"MEC-1 Adherent人粘液表皮样癌细胞系
细胞背景资料:粘液表皮样癌
细胞形态:上皮细胞样
细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻,细胞内外的水分会很快形成冰晶,从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高,pH值改变,部分蛋白质由于上述原因而变性,引起细胞内部空间结构紊乱,溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶,使细胞内结构成分造成破坏,线粒体肿胀,功能丢失,并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变,使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多,随冷冻温度的降低,冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤,而致细胞死亡。因此,细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分,减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质分子量小,溶解度大,易穿透细胞,可以使冰点下降,提高细胞膜对水的通透性,且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外,减少胞内形成冰结晶的机会,从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
MEC-1 Adherent人粘液表皮样癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
FU-97细胞系相关产品:NCl-H157细胞、MAD109细胞、Hs819T细胞
TE-85细胞系相关产品:Calf Pulmonary Artery 47细胞、MDCK Type II细胞、COLO-320细胞
MHCC-LM3细胞系相关产品:C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LICR-LON-HN6细胞系相关产品:NW-38细胞、HOP-62细胞、H2023细胞
GT38细胞系相关产品:TOG细胞、CoCL3细胞、Mv 1 Lu细胞
NCI-SNU-1040细胞系相关产品:DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞
细胞生长特性:贴壁
MEC-1 Adherent人粘液表皮样癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浑细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟,转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离;rpm为离心机每分钟的转数;RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
SK.OV.3细胞系相关产品:HME1细胞、NUGC2细胞、Emory University-2细胞
Mink Lung细胞系相关产品:NCI-H1915细胞、HCC-44细胞、LNCaP clone FGC细胞
H-2452细胞系相关产品:S-16细胞、hOMF细胞、BCaP 37细胞
RenCa细胞系相关产品:NIE 115细胞、SVOG细胞、MT-2细胞
MARC145细胞系相关产品:FRH-0201细胞、IPLB-SF-21-AE细胞、HCC2157细胞
Hep-3B细胞系相关产品:Hs445细胞、T24细胞、HOS/MNNG细胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞系相关产品:CHP-212细胞、Caco2BBe细胞、MDA330细胞
Pfeiffer细胞系相关产品:L-Wnt-3A细胞、OCILY7细胞、MFHL-2细胞
769P细胞系相关产品:AHH1细胞、AU-565细胞、H-1770细胞
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MEC-1 Adherent人粘液表皮样癌细胞系
J 111细胞系相关产品:NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞
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LS 174T细胞系相关产品:HS 445T细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞、L 540细胞
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Hs729细胞系相关产品:Panc 08.13细胞、HONE1细胞、MC3T3-E细胞
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BT549细胞系相关产品:HEC1-A细胞、U343MG细胞、DMS79细胞
CCC-HHM-2细胞系相关产品:CL40细胞、NCIH2171细胞、CCD19-Lu细胞
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MEC-1 Adherent人粘液表皮样癌细胞系
H-196细胞系相关产品:HCC941122细胞、NCIH510细胞、X63Ag8-653细胞
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Vero C1008细胞系相关产品:COLO 206F细胞、SU 86.86细胞、TW01细胞
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PANC 813细胞系相关产品:HCT GEO细胞、MESSADX5细胞、PM6细胞
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H2452细胞系相关产品:BrCL12细胞、A549ATCC细胞、McA-RH8994细胞
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