"RF/6A Adherent猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
细胞背景资料：脉络膜-视网膜；内皮细胞；自发永生
细胞形态：上皮细胞样
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
RF/6A Adherent猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
HCE-2 [50.B1]细胞系相关产品：G-401细胞、HRA-19细胞、NCIH378细胞
LTEP-a2细胞系相关产品：S37细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、WRL68细胞
MCF-7B细胞系相关产品：Jurkat E6.1细胞、TFK-1细胞、NCIH1703细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SUP-M2细胞系相关产品：SW1271细胞、D283MED细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞
HEY-A8细胞系相关产品：H1395细胞、SNU520细胞、CHO cell clone K1细胞
HCC0015细胞系相关产品：COV434细胞、IBMF-7细胞、IMCD-3细胞
细胞生长特性：贴壁
RF/6A Adherent猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
WM239A细胞系相关产品：PC-3M-IE8细胞、OVCAR420细胞、TCMK1细胞
Lewis Lung细胞系相关产品：WEHI231细胞、UMNSAH/DF#1细胞、LIXC-002细胞
NRCC细胞系相关产品：Fu97细胞、8505C细胞、COLO320HSR细胞
HMO6细胞系相关产品：NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
H596细胞系相关产品：GA-10(Clone 4)细胞、CCD 19Lu细胞、Dakiki细胞
OAW42细胞系相关产品：EAC细胞、M210B4细胞、MDA-MB-175-VII细胞
BSC-40细胞系相关产品：MC/9细胞、WiDrTC细胞、ANA1细胞
CACO2细胞系相关产品：PCI:SG231细胞、HFB细胞、GBCSD细胞
H22细胞系相关产品：KYSE 70细胞、Y3Ag1.2.3细胞、Glioma 261细胞
HeLa.S3细胞系相关产品：ND7/23细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞、BT474细胞
K1细胞系相关产品：McCoy B细胞、PLA-802细胞、PNEC30细胞
SW 962细胞系相关产品：OCI-Ly07细胞、MMAc.SF细胞、SNU-119细胞
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品：NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞
RF/6A Adherent猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
PANC 1005细胞系相关产品：BEP2D细胞、Psi-2-DAP细胞、JVM-3细胞
NP-69细胞系相关产品：H-4-II-E细胞、Huh7.5细胞、NCIH1105细胞
KCL22S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
KCL22S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
MCF 7细胞系相关产品：293-GP细胞、MyLa2059细胞、NCI-H2444细胞
HS-940-T细胞系相关产品：Hs940-T细胞、WILL-2细胞、HSF2细胞
Colo-206F细胞系相关产品：Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、V-79细胞、NCI-H1930细胞
3T3 J2细胞系相关产品：Henrietta Lacks cells细胞、RPMI 8402细胞、G-401细胞
GC-2spd(ts)细胞系相关产品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、TMD8细胞、SKNBE-1细胞
Hs 766细胞系相关产品：SUM52PE细胞、A172细胞、HF-91细胞
SW-982细胞系相关产品：LADMAC细胞、C4I细胞、YD-38细胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞系相关产品：QSG7701细胞、HOP62细胞、THPI细胞
Hepa-RG细胞系相关产品：SF 763细胞、DHL4细胞、NCIH1373细胞
WIL2 S细胞系相关产品：OSKM-1细胞、SW-1222细胞、HCC-2218细胞
MM1S细胞系相关产品：L-1210细胞、FAT细胞、B5537SKIN细胞
SK-MEL-24细胞系相关产品：HL 60细胞、EM-3细胞、NuTu 19细胞
MH-22a细胞系相关产品：High-5细胞、NCI-H2286细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞
AML-2细胞系相关产品：OCI-Ly7细胞、NCI-H1755细胞、C-28I2细胞
MGC-803细胞系相关产品：NMC-G1细胞、Leukemic 1210细胞、SKMEL-24细胞
L02细胞系相关产品：NCI-H1651细胞、NCI-H1435细胞、B958细胞
NCIH1623细胞系相关产品：MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞
A72细胞系相关产品：JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞
GM04154B细胞系相关产品：CG-4细胞、HCV-29细胞、SNU-354细胞
Pt K2 (NBL-5)细胞系相关产品：NP69SV40T细胞、Cor L88细胞、NCIH1650细胞
CCD 19Lu细胞系相关产品：TE 671细胞、HCC1569细胞、H2198细胞
A-427细胞系相关产品：D407细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞、SL-1细胞
Caki-1细胞系相关产品：NPA-87细胞、NCIH929细胞、GM-3573细胞
H-1975细胞系相关产品：SK-MEL-28细胞、U-343-MG细胞、PT67细胞
NUGC-2细胞系相关产品：LNCaP C4-2细胞、HBE 135-E6/E7细胞、H1703细胞
Rat Fetal Lung-6细胞系相关产品：JB6 [Mouse]细胞、HUV-EC-C细胞、SK-MEL-2细胞
NHEK细胞系相关产品：MDA 435细胞、526 mel细胞、OCI-Ly 18细胞
SNU620细胞系相关产品：NCI-H196细胞、NCI-H1838细胞、DU-145细胞
HLE-B3细胞系相关产品：2PK-3细胞、HTSMC细胞、RPE-hTERT细胞
TO 175.T细胞系相关产品：RAW264.7细胞、HCC70细胞、SCL2细胞
MSTO-211H细胞系相关产品：H-748细胞、Bx-PC3细胞、ECGI10细胞
LIXC-002细胞系相关产品：B4G12细胞、MRC9细胞、M059J细胞
TM-3细胞系相关产品：LS174细胞、3T3-A31细胞、746T细胞
VMM-5A细胞系相关产品：CC-LP-I细胞、AtT20细胞、PL-9细胞
Tn-5B1-4细胞系相关产品：OSC-19细胞、MNNG-HOS细胞、HL-60 Clone 15细胞
LTEPa2细胞系相关产品：SNU-484细胞、PTK-1细胞、MADB106细胞
H-748细胞系相关产品：Mel624细胞、MARC 145细胞、SK-RC 39细胞
HCC-827细胞系相关产品：MCF-7B细胞、NCI-H1341细胞、SW 527细胞
RF/6A Adherent猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
HSC4细胞系相关产品：H1105细胞、mIMCD-3细胞、NSH细胞
Sp 2817细胞系相关产品：RPMI1846细胞、OUMS27细胞、NCI-BL6细胞
Hs 819.T细胞系相关产品：MPVECs细胞、NU-GC-3细胞、M3 Clone M-3细胞
HR-8348细胞系相关产品：MV(4;11)细胞、NCI-H441细胞、PLC/PRF5细胞
Henrietta Lacks cells细胞系相关产品：IM 9细胞、OVHM细胞、MOLT16细胞
TGBC11TKB细胞系相关产品：NCIH2085细胞、NCTC-3960细胞、OVCAR-433细胞
Co 205细胞系相关产品：Hs1.Tes细胞、KNS81细胞、KYSE 270细胞
Tn5B1-4细胞系相关产品：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、B16/F10细胞、RCC10RGB细胞
UWB1-289细胞系相关产品：A2780/CP细胞、HHFK细胞、DBTRG-05MG细胞
ARO81-1细胞系相关产品：IBRS2细胞、COLO 738细胞、T-98细胞
High5细胞系相关产品：C2BBe 1细胞、CEF细胞、RetroPack PT67细胞
NRCC细胞系相关产品：Fu97细胞、PL11细胞、SNU-16细胞
"
