"LLC-MK2 Adherent恒河猴肾细胞系
细胞背景资料：胚胎；肾；自发永生
细胞形态：上皮细胞样
细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提高细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
LLC-MK2 Adherent恒河猴肾细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-０.２%LH培养液或MEM培养液或１９９等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（１万单位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、胶塞、吸管(１０ml、１m１）、细胞吹打管（２０ml）(以上用具需经１２１℃至少１５分钟高压灭菌)、C０２ 孵箱、超净台、倒置显微镜、４℃、-２０℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培养液１００ml内，加入灭活小牛血清１０m１，庆大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸钠溶液３ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面１-２次，每次１０m１，弃去洗液，向细胞瓶内加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入１０m１细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于３７±１℃孵箱培养。约２～４天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
Michigan Cancer Foundation-7细胞系相关产品：WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞
SUM-52PE细胞系相关产品：GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞
UCLA-RO 81细胞系相关产品：M-14细胞、HTori:3细胞、MDA.MB.231细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
OSA细胞系相关产品：SHIN3细胞、SUDHL-4细胞、OCI-Ly07细胞
LSC-1细胞系相关产品：NCIH1703细胞、NIH 3T3细胞、CF-1 MEF细胞
NCI-HUT-596细胞系相关产品：675T细胞、A 253细胞、CWR22Rv1细胞
细胞生长特性：贴壁
LLC-MK2 Adherent恒河猴肾细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。
Oka-C1细胞系相关产品：H-719细胞、NCI-H322细胞、HHFK细胞
R-1059-D细胞系相关产品：DanG细胞、C41细胞、RBL-1细胞
ROS17/2.8细胞系相关产品：WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞
B16/F1细胞系相关产品：H345细胞、HEK293E细胞、NCIH1648细胞
SW-626细胞系相关产品：Malme-3 M细胞、TALL 1细胞、SK-N-BE(2)细胞
NCIADR.RES细胞系相关产品：SUNE 1细胞、SU-DHL-5细胞、3LL细胞
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LLC-MK2 Adherent恒河猴肾细胞系
HEK293T/17细胞系相关产品：SKNSH细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞、SUM149PT细胞
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Vero 76 clone E6细胞系相关产品：EFO 27细胞、HMCB细胞、PaTu-8988s细胞
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RPMI7951细胞系相关产品：SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞
LLC-MK2 Adherent恒河猴肾细胞系
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University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞系相关产品：HCC366细胞、CAL 39细胞、HEM细胞
U266 Bl细胞系相关产品：H1651细胞、Hmy.2 CIR细胞、JS1细胞
ROS17/2.8细胞系相关产品：WERI细胞、GM03190细胞、COLO-205细胞
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