"FRhK-4 Adherent恒河猴胚肾细胞系
细胞背景资料:胚胎;肾;自发永生;雌性
细胞形态:上皮细胞样
细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻,细胞内外的水分会很快形成冰晶,从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高,pH值改变,部分蛋白质由于上述原因而变性,引起细胞内部空间结构紊乱,溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶,使细胞内结构成分造成破坏,线粒体肿胀,功能丢失,并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变,使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多,随冷冻温度的降低,冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤,而致细胞死亡。因此,细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分,减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质分子量小,溶解度大,易穿透细胞,可以使冰点下降,提高细胞膜对水的通透性,且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外,减少胞内形成冰结晶的机会,从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
FRhK-4 Adherent恒河猴胚肾细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
CT26-clone 25细胞系相关产品:MRCV细胞、Hce8693细胞、SF 539细胞
MDCK (NBL-2)细胞系相关产品:KMS-26细胞、As-PC1细胞、NCI-H69C细胞
RAMSCs细胞系相关产品:H920细胞、DHL-6细胞、A3细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
N1E-115细胞系相关产品:87MG细胞、MDA-MB-175-VII细胞、AML193细胞
N1E-115细胞系相关产品:87MG细胞、MDA-MB-175-VII细胞、AML193细胞
NIH-OVCAR-3细胞系相关产品:251 MG细胞、Mono-Mac-6细胞、High-5细胞
细胞生长特性:贴壁
FRhK-4 Adherent恒河猴胚肾细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浑细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟,转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离;rpm为离心机每分钟的转数;RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
MMVECs细胞系相关产品:MFE 280细胞、MOLT16细胞、JIMT1细胞
Porcine Kidney-13细胞系相关产品:H-1048细胞、P3HRI细胞、HPAF II细胞
CF Pac1细胞系相关产品:bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞
hOMF细胞系相关产品:Nthy ori 3.1细胞、JM-1细胞、OV 2008细胞
Human Epithelioma-2细胞系相关产品:HCC-1171细胞、SNK6细胞、TEV-1细胞
HuO9细胞系相关产品:SW1990细胞、MDA-436细胞、BT.549细胞
SUP-B15细胞系相关产品:NK-92.05细胞、PC-3M 2B4细胞、Hs 742.T细胞
Jurkat 77细胞系相关产品:QBI-293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Kupffer细胞
L-363细胞系相关产品:H2342细胞、MCF-7细胞、SK ES 01细胞
OUMS27细胞系相关产品:Tu-177细胞、SK-GT-2细胞、Panc_02_03细胞
CMT-167细胞系相关产品:SCLC21H细胞、Hs-578-T细胞、SU8686细胞
Ha Fe细胞系相关产品:HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞
OCI/AML-3细胞系相关产品:MDST8细胞、293FT细胞、He La细胞
FRhK-4 Adherent恒河猴胚肾细胞系
WM239A细胞系相关产品:PC-3M-IE8细胞、OVCAR420细胞、TCMK1细胞
RMG-I细胞系相关产品:HMCB细胞、C3H-10T1/2细胞、293T/17细胞
NIH:OVCAR-4细胞系相关产品:HTori:3细胞、HLE-B3细胞、ECC-1细胞
NIH:OVCAR-4细胞系相关产品:HTori:3细胞、HLE-B3细胞、ECC-1细胞
TK-10细胞系相关产品:Panc 03.27细胞、FLC-7细胞、Hep2细胞
HB 611细胞系相关产品:RPMI #1846细胞、CAL12T细胞、H2405细胞
CLL-CII细胞系相关产品:SW13细胞、H-441细胞、D341Med细胞
