"MNNG/HOS Cl #5 Adherent人骨肉瘤细胞系
细胞背景资料:骨肉瘤;女性
细胞形态:上皮细胞样
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
MNNG/HOS Cl #5 Adherent人骨肉瘤细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞培养中支原体污染的经验分享:支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。
GTL-16细胞系相关产品:H35 Reuber细胞、SNG-M细胞、Colo205细胞
SK-HEP-1细胞系相关产品:SKM-1细胞、MC3T3-E1细胞、rRMECs细胞
PL-12细胞系相关产品:MOLT-3细胞、NCIH747细胞、NIE-115细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CAL-27细胞系相关产品:CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞
S3-HeLa细胞系相关产品:Hi-five细胞、RPTEC/TERT 1细胞、HNTEC细胞
SW-13细胞系相关产品:B35细胞、RH35细胞、MCF-7B细胞
细胞生长特性:贴壁
MNNG/HOS Cl #5 Adherent人骨肉瘤细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
H2073细胞系相关产品:253J B-V细胞、CSQT-2细胞、McA-RH8994细胞
GM 2132细胞系相关产品:GM04154B细胞、GI-1细胞、EFM-192A细胞
NFS60细胞系相关产品:HUT-125细胞、PLC PRF 5细胞、P1-Raji细胞
GM00215A细胞系相关产品:HOSEpiC细胞、H2122细胞、GM02219D细胞
SCC 25细胞系相关产品:NCI-H1650细胞、hESC细胞、PAN 02细胞
NCI-H1755细胞系相关产品:BEAS2B细胞、Leukemia 1210细胞、LCLC103H细胞
MS 751细胞系相关产品:OVCA5细胞、BALB 3T3 clone A31细胞、NCI-H520细胞
ECGI10细胞系相关产品:CG4细胞、BDCM细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞
VM-CUB1细胞系相关产品:HSC4细胞、MSCs(mUCMSCs)细胞、SW-948细胞
LU165细胞系相关产品:WIL2-S细胞、hMSC-BM细胞、HCT 116细胞
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品:H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞
MCF 7细胞系相关产品:293-GP细胞、MyLa2059细胞、NCI-H2444细胞
WM 239细胞系相关产品:PAEC细胞、DLD-1细胞、HCT8细胞
MNNG/HOS Cl #5 Adherent人骨肉瘤细胞系
NOR 10细胞系相关产品:Capan1细胞、CTX TNA2细胞、Hut292细胞
MUGCHOR1细胞系相关产品:no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞
GRSL细胞系相关产品:Granta519细胞、DBTRG-05MG细胞、NCI-H1836细胞
GRSL细胞系相关产品:Granta519细胞、DBTRG-05MG细胞、NCI-H1836细胞
OCM-1A细胞系相关产品:A.704细胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、OCILY3细胞
DH 82细胞系相关产品:A549/DDP细胞、MEG01细胞、IMR 32细胞
THP-1(ATCC)细胞系相关产品:J.E6-1细胞、BLO-11细胞、Vero 76细胞
NCI-H-295细胞系相关产品:KM932细胞、LN-229细胞、NCCIT细胞
3T3-Swiss albino细胞系相关产品:RPTEC/TERT1细胞、SVG(P12)细胞、ANA-1细胞
KYSE-180细胞系相关产品:SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞
T2细胞系相关产品:HCC-38细胞、Mel-624细胞、Hs-695-T细胞
PIEC细胞系相关产品:SK-SH-SY5Y细胞、GC-1 spg细胞、WiDr-TC细胞
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UPCI:SCC154细胞系相关产品:PTK1细胞、Lu99A细胞、HSC3细胞
Detroit562细胞系相关产品:NALM-6细胞、OE-33细胞、UCD-MLA-144细胞
PL-5细胞系相关产品:CCRF-CEM细胞、UACC-893细胞、NTera2 cl.D1细胞
COLO-394细胞系相关产品:H810细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞、NBL-12细胞
MG-HU-3细胞系相关产品:TE-32细胞、CCD-1112sk细胞、LTEPa2细胞
OE-19细胞系相关产品:Nthy-ori 3.1细胞、CTLA4Ig-24细胞、JM-1细胞
HOS TE 85细胞系相关产品:293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞
D324细胞系相关产品:IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞
SK HEP 01细胞系相关产品:HcaF细胞、Wien-133细胞、CAMA-1细胞
ZR7530细胞系相关产品:Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞
COLO-738细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、M3 Clone M-3细胞、GM05862细胞
NCI-H2198细胞系相关产品:Ca761细胞、OVCAR5细胞、DSL6A/C1细胞
SU-DHL-1细胞系相关产品:DU-145细胞、H28细胞、A375-MEL细胞
COLO 16细胞系相关产品:EFM192C细胞、MSTO-211H细胞、MES23.5细胞
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Leukemic 1210细胞系相关产品:NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞
T-HEECs细胞系相关产品:QBI-HEK 293A细胞、MV4;11细胞、MDA134细胞
H-1770细胞系相关产品:RSC 96细胞、Fetal Human Lens-124细胞、PLC/PRF/5细胞
Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品:Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞
NCI-H2085细胞系相关产品:L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞
NHDF细胞系相关产品:CAL 33细胞、UCLA-SO-M21细胞、D341 Med细胞
MDCK Type II细胞系相关产品:LMH细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞、HEC-1A细胞
GM03573A细胞系相关产品:Panc 5.04细胞、NOMO1细胞、LLC-PK1细胞
HPB-ALL细胞系相关产品:Eca 109细胞、H3396细胞、PCI-4.2细胞
NCTC-1469细胞系相关产品:COLO-357细胞、Jeko1细胞、FRhK4细胞
KYSE510细胞系相关产品:Eph4 1424细胞、AE1201细胞、Ramos 2G6.4C10细胞
SUDHL-6细胞系相关产品:MCF-10 Attached细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、RGC-5细胞
UCLA SO M21细胞系相关产品:MAVER-1细胞、Mono Mac 6细胞、SF-295细胞
Cloudman S91 melanoma细胞系相关产品:COLO 206细胞、CAL39细胞、NCI-522细胞
MNNG/HOS Cl #5 Adherent人骨肉瘤细胞系
COLO 684细胞系相关产品:NCI-SNU-620细胞、AtT-20细胞、SKMEL2细胞
SK Hep1细胞系相关产品:D-324MED细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞、CCD841CoTr细胞
P3X63Ag8653细胞系相关产品:A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞
H22-H8D8细胞系相关产品:CHL1细胞、NCI-H69C细胞、HS-294-T细胞
CCD-1095Sk细胞系相关产品:SCC 9细胞、hFOB 1.19细胞、HCO细胞
SGC 7901细胞系相关产品:U-2932细胞、UK Pan-1细胞、P30/0HK细胞
Jurkat E6.1细胞系相关产品:H-1869细胞、H2291细胞、NCI522细胞
Suzhou Human Glioma-44细胞系相关产品:52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞
TE-8细胞系相关产品:Wien-133细胞、Daudi细胞、Wien 133细胞
KYSE-140细胞系相关产品:MDA-MB-453细胞、Kato-III细胞、HEK 293细胞
WM-2664细胞系相关产品:Mahlavu细胞、PAI细胞、GM00215A细胞
NFS60细胞系相关产品:HUT-125细胞、NGEC细胞、RPMI 1846细胞
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