"CMT93 Adherent小鼠结肠癌细胞系
细胞背景资料:结肠癌;C57BL/ICRF
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CMT93 Adherent小鼠结肠癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
OCILY-10细胞系相关产品:P3-X63-Ag8-653细胞、WM 239A细胞、Cor L51细胞
NHLF细胞系相关产品:149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞
MEF细胞系相关产品:OKAC1细胞、SNT-8细胞、C8-D1A细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Walker256细胞系相关产品:NCI-H1993细胞、kms 11细胞、624mel细胞
SW 1271细胞系相关产品:J774 A1细胞、T-T细胞、COLO-699细胞
HOS/MNNG细胞系相关产品:H-2347细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞、JROECL19细胞
细胞生长特性:贴壁
CMT93 Adherent小鼠结肠癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
Centre Antoine Lacassagne-27细胞系相关产品:MDA435细胞、HIT-T15细胞、C17.2细胞
VP229细胞系相关产品:SW-1222细胞、HUT 226细胞、OCM-1A细胞
CFSC-2G细胞系相关产品:H2405细胞、CCD-18Co细胞、NK 10a细胞
LA-N-6细胞系相关产品:NCIH1781细胞、HLEC-SRA 01/04细胞、KLN 205细胞
118 MG细胞系相关产品:HNE3细胞、LK-2细胞、B16/F10细胞
LLC PK1细胞系相关产品:U20S细胞、LTEP-s细胞、JTC-28细胞
HUC-1细胞系相关产品:NCI-H187细胞、Astrocyte type I clone细胞、TE-12细胞
Jurkat E6-1细胞系相关产品:CLL-CII细胞、Colon-26细胞、HB 611细胞
NCI-H2126细胞系相关产品:NCIH1651细胞、BNL-HCC细胞、H-441细胞
32D clone 3细胞系相关产品:A875细胞、MDA231-LM2细胞、N-9细胞
VP 229细胞系相关产品:COLO-680N细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞、UM-UC3细胞
CL1.0细胞系相关产品:COR-L 105细胞、M14-MEL细胞、MMAc-Serum Free细胞
GA-10-Clone-4细胞系相关产品:MGH-U3细胞、NCIH2135细胞、SKLMS-1细胞
CMT93 Adherent小鼠结肠癌细胞系
HBL100细胞系相关产品:PLB985细胞、Mel RM细胞、SU-DHL-10细胞
NPC-TW01细胞系相关产品:Pfeiffer细胞、H1770细胞、C57/B6-L细胞
Huh-7细胞系相关产品:MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞
Huh-7细胞系相关产品:MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞
MRC5细胞系相关产品:SKNBE-1细胞、DSL6A/C1细胞、PCI-4B细胞
NCIH345细胞系相关产品:COLO 738细胞、MT4细胞、Jurkat clone A3细胞
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CCD 966SK细胞系相关产品:MS 751细胞、DHL8细胞、TGBC11TKB细胞
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IM-9细胞系相关产品:SW948细胞、CPA47细胞、NCL-H548细胞
QGY细胞系相关产品:CCD-1112sk细胞、IPLB-SF-21细胞、HCC-4006细胞
D-283 Med细胞系相关产品:KALS1细胞、HCC1954 BL细胞、RA-FLSs细胞
CAL 51细胞系相关产品:Bac 1.2F5细胞、Hs27细胞、L540细胞
MIN-6细胞系相关产品:SCC090细胞、DCS细胞、Caov-4细胞
Hs578Bst细胞系相关产品:RCC10 RGB细胞、A427细胞、EFM192C细胞
U20-S细胞系相关产品:MCF-12F细胞、OPM-2细胞、HuT-102细胞
MT-4细胞系相关产品:HPAC细胞、PANC0813细胞、BBE细胞
JB-6细胞系相关产品:H322细胞、NCIH740细胞、COLO 824细胞
COC1/CDDP细胞系相关产品:UCLA RO-81A-1细胞、IFRS1细胞、DHL-6细胞
KYSE510细胞系相关产品:Eph4 1424细胞、AE1201细胞、Ramos 2G6.4C10细胞
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NOMO-1细胞系相关产品:786-O细胞、CII细胞、HEK293T/17细胞
MKN1细胞系相关产品:MDCK2细胞、KLN-205细胞、Ly3细胞
Colo699细胞系相关产品:H-2330细胞、H-661细胞、HCT116/L细胞
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SCLC-21H细胞系相关产品:SPCA-1细胞、NCIH2107细胞、231-luc细胞
SHP77细胞系相关产品:HS-683细胞、PFSK细胞、TE-10细胞
Hs 578.T细胞系相关产品:OUMS-23细胞、CT26WT细胞、UMUC-14细胞
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VeroE6细胞系相关产品:HANK细胞、SF 767细胞、A-20细胞
Hep-G2/C3A细胞系相关产品:alpha TC1-6细胞、BJA-B-1细胞、aTC1-6细胞
SKLMS1细胞系相关产品:SCLC-21H细胞、PLA 802细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞
TOV-112D细胞系相关产品:ECGI10细胞、HEK293-H细胞、Hs68细胞
OCI-LY-19细胞系相关产品:CCD-18Co细胞、A-427细胞、NCIH2452细胞
CMT93 Adherent小鼠结肠癌细胞系
TM3细胞系相关产品:HRCEC细胞、NS653细胞、HSC-1细胞
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HR8348细胞系相关产品:DHL10细胞、LS174T细胞、DMS153细胞
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NCI-H1435细胞系相关产品:Rat-1细胞、MHCC97L细胞、NCI-H1668细胞
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