"hCMEC/D3 Adherent永生化人脑微血管内皮细胞系
细胞背景资料：脑微血管；内皮细胞
细胞形态：上皮细胞样
正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！还有一个最重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做好防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
hCMEC/D3 Adherent永生化人脑微血管内皮细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
KMS-11细胞系相关产品：NOR10细胞、NCIH2106细胞、BT细胞
Calu 3细胞系相关产品：MV-1-Lu细胞、SW780细胞、RT4-D6-P2T细胞
Hs 839.T细胞系相关产品：NCI-H661细胞、HEK 293细胞、HEK293-A细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PAN 02细胞系相关产品：MFM-223细胞、MTEC1细胞、RAW-264.7细胞
WEHI-164细胞系相关产品：HSC 3细胞、3T3(A31)细胞、PC-3M-1E8细胞
RT4-D6P2T细胞系相关产品：Jiyoye(P-2003)细胞、IAR 20细胞、QSG-7701细胞
细胞生长特性：贴壁
hCMEC/D3 Adherent永生化人脑微血管内皮细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或高过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
293FT细胞系相关产品：Panc327细胞、BC3 H1细胞、C4-2 B细胞
GCT0404细胞系相关产品：HS766T细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞、SL1细胞
Karpas-422细胞系相关产品：Colon 38细胞、T.T细胞、Caco-2/ATCC细胞
H-82细胞系相关产品：NCIH295R细胞、HEL 299细胞、PG-BE1细胞
CAL-39细胞系相关产品：B16 subline B78细胞、EA.hy 926细胞、MC-3T3-E1细胞
BTI-Tn5B14细胞系相关产品：Hs 281.T细胞、CNE2细胞、LNCaP-ATCC细胞
SK-MEL2细胞系相关产品：COLO824细胞、NCIH2286细胞、NBL-2细胞
H-1734细胞系相关产品：JM-1细胞、3T3NIH细胞、HBL-100细胞
RPMI-8402细胞系相关产品：SuperTube细胞、ABE8.1/2细胞、HDMEC细胞
SUDHL4细胞系相关产品：3T3-Swiss albino细胞、MPC-11细胞、GM0637细胞
RS4-11细胞系相关产品：H1688细胞、H-292细胞、C-643细胞
NS-I/1细胞系相关产品：3T3J2细胞、WRL-68细胞、SNUC2B细胞
MES-SA-Dx5细胞系相关产品：CAL-39细胞、3T3细胞、38C13细胞
hCMEC/D3 Adherent永生化人脑微血管内皮细胞系
CT26-clone 25细胞系相关产品：MRCV细胞、Hce8693细胞、SF 539细胞
NE1细胞系相关产品：LS 180细胞、OV-2008细胞、MEC-1细胞
Lu-165细胞系相关产品：HEY A8细胞、HuO9细胞、HCC 70细胞
Lu-165细胞系相关产品：HEY A8细胞、HuO9细胞、HCC 70细胞
HEK/EBNA细胞系相关产品：K 562细胞、HT3细胞、NCI-H1693细胞
TU 686细胞系相关产品：NF639细胞、KOPN8细胞、N-Tera-2细胞
Lewis Lung细胞系相关产品：WEHI231细胞、UMNSAH/DF#1细胞、LIXC-002细胞
SU-DHL-8细胞系相关产品：CII细胞、HMrSV5细胞、MCA38细胞
YD-15细胞系相关产品：Ketr3细胞、NSC34细胞、Panc-10.05细胞
RASMC细胞系相关产品：OCI-Ly8细胞、TPC-1细胞、WSU-DLCL-2细胞
HSMC细胞系相关产品：NCI-HUT-596细胞、Kasumi-1细胞、NCI-SNU-C2A细胞
KBM-7/Hap8细胞系相关产品：HEP3B2细胞、GCT0404细胞、4T1-A细胞
PK-136细胞系相关产品：NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞
PZ-HPV-7细胞系相关产品：NCI-SNU-216细胞、174xCEM.T2细胞、HEK-293FT细胞
OVMANA细胞系相关产品：SK-MEL-5细胞、LIXC-002细胞、PA317细胞
