"FL83B Adherent小鼠正常肝细胞系
细胞背景资料:肝;自发永生;C57BL/6J
细胞形态:上皮细胞样
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
FL83B Adherent小鼠正常肝细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的衰老:体外细胞培养实验证明:成纤维细胞:来自胎儿传代50次后衰老死亡,来自成人传代20次后衰老死亡(与具体年龄有关;来自小鼠传代14--28次后衰老死亡,来自乌龟传代90--125次后衰老死亡。细胞衰老过程中会发生一系列的变化,包括:蛋白质合成速度降低,已有蛋白质结构变化,特异蛋白质成份出现;同时,细胞核,线粒体,膜系统、骨架系统等都有结构、功能的改变。细胞衰老原因,尚无定论,出现过好几种理论与假说,其中得到较广泛认可的是“自由基损伤假说”。细胞凋亡:细胞的死亡是个体存活的正常现象,常见的细胞死亡形式有3种:坏死、凋亡和细胞毒性。多细胞生物的生命活动中,因为环境因素的突然变化或病原物的入侵,导致一部分细胞死去,称为细胞的病理死亡,或细胞坏死。坏死是细胞暴露于严重的物理或化学刺激时导致的细胞死亡;细胞毒性是由细胞或者化学物质引起的单纯的细胞杀伤事件,不依赖于其它两种细胞死亡机理,如杀伤T细胞的细胞毒性作用。还有一种情况,一部分细胞的死亡是生物个体正常生命活动(代谢、生长、发育、分化)的一个必要部分;似乎带有“牺牲局部,保全整体”的意味。这种情况下的细胞死亡,明显地受遗传控制,称为细胞凋亡。凋亡(Apoptosis)则是程序性的、正常的细胞死亡,是机体清除无用的或者不想要的细胞的手段。它与细胞坏死是两个截然不同的过程,无论从形态学、生物学还是生化的特征来说,都有明显的区别。细胞凋亡现象普遍存在于生物界。细胞凋亡与细胞增殖、分化和衰老起着互补与平衡的作用,在多细胞动物的发育、形态建成与维持中扮演至关重要的角色。作为细胞的一种基本生命现象,凋亡失控的结果将是可怕的:凋亡不足时,易发生癌变、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡过量则可能产生获得性免疫缺陷综合征(HIV)、重症肝炎与退行性神经疾病,如老年性痴呆症(Alzheimer""s disease)、帕金森氏症(Parkinson""s disease)。因此研究细胞凋亡及其机理具有重要的理论和实践意义。
GM04679细胞系相关产品:HEK-2细胞、CO115细胞、SK-RC-42细胞
C6细胞系相关产品:NCIH1975细胞、GNM细胞、MUTZ-3细胞
NCI-H1819细胞系相关产品:NCIH2110细胞、KYSE 510细胞、CNE1细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MLM细胞系相关产品:NCI-H1581细胞、NPA-87细胞、GM03320D细胞
H184A1细胞系相关产品:28SC细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞、Hs888 Lu细胞
U-251-MG细胞系相关产品:SW-962细胞、RPTEC TERT1细胞、Hs840T细胞
细胞生长特性:贴壁
FL83B Adherent小鼠正常肝细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
NCI-H2172细胞系相关产品:Pt K1细胞、NPC-TW 039细胞、Detroit 562细胞
NW-MEL-38细胞系相关产品:LL/2(LLc1)细胞、D324 Med细胞、NCIH1944细胞
SF-295细胞系相关产品:HSMC细胞、SUM-149PT细胞、Ly8细胞
SK HEP-1细胞系相关产品:HEK-293-H细胞、HTR8细胞、HTori 3细胞
MES-SA-Dx5细胞系相关产品:CAL-39细胞、3T3细胞、38C13细胞
Rat 1细胞系相关产品:HMrSV5细胞、NCI-H1792细胞、ACT-1细胞
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FL83B Adherent小鼠正常肝细胞系
Hs695细胞系相关产品:NB4细胞、C-33-A细胞、M109细胞
YD-15细胞系相关产品:Ketr3细胞、NSC34细胞、Panc-10.05细胞
H2591细胞系相关产品:Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞
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BNL CL2细胞系相关产品:BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞
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GA-10细胞系相关产品:NIH3T3-L1细胞、HIEC-6细胞、K1细胞
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Daudi细胞系相关产品:SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞
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FL83B Adherent小鼠正常肝细胞系
C17.2细胞系相关产品:U 138 MG细胞、Eca109细胞、U266S细胞
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