胞系相关产品：Mink细胞、Hs 822.T细胞、BEND细胞
ACC-3细胞系相关产品：4T1-LUC细胞、HRA 19细胞、SUM-149细胞
WEHI-3B细胞系相关产品：Okayama University Medical School-23细胞、H1385细胞、GA-10-Clone-4细胞
SKN-AS细胞系相关产品：NCI-H1238细胞、Glioma-261细胞、Earle's L cells细胞
F56 [Human neoplasm]细胞系相关产品：CL-11细胞、PANC-02-03细胞、TE-85 clone 5细胞
NALM 6细胞系相关产品：MDA-1386细胞、BT-549细胞、EC-109细胞
BC3 H1细胞系相关产品：Hs-27细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞、LAC细胞
NCIH2135细胞系相关产品：MES-SA-Dx5细胞、OE-21细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞
NCIH1651细胞系相关产品：KG-1细胞、HuT 78细胞、NCIH1792细胞
BGC-823细胞系相关产品：Pa17C细胞、7404细胞、H-2106细胞
Opossum Kidney细胞系相关产品：SK RC 52细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、NHA细胞
CEK细胞系相关产品：BEAS 2B细胞、HS 445T细胞、Calu-1细胞
HPAF-I细胞系相关产品：KM.12细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞、Hs 832(C).T细胞
7860细胞系相关产品：HPAF II细胞、IMR90细胞、RS411细胞
UCLA-SO-M20细胞系相关产品：HCC-2935细胞、Henrietta Lacks cells细胞、BC-3H-1细胞
H-820细胞系相关产品：PC-3M IE8细胞、HNE-2细胞、Onda 11细胞
OVISE细胞系相关产品：HCC1954BL细胞、H2087细胞、HM细胞
HCCLM6细胞系相关产品：LM3细胞、639 V细胞、Capan 2细胞
GB1细胞系相关产品：COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞
HeLa229细胞系相关产品：RT-BM-1细胞、CA-46细胞、OCI-Ly 7细胞
HTh-74细胞系相关产品：Mel-MeWo细胞、HSC-I细胞、YD-15细胞
HCEC-12细胞系相关产品：GM-637细胞、HSF2细胞、Normal Rat Kidney-49F细胞
HNE-2细胞系相关产品：KOPN-8细胞、CL1.0细胞、Hepa 1-6细胞
SW 1271细胞系相关产品：J774 A1细胞、T-T细胞、COLO-699细胞
H-1838细胞系相关产品：SVG p12细胞、H1734细胞、WM-239A细胞
H4IIE细胞系相关产品：H-1975细胞、M109细胞、C4I细胞
MN60细胞系相关产品：COLO-679细胞、VMRCRCZ细胞、WISH细胞
HTh-74细胞系相关产品：Mel-MeWo细胞、HSC-I细胞、YD-15细胞
WEHI-3B细胞系相关产品：Okayama University Medical School-23细胞、H1385细胞、GA-10-Clone-4细胞
Bovine ENDometrial cells细胞系相关产品：N9细胞、MDA-MB-134-VI细胞、CF Pac1细胞
D407细胞系相关产品：NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞
HOP62细胞系相关产品：UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞
H2227细胞系相关产品：ARPE19细胞、TW01细胞、COLO 741细胞
TE 354.T细胞系相关产品：NFHIOSE-80细胞、EB-1细胞、RPMI 7951细胞
WIL2 Secreting细胞系相关产品：H-441细胞、SNU-1细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞
SKMel-5细胞系相关产品：WC00097细胞、Hepatoma-22细胞、HL-1细胞
OVCAR-433细胞系相关产品：MDA-MB-435 S细胞、BC3H1细胞、Hs578Bst细胞
NK10a细胞系相关产品：HuTu 80细胞、UMUC14细胞、SN12PM6细胞
TH1 Adherent小鼠调节T细胞系
SCC9细胞系相关产品：NCI-H2135细胞、CCD-841-CoTr细胞、NIH:OVCAR-10细胞
McA-RH 8994细胞系相关产品：A-375细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞、SCL II细胞
Mouse Bladder Tumor line-2细胞系相关产品：NPA87-1细胞、Porcine Kidney-15细胞、IPLB-SF-21细胞
HCT GEO细胞系相关产品：ISHI细胞、Rainbow Trout Embryo细胞、T_T_细胞
H-1819细胞系相关产品：5637细胞、SKNDZ细胞、OCI-Ly3细胞
ST细胞系相关产品：HGF-1细胞、THPI细胞、RGM-1细胞
UPCISCC090细胞系相关产品：LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、2PK-3细胞、3T3F442A细胞
624mel细胞系相关产品：COLO206细胞、K-562细胞、HUT-28细胞
FRH-0201细胞系相关产品：LNCaP-Clone-FGC细胞、H-125细胞、SCLC-21H细胞
NCI-SNU-407细胞系相关产品：CAMA1细胞、BC-3H-1细胞、A2780/CP70细胞
NCI-H1819细胞系相关产品：NCIH2110细胞、TGW-nu-1细胞、A-427细胞
HuO9细胞系相关产品：SW1990细胞、Nb-2细胞、MCF 7B细胞
"