SKNBE(2)细胞系相关产品：786-0WT细胞、HEL细胞、MDCK-2细胞
Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品：Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞
TE3A细胞系相关产品：U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞
GES-1细胞系相关产品：HCET细胞、PC-14细胞、GI-1细胞
PLA 802细胞系相关产品：MCF-7ADR细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、MGH-UI细胞
MC3T3-E1 Subclone 4细胞系相关产品：RCF细胞、H184A1细胞、CAL 148细胞
Panc813细胞系相关产品：Vero-E6细胞、HPB-ALL细胞、SuDHL 2细胞
WEHI 3细胞系相关产品：NCI-H292细胞、Hs27F细胞、Clone 15 HL-60细胞
U266 B1细胞系相关产品：NCIH727细胞、NHA细胞、H920细胞
TK-10细胞系相关产品：Panc 03.27细胞、FLC-7细胞、Hep2细胞
H-774细胞系相关产品：GM00637细胞、SKNBE细胞、GB-1细胞
SVGp12细胞系相关产品：H-2066细胞、SW-1573细胞、TE354T细胞
WM 266-4细胞系相关产品：CMT 167细胞、SNU484细胞、CTLL-2细胞
NCI-H661细胞系相关产品：MDA-MB-231细胞、NCI H295R细胞、RetroPack PT67细胞
EOC20细胞系相关产品：COV-434细胞、AgC11x3A细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞
TO 175.T细胞系相关产品：RAW264.7细胞、HCC70细胞、SCL2细胞
C12细胞系相关产品：DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞
HEK-AD 293细胞系相关产品：H184A1细胞、M059K细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞
B16-BL6细胞系相关产品：C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞
beta-TC6细胞系相关产品：BCPAP细胞、TE3细胞、Normal Rat Kidney-52E细胞
H2291细胞系相关产品：RGC-6细胞、H841细胞、HCV-29细胞
MES-SA-Dx5细胞系相关产品：CAL-39细胞、3T3细胞、38C13细胞
CHP-212细胞系相关产品：RGM-1细胞、NCl-H157细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞
266 Bl细胞系相关产品：GM03671C细胞、KM-H2细胞、SACC-83细胞
LED-WiDr细胞系相关产品：SVOG细胞、H1404细胞、ARO-81细胞
Anip-973细胞系相关产品：D 407细胞、HR-8348细胞、RKOE6细胞
JHH-2细胞系相关产品：MRC-9细胞、LP1细胞、IM95细胞
hCMEC/D3 Adherent永生化人脑微血管内皮细胞系
MSTO-211 H细胞系相关产品：H-1666细胞、L5178Y-R细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞
KBM-5细胞系相关产品：BPH-1细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、Oregon J-111细胞
NCI-H2085细胞系相关产品：L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞
SuDHL 2细胞系相关产品：DH 82细胞、Ly7细胞、H378细胞
EHEB细胞系相关产品：KYSE-270细胞、SK-N-DZ细胞、Rh30细胞
COLO-1细胞系相关产品：Hs 766T细胞、OACP4 C细胞、Hs-675-T细胞
MUVEC细胞系相关产品：SCC-25细胞、MOLT-3细胞、SNB19细胞
EBC-1细胞系相关产品：HCMEC细胞、Institute for Medical Research-32细胞、NCI-H650细胞
MKN28细胞系相关产品：TOV112细胞、D324细胞、SKLU1细胞
THP-1细胞系相关产品：OVCAR420细胞、HT 29细胞、RBMEC细胞
SKNSH细胞系相关产品：OVCAR 432细胞、MG63细胞、COLO 684细胞
Karpas422细胞系相关产品：CAL 12细胞、IPLB-Sf21AE细胞、HCC0366细胞
"
