"PIG1 Adherent正常人皮肤黑色素细胞系
细胞背景资料：皮肤；黑色素细胞；HPV１６转化；男性
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
PIG1 Adherent正常人皮肤黑色素细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
Hs 688(A).T细胞系相关产品：SCC25细胞、E.G7-OVA细胞、SK LU 1细胞
H-1993细胞系相关产品：Panc02细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞、293A细胞
Hep-3B细胞系相关产品：Hs445细胞、T24细胞、HOS/MNNG细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SK Hep1细胞系相关产品：D-324MED细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞、CCD841CoTr细胞
P3X63Ag8细胞系相关产品：HEK293A细胞、SCC-7细胞、SNU407细胞
C8D1A细胞系相关产品：NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞
细胞生长特性：贴壁
PIG1 Adherent正常人皮肤黑色素细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
KMS11细胞系相关产品：B 95-8细胞、HCA-7细胞、RBMEC细胞
PIGI细胞系相关产品：GTL 16细胞、HS-683细胞、Y3细胞
LLCMK2细胞系相关产品：L615细胞、Hs888Lu细胞、Hs_578t细胞
FU-MMT-1细胞系相关产品：KG-1a细胞、H-522细胞、SK-Mel 2细胞
NK-10A细胞系相关产品：X63细胞、EFO 27细胞、LL/2(LLc1)细胞
Jurkat (clone E6-1)细胞系相关产品：SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞
Colon-26细胞系相关产品：LN 382细胞、PM6细胞、COLO 357细胞
KYSE-70细胞系相关产品：HEK/293细胞、NCI-H82细胞、Nthy-ori 3.1细胞
MLO-Y4细胞系相关产品：HELF细胞、Hs 832(C).T细胞、Jiyoye (P-2003)细胞
Strain L-929细胞系相关产品：LED-WiDr细胞、H1915细胞、MT-4细胞
RDES-1细胞系相关产品：HuT 78细胞、U-373-MG细胞、C-Lu-65细胞
HT-22细胞系相关产品：HCC 70细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞、Walker 256细胞
FOXNY细胞系相关产品：B16/F1细胞、P815细胞、251 MG细胞
PIG1 Adherent正常人皮肤黑色素细胞系
L细胞系相关产品：PMVEC细胞、DU-4475细胞、NCI-SNU-668细胞
TOV-112D细胞系相关产品：ECGI10细胞、HEK293-H细胞、Hs68细胞
ECC-1细胞系相关产品：3T3 Swiss Albino细胞、Neuro2a细胞、H2126细胞
ECC-1细胞系相关产品：3T3 Swiss Albino细胞、Neuro2a细胞、H2126细胞
RSC-96细胞系相关产品：SKRC-52细胞、769-P细胞、SUM 52PE细胞
NT-2细胞系相关产品：CATH.a细胞、CT 26细胞、3T3-L1细胞
H1436细胞系相关产品：Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞
Human ErythroLeukemia细胞系相关产品：EBC-1细胞、LAN6细胞、GM3570细胞
OVCAR-420细胞系相关产品：LICR-HN-6细胞、MDA435细胞、SNU-216细胞
ARPE19细胞系相关产品：Balb/3T3-4-Cl31细胞、U 937细胞、IM 9细胞
WM2664细胞系相关产品：A-172 MG细胞、P3J HR1-K细胞、KYSE 50细胞
GS9L细胞系相关产品：Mouse INsulinoma 6细胞、RAMOS2G64C10细胞、RGE细胞
PIGI细胞系相关产品：GTL 16细胞、HS-683细胞、Y3细胞
SK-MEL-31细胞系相关产品：CHO cell clone K1细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、PC 61.5.3细胞
RPMI 1846细胞系相关产品：AMC-HN8细胞、CMT64细胞、TE85细胞
NCIH2291细胞系相关产品：Mouse Colon 38细胞、WB F344细胞、KE37细胞
KYSE 520细胞系相关产品：H2122细胞、RC-4B/C细胞、NCIH889细胞
HGSMC细胞系相关产品：TE12细胞、RC92A细胞、NCI H82细胞
RIN14B细胞系相关产品：CFSC-8B细胞、SCC-15细胞、LC-1-sq细胞
J.E6-1细胞系相关产品：JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞
Hs.27细胞系相关产品：H-526细胞、Hs 578Bst细胞、Nb 2细胞
CEMO-1细胞系相关产品：HCC-1395细胞、MADB 106细胞、NUGC-3细胞
H-2330细胞系相关产品：Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
293EBNA细胞系相关产品：GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞
CL 1-5细胞系相关产品：PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞
Clone Y-1细胞系相关产品：C-Lu65细胞、H1666_DA细胞、CCLP1细胞
CCK-81细胞系相关产品：H6c7细胞、MA-c细胞、Mouse Colon 38细胞
B16F0细胞系相关产品：HEK-293-FT细胞、NCI H2106细胞、MLA144细胞
VE细胞系相关产品：GC-2spd(ts)细胞、LM3细胞、EA.Hy926细胞
RH30SJ细胞系相关产品：End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞
EVSA/T细胞系相关产品：OCI/AML-5细胞、NCI-H196细胞、A9细胞
IM-9细胞系相关产品：SW948细胞、CPA47细胞、NCL-H548细胞
COLO-684细胞系相关产品：DMS 273细胞、NCI-SNU-668细胞、Hs852细胞
FHs74Int细胞系相关产品：D341细胞、KP-N-RT-BM细胞、CAL85-1细胞
H4细胞系相关产品：M1细胞、RPMI-2650细胞、SNU761细胞
CEM T4细胞系相关产品：DHL5细胞、Douglas Foster-1细胞、NPA 87细胞
MC-CAR细胞系相关产品：NSH细胞、SKLU1细胞、BE2M17细胞
Hs_578t细胞系相关产品：NOZC-1细胞、MILE SVEN 1细胞、NCIH1876细胞
SK-Mel 1细胞系相关产品：Hs 683细胞、KYSE 140细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞
B4G12细胞系相关产品：MUM2B细胞、PCI:SG231细胞、Hs-578Bst细胞
R1800[RA]细胞系相关产品：EFM-192A细胞、NCI H716细胞、NCI-SNU-398细胞
NCIH345细胞系相关产品：COLO 738细胞、MT4细胞、Jurkat clone A3细胞
PIG1 Adherent正常人皮肤黑色素细胞系
138 MG细胞系相关产品：HCC-9724细胞、A-204细胞、C2BBe1细胞
NCI-128细胞系相关产品：SL1细胞、SW 48细胞、NCIH1651细胞
KG-1细胞系相关产品：SPC-A1细胞、Hs 895.T细胞、AMJ2-C8细胞
KALS1细胞系相关产品：NCIH209细胞、2BS细胞、Cloudman S91 melanoma细胞
NCI-H889细胞系相关产品：P3 88 D1细胞、MCF.10A细胞、BCAP37细胞
A1847细胞系相关产品：NCI-H345细胞、NCI-H647细胞、P-2003细胞
HFTF细胞系相关产品：HeLa细胞、AX-Mel细胞、NCIH1048细胞
SG231细胞系相关产品：K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞
NCIH747细胞系相关产品：SK Mel 1细胞、RFL-6细胞、U266BL细胞
PT-K75细胞系相关产品：KBM5细胞、VP 267细胞、LS-513细胞
PATU-S细胞系相关产品：SHZ-88细胞、MDA-MB-231细胞、Panc_08_13细胞
LLCMK2细胞系相关产品：L615细胞、KATO 3细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞
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