"MARC-145 Adherent猴胚胎肾上皮细胞系
细胞背景资料:胚肾;自发永生
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
MARC-145 Adherent猴胚胎肾上皮细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞培养中支原体污染的经验分享:支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。
CORL51细胞系相关产品:H1299细胞、CF Pac1细胞、Hs746-T细胞
H87细胞系相关产品:LNCaP-ATCC细胞、HEK293F细胞、RC-2细胞
KE37细胞系相关产品:H2107细胞、J111细胞、M14细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
M4e细胞系相关产品:GBCSD细胞、JeKo 1细胞、H676B细胞
OP9细胞系相关产品:SNU354细胞、P3X63 Ag8细胞、HCC-1187细胞
H-1618细胞系相关产品:PCI:SG-231细胞、JROECL 33细胞、BC-019细胞
细胞生长特性:贴壁
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细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
Walker-256-TC细胞系相关产品:CWR22R细胞、EFM192细胞、MV(4;11)细胞
Ly7细胞系相关产品:CBRH-7919细胞、H-748细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞
A-72细胞系相关产品:MDA-157细胞、aTC1 Clone 6细胞、NU-GC-4细胞
MC26细胞系相关产品:Hs-274-T细胞、TW 01细胞、HC-11细胞
HT 144细胞系相关产品:CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞
ISHI细胞系相关产品:SF17细胞、MC-26细胞、NCI-SNU-387细胞
DMS-79细胞系相关产品:U031细胞、AM38细胞、UMUC1细胞
HCC-2935细胞系相关产品:746T细胞、MOLT4细胞、253JBV细胞
CHP100细胞系相关产品:NIH:OVCAR-5细胞、NCI-1155细胞、PLB985细胞
LNCaP-Clone-FGC细胞系相关产品:H1954细胞、3T6 Swiss Albino细胞、Tj-905细胞
NCIH1666细胞系相关产品:MDCK (NBL-2)细胞、SUDHL10细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞
Hs 578Bst细胞系相关产品:HCC1171细胞、Tu686细胞、J82细胞
8505C细胞系相关产品:BGC823细胞、NCI-H1930细胞、Danio rerio Gill细胞
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Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞系相关产品:SCC VII细胞、OCI/AML5细胞、MONO-MAC 6细胞
H2110细胞系相关产品:COV504细胞、HEK-AD 293细胞、CCD18Co细胞
118MG细胞系相关产品:SUP-B1细胞、Detroit 562细胞、LM1细胞
PANC0327细胞系相关产品:3T3 L1细胞、EU-2细胞、Granta-519细胞
SK LU 1细胞系相关产品:EMT6细胞、LA-N-6(OAN)细胞、NCIH1836细胞
32D CL3细胞系相关产品:NCI-H87细胞、Colo-201细胞、DAKIKI Clone 1细胞
CWR22-R1细胞系相关产品:Bat lung细胞、MCF-7B细胞、LS-411细胞
NCI-H2023细胞系相关产品:G-292细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HOS (TE85)细胞
HOP62细胞系相关产品:UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞
SW1271细胞系相关产品:BT325细胞、P3X63 AG8-653细胞、3T3L1细胞
SW403细胞系相关产品:V-79细胞、no-11细胞、6T-CEM细胞
FOXNY细胞系相关产品:B16/F1细胞、P815细胞、251 MG细胞
BS-C-1细胞系相关产品:U87-MG细胞、RCC-4细胞、H-1693细胞
C3H10T1-2细胞系相关产品:V79-1细胞、BT 325细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞
CL 1-5细胞系相关产品:PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞
HepaRG细胞系相关产品:Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞
HEK293-FT细胞系相关产品:SVEC 4-10细胞、LM2-4175细胞、PL12细胞
HPMEC细胞系相关产品:Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
H2452细胞系相关产品:BrCL12细胞、PTK2细胞、EB2细胞
BI-Mel细胞系相关产品:KHYG-1细胞、SkChA1细胞、SW.620细胞
MDA-MB-436细胞系相关产品:CCRF/CEM/0细胞、MRASMC细胞、SCC090细胞
PE/CA-PJ34细胞系相关产品:HIT-T15细胞、NS20-Y细胞、Hce8693细胞
MDA2B细胞系相关产品:WC00079细胞、LC1/Sq细胞、NCTC clone 1469细胞
COLO-320-DM细胞系相关产品:GEO细胞、KYSE-520细胞、SW1353细胞
H522细胞系相关产品:HUASMC细胞、JHH-2细胞、Daudi细胞
HFF-1细胞系相关产品:MHCC 97-L细胞、McARH7777细胞、HCC827细胞
CEM细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、HEK-293H细胞、H740细胞
Jurkat E6-1细胞系相关产品:CLL-CII细胞、Colon-26细胞、HB 611细胞
ZYM-SVEC01细胞系相关产品:EB-1细胞、HOS-143B细胞、KTCTL-140细胞
WM266细胞系相关产品:KE-39细胞、NTERA2-cloneD1细胞、293EBNA细胞
Porcine Kidney-15细胞系相关产品:PLA801C细胞、LS-1034细胞、8305C_1细胞
P3X63Ag8653细胞系相关产品:A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞
DHBE细胞系相关产品:SW900细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞、Hep 3B2_1-7细胞
MDA-MB-231-luc细胞系相关产品:211H细胞、Co320细胞、HFF1细胞
AML-EOL-1细胞系相关产品:HSAS1细胞、FAK+/+细胞、NCI-H2009细胞
Vero-E6细胞系相关产品:LS-513细胞、KMH-2细胞、PSN1细胞
T84细胞系相关产品:A-2780细胞、KU 812细胞、GTL16细胞
ARH-77细胞系相关产品:RFL-6细胞、NCI-N87细胞、HEK/EBNA细胞
UCLA NPA871细胞系相关产品:MADB106细胞、A2780 CP70细胞、MDAMB361细胞
Hs688(A)T细胞系相关产品:WM266-4细胞、mousepodocyte细胞、HTR8/SVneo细胞
ES2细胞系相关产品:OCI AML5细胞、ChaGo-K1细胞、32D/cl3细胞
HCC1599细胞系相关产品:ARO 81-1细胞、ChaGo-K-1细胞、HCC95细胞
MARC-145 Adherent猴胚胎肾上皮细胞系
SN12C细胞系相关产品:H727细胞、D283-MED细胞、TJ905细胞
BeWo细胞系相关产品:SU-DHL-5细胞、TE-3A细胞、UM-UC-3细胞
Lewis-Lung细胞系相关产品:NCIH187细胞、CCRF细胞、HCC-1954细胞
U118细胞系相关产品:HNE-2细胞、GM17346细胞、MRAEC细胞
HOS/MNNG细胞系相关产品:H-2347细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞、JROECL19细胞
COLO 394细胞系相关产品:HRPEpiC细胞、NPC-TW-039细胞、MHCC 97-L细胞
NCI-H146细胞系相关产品:B16-F10细胞、HCC1143细胞、DLD-1细胞
SK-MEL-2-LUC细胞系相关产品:VE细胞、CORL105细胞、B16-F10细胞
TEC细胞系相关产品:BNL.CL2细胞、SK Mel 2细胞、LM3细胞
87MG细胞系相关产品:BJA-B-1细胞、KMH2细胞、OV-2008细胞
H-211细胞系相关产品:SUM 190细胞、HN 4细胞、L6细胞
A-72细胞系相关产品:MDA-157细胞、NCI-H220细胞、BT 549细胞
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