"HUVEC-C[HUVEC] Adherent人脐静脉血管内皮细胞系
细胞背景资料:脐静脉;内皮细胞
细胞形态:上皮细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HUVEC-C[HUVEC] Adherent人脐静脉血管内皮细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
PaCa2细胞系相关产品:NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞
OSC-19细胞系相关产品:BE2_C细胞、MDA 1386细胞、CL 1-0细胞
Panc 10.05细胞系相关产品:U373-MG细胞、CMT-93细胞、SNUC2A细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
GA-10-Clone-4细胞系相关产品:MGH-U3细胞、NCIH2135细胞、SKLMS-1细胞
HAEC细胞系相关产品:Baby Hamster Kidney 21细胞、A-72细胞、DU4475细胞
BE2C细胞系相关产品:H.Ep.-2细胞、DLD1细胞、LA4细胞
细胞生长特性:贴壁
HUVEC-C[HUVEC] Adherent人脐静脉血管内皮细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
FRhK-4细胞系相关产品:IEC-18细胞、EA hy 926细胞、WEHI-164细胞
MES 23.5细胞系相关产品:C2A细胞、Mono Mac6细胞、P3/ag细胞
NCI-SNU-C2A细胞系相关产品:SU 86.86细胞、TE4细胞、TE4细胞
HCM细胞系相关产品:HEK-AD293细胞、AG 9细胞、WIL2-S细胞
EOL1细胞系相关产品:H-2126细胞、NCI-SNU-475细胞、CMT.64细胞
KOSC-2 cl3-43细胞系相关产品:Calu6细胞、MDCC-MSB1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞
CoC1细胞系相关产品:D324细胞、L540细胞、74Int细胞
NCI-SNU-1040细胞系相关产品:DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞
HOCF细胞系相关产品:Psi2-DAP细胞、RPMI1788细胞、Clone Y1细胞
U-hth74细胞系相关产品:MEL-526细胞、HuT-78细胞、P3HR1细胞
OCI Ly1细胞系相关产品:NCIH1437细胞、P3X63 Ag8.653细胞、SUDHL-2细胞
MUGCHOR1细胞系相关产品:no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞
MES-SA/Dx-5细胞系相关产品:RS1细胞、HEK 293T/17细胞、HSCT6细胞
HUVEC-C[HUVEC] Adherent人脐静脉血管内皮细胞系
OCI-Ly01细胞系相关产品:Hs 578Bst细胞、COLO 699细胞、E6-1细胞
RPMI6666细胞系相关产品:CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞
HCC-366细胞系相关产品:NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞
HCC-366细胞系相关产品:NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞
GA-10(Clone 4)细胞系相关产品:hTERTHME1细胞、UCH1细胞、MKN-45细胞
KP2细胞系相关产品:Hs832.Tc细胞、PAa细胞、NRCC细胞
HO-8910PM细胞系相关产品:3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
X63-Ag8-653细胞系相关产品:CemT4细胞、C-4-I细胞、NCIH1155细胞
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32D clone 3细胞系相关产品:A875细胞、MDA231-LM2细胞、N-9细胞
SNB-19细胞系相关产品:LP1细胞、CCD18细胞、SKOV3细胞
HCC1954BL细胞系相关产品:HA1800细胞、S-16细胞、LOU-NH-91细胞
SW 1417细胞系相关产品:OB2细胞、SKMEL1细胞、U-2 OS细胞
SU 86.86细胞系相关产品:UWB1.289细胞、HEK-293 c18细胞、Hs840_T细胞
H-2591细胞系相关产品:HTori-3细胞、A549细胞、CCRF CEM细胞
HH [Human lymphoma]细胞系相关产品:NCIH1184细胞、H-1882细胞、C2A细胞
HEK 293-F细胞系相关产品:TR 146细胞、Chang liver细胞、RPMI No. 1846细胞
Th17细胞系相关产品:MIN-6细胞、SHIN3细胞、Eph4 1424细胞
OVCAR-10细胞系相关产品:IAR20细胞、NK-92MI细胞、Hs 895.T细胞
PLA802细胞系相关产品:CaES-17细胞、HS-5细胞、CCD-19Lu细胞
SUDHL1细胞系相关产品:GC-1 spg细胞、ZR7530细胞、Huh 7.5.1细胞
REC 1细胞系相关产品:HCC-4006细胞、U266B1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞
Sp2/mIL-6细胞系相关产品:MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞
NCI-H838细胞系相关产品:hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞
BSC-1细胞系相关产品:COV 504细胞、Tn5B1-4细胞、RBMVEC细胞
JJN-3细胞系相关产品:HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
Cloudman M3细胞系相关产品:Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞
D324 Med细胞系相关产品:HFL细胞、FHCRC-11细胞、PANC0504细胞
Hep 3B2_1-7细胞系相关产品:SMMC 7721细胞、QGP 1细胞、HEH2细胞
Centre Antoine Lacassagne-39细胞系相关产品:Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、High 5细胞、CD 18细胞
BEL 7404细胞系相关产品:Colo205细胞、JiyoyeP-2003细胞、HIMEC细胞
16-HBE14o细胞系相关产品:SN12-PM6细胞、HEC1-B细胞、P-388D1细胞
BC-PAP细胞系相关产品:NMCG-1细胞、QG56细胞、WM 239A细胞
B16BL-6细胞系相关产品:MMQ细胞、Ca 9-22细胞、H1755细胞
TM-3细胞系相关产品:LS174细胞、3T3-A31细胞、746T细胞
B95-8细胞系相关产品:TE 32.T细胞、CoC1细胞、118MG细胞
CCD966SK细胞系相关产品:KYSE-150细胞、Hs821T细胞、YD38细胞
OVCAR.8细胞系相关产品:H-446细胞、HCM细胞、IPLB-Sf21AE细胞
SCC 9细胞系相关产品:MLE-12细胞、SK-MEL-24细胞、GM03671C细胞
KP-N-RT细胞系相关产品:NCIH1563细胞、Ca-Ski细胞、HG2855细胞
KCL22S细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
EBC1细胞系相关产品:Panc 04.03细胞、NK 10a细胞、KNS-62细胞
HUVEC-C[HUVEC] Adherent人脐静脉血管内皮细胞系
SV40-MES13细胞系相关产品:KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞
ARO81-1细胞系相关产品:IBRS2细胞、Bowes melanoma cells细胞、CoCL2细胞
MM6细胞系相关产品:Kit225细胞、Rabbit Kidney 13细胞、C3A细胞
SK-SH-SY5Y细胞系相关产品:QGY-7701细胞、SKO007细胞、RS4;11细胞
LS411细胞系相关产品:H-2195细胞、NCI-H1668细胞、HCC1954细胞
MDA-MB-330细胞系相关产品:U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞
RPMI6666细胞系相关产品:CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞
526-mel细胞系相关产品:MMAc-Serum Free细胞、LLC-MK2细胞、JROECL 19细胞
MNNGHOS细胞系相关产品:BIC1细胞、V 79细胞、H28细胞
SJSA-1细胞系相关产品:PECAPJ34细胞、ESC细胞、KATOIII细胞
KPNRTBM1细胞系相关产品:32D clone3细胞、P3X63Ag8653细胞、TSCC1细胞
NCI-SNU-C2A细胞系相关产品:SU 86.86细胞、SKMEL3细胞、NK-92 MI细胞
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