Mahlavu细胞系相关产品:Sp2/0-Ag14细胞、MB468细胞、HO-1-N-1细胞
HCPEpiC细胞系相关产品:PT-67细胞、NCIH2172细胞、C2-C12细胞
MSTO-211 H细胞系相关产品:H-1666细胞、L5178Y-R细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞
PL11细胞系相关产品:BHK细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞、PF-382细胞
BHP10-3细胞系相关产品:A375-SM细胞、MES23.5细胞、SKGT2细胞
H.Ep. #2细胞系相关产品:H1792细胞、Hs 739.T细胞、COV-362细胞
HNE-3细胞系相关产品:SK ES 01细胞、SK 1细胞、HOS-MNNG细胞
Ra #1细胞系相关产品:PC-10细胞、MDAMB157细胞、H-1781细胞
T98-G细胞系相关产品:H-28细胞、D341 Med细胞、OV1/P细胞
UMUC14细胞系相关产品:Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞
Sp2/0-Ag14细胞系相关产品:SUDHL5细胞、OCI-Ly 8细胞、CEMO-1细胞
CMT-64细胞系相关产品:GP2d细胞、tdott细胞、UMNSAH-DF1细胞
MDCK supertube细胞系相关产品:MF2059细胞、NCIH1693细胞、NBL-4细胞
SU-DHL-1细胞系相关产品:DU-145细胞、H28细胞、A375-MEL细胞
CCD-1112sk细胞系相关产品:Renal Carcinoma细胞、Vertebral Cancer of the Prostate细胞、H727细胞
A2058细胞系相关产品:SW-480细胞、AMC-HN8细胞、A7r5细胞
Colon 38细胞系相关产品:SKMEL-31细胞、Ls-174-T细胞、SkMel31细胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞系相关产品:Mono Mac 6细胞、HOS-MNNG细胞、LN-229细胞
HEK293EBNA细胞系相关产品:OACP4 C细胞、NCIH2110细胞、3AA细胞
KALS-1细胞系相关产品:RA 1细胞、SUDHL1细胞、OVCA433细胞
IM 9细胞系相关产品:3T3 J2细胞、16HBEo-细胞、PANC 203细胞
BT-325细胞系相关产品:SNU601细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞、NCI-H87细胞
Hs695细胞系相关产品:NB4细胞、C-33-A细胞、M109细胞
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞系相关产品:HS940细胞、S.B.细胞、Ca761细胞
RPE D407细胞系相关产品:WM115F细胞、MGHU3细胞、SW-480细胞
IPEC-J2细胞系相关产品:NT2细胞、Det. 562细胞、ACC-M细胞
H-2286细胞系相关产品:WERI Rb-1细胞、LSC-1细胞、Hs-578-T细胞
H209细胞系相关产品:HN6细胞、SKHEP1细胞、SPCA1细胞
P3/NS1/1-Ag4.1细胞系相关产品:H2444细胞、IR 983F细胞、LC1细胞
HONE1细胞系相关产品:T2 (174 x CEM.T2)细胞、TR-146细胞、Rin-M-5F细胞
HONE1细胞系相关产品:T2 (174 x CEM.T2)细胞、TR-146细胞、Rin-M-5F细胞
F9细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞
RWPE1细胞系相关产品:Walker-256细胞、mIMCD3细胞、P3-X63-Ag8.653细胞
MADB-106细胞系相关产品:MNNG/HOS Clone F-5细胞、MUTZ-1细胞、Caov-3细胞
Human Epithelioma-2细胞系相关产品:HCC-1171细胞、SNK6细胞、TEV-1细胞
FRhK-4 Adherent恒河猴胚肾细胞系
EST81细胞系相关产品:HCC-1954细胞、WB-F344细胞、OVCAR.3细胞
GC-1spg细胞系相关产品:SK.MEL.2细胞、NCI-H1299细胞、YES 2细胞
NE1细胞系相关产品:LS 180细胞、OV-2008细胞、MEC-1细胞
UMNSAH/DF#1细胞系相关产品:SUM 149细胞、HELF细胞、IEC-18细胞
OCI Ly1细胞系相关产品:NCIH1437细胞、P3X63 Ag8.653细胞、SUDHL-2细胞
Madison lung细胞系相关产品:WEHI-279细胞、CFPAC-1细胞、K 562细胞
7860细胞系相关产品:HPAF II细胞、IMR90细胞、RS411细胞
VMCUB-1细胞系相关产品:Huh 7.5.1细胞、NB1RGB细胞、NOR10细胞
NCI-H929细胞系相关产品:S3-HeLa细胞、Glioma 261细胞、NCI-H865细胞
A375SM细胞系相关产品:PBMC细胞、Hep G2-Luc细胞、MN-9D细胞
GA-10 clone 4细胞系相关产品:P388.D1细胞、Hs-27细胞、HRIF细胞
CF Pac1细胞系相关产品:bEND.3细胞、TK10细胞、293A细胞
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