"A-9 Adherent小鼠皮下结缔组织细胞系
细胞背景资料：皮下结缔组织；自发永生；雄性；C３H/An
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
A-9 Adherent小鼠皮下结缔组织细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞的衰老:体外细胞培养实验证明：成纤维细胞：来自胎儿传代５０次后衰老死亡，来自成人传代２０次后衰老死亡(与具体年龄有关；来自小鼠传代１４--２８次后衰老死亡，来自乌龟传代９０--１２５次后衰老死亡。细胞衰老过程中会发生一系列的变化，包括：蛋白质合成速度降低，已有蛋白质结构变化，特异蛋白质成份出现;同时，细胞核，线粒体，膜系统、骨架系统等都有结构、功能的改变。细胞衰老原因，尚无定论，出现过好几种理论与假说，其中得到较广泛认可的是“自由基损伤假说”。细胞凋亡:细胞的死亡是个体存活的正常现象，常见的细胞死亡形式有３种：坏死、凋亡和细胞毒性。多细胞生物的生命活动中，因为环境因素的突然变化或病原物的入侵，导致一部分细胞死去，称为细胞的病理死亡，或细胞坏死。坏死是细胞暴露于严重的物理或化学刺激时导致的细胞死亡；细胞毒性是由细胞或者化学物质引起的单纯的细胞杀伤事件，不依赖于其它两种细胞死亡机理，如杀伤T细胞的细胞毒性作用。还有一种情况，一部分细胞的死亡是生物个体正常生命活动(代谢、生长、发育、分化)的一个必要部分；似乎带有“牺牲局部，保全整体”的意味。这种情况下的细胞死亡，明显地受遗传控制，称为细胞凋亡。凋亡(Apoptosis)则是程序性的、正常的细胞死亡，是机体清除无用的或者不想要的细胞的手段。它与细胞坏死是两个截然不同的过程，无论从形态学、生物学还是生化的特征来说，都有明显的区别。细胞凋亡现象普遍存在于生物界。细胞凋亡与细胞增殖、分化和衰老起着互补与平衡的作用，在多细胞动物的发育、形态建成与维持中扮演至关重要的角色。作为细胞的一种基本生命现象，凋亡失控的结果将是可怕的：凋亡不足时，易发生癌变、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡过量则可能产生获得性免疫缺陷综合征(HIV)、重症肝炎与退行性神经疾病，如老年性痴呆症(Alzheimer""s disease)、帕金森氏症(Parkinson""s disease)。因此研究细胞凋亡及其机理具有重要的理论和实践意义。
L23/P细胞系相关产品：ETCC007细胞、Mink细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞
Pro-5 Lec1.3c细胞系相关产品：HuH28细胞、VM Cub 1细胞、HS-294T细胞
NCIH1792细胞系相关产品：HOS TE85细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞、HCC1833细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MDA MB 361细胞系相关产品：H3255_DA细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、HFF-1细胞
SKNBE2细胞系相关产品：PGBE1细胞、C26细胞、DHL-2细胞
TM4细胞系相关产品：UC-3细胞、CWR22R-V1细胞、TE-11细胞
细胞生长特性：贴壁
A-9 Adherent小鼠皮下结缔组织细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
Hep 3B2细胞系相关产品：JKT-1细胞、CCD-841-CoN细胞、769-P细胞
MDA-MB-415细胞系相关产品：NCI.H23细胞、QSG7701细胞、H-1930细胞
Caco-2/BBe 1细胞系相关产品：SW620细胞、RA-FLSs细胞、SK HEP-1细胞
TGBC-11-TKB细胞系相关产品：RPMI7951细胞、J82 COT细胞、LC-1 sq细胞
LC-2/ad细胞系相关产品：TE-85 clone 5细胞、SDBMSC细胞、AG 9细胞
D10.G4.1细胞系相关产品：CHP-126细胞、QGY-7703细胞、MDA-MB157细胞
CORL26细胞系相关产品：WM-239A细胞、KMS11细胞、MDAPC2B细胞
675T细胞系相关产品：L-428细胞、VM-CUB-I细胞、FRTL 5细胞
NCIH1355细胞系相关产品：HMSC细胞、D341细胞、T. T细胞
MyLa 2059细胞系相关产品：B16 melanoma细胞、KYSE 520细胞、mRTEC细胞
GM01232E细胞系相关产品：P3.times.63 Ag8.653细胞、CATH.a细胞、RS 4;11细胞
CCRF-CEM细胞系相关产品：SNU-601细胞、ZR-75-1细胞、OCLY8细胞
WM-2664细胞系相关产品：Mahlavu细胞、SNUC2B细胞、MDCK supertube细胞
A-9 Adherent小鼠皮下结缔组织细胞系
Normal Rat Kidney细胞系相关产品：526 mel细胞、HVSMC细胞、Hepa-RG细胞
L-M(TK-)细胞系相关产品：GB-1细胞、BALB/3T3细胞、KMM1细胞
SUDHL5细胞系相关产品：T98-G细胞、NEC-8细胞、KP 4细胞
SUDHL5细胞系相关产品：T98-G细胞、NEC-8细胞、KP 4细胞
B104 [Rat neuroblastoma]细胞系相关产品：C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞
VCaP细胞系相关产品：Hs274T细胞、LNCaP-C4-2细胞、SKOV-3细胞
Walker/LLC-WRC 256细胞系相关产品：GM05384细胞、Panc8.13细胞、HCT 8细胞
RL细胞系相关产品：SCC90细胞、NCIH596细胞、C22细胞
alpha TC1 clone 6细胞系相关产品：Leukemic 1210细胞、COLO-320-HSR细胞、H19-7细胞
G519细胞系相关产品：NCI H747细胞、OVCAR-432细胞、GTL 16细胞
MT4细胞系相关产品：B6Tert-1细胞、XWLC-05细胞、MRC-5细胞
MCA205细胞系相关产品：JB-6细胞、COLO 320DM细胞、293c18细胞
HEC-1-B细胞系相关产品：QBC939细胞、BrCL15细胞、KP-4细胞
RPMI 1788细胞系相关产品：Ca Ski细胞、BIU-87/Adr细胞、GM637A细胞
MGH-U3细胞系相关产品：RC-K8细胞、AR4-2J细胞、PANC1005细胞
4T1-LUC细胞系相关产品：HEL-92.1.7细胞、BT-325细胞、H650细胞
NCI-H1436细胞系相关产品：LNCaP FGC细胞、V79细胞、H2087细胞
MC116细胞系相关产品：Hs839.T细胞、SCaBER细胞、IHHA-1细胞
2E8细胞系相关产品：HCT 8细胞、U-87细胞、SKUT1细胞
MM1-S细胞系相关产品：NR8383细胞、L-M (TK-)细胞、UMRC2细胞
SK HEP 01细胞系相关产品：HcaF细胞、Wien-133细胞、CAMA-1细胞
PC-9/S1细胞系相关产品：SU86-86细胞、H-498细胞、D407细胞
U-251MG细胞系相关产品：SW1116细胞、EC-GI-10细胞、P 3 HR 1细胞
NPA-87细胞系相关产品：RC92A细胞、H-4细胞、SUPT-1细胞
HCC1143细胞系相关产品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、NL-20细胞、MDCK-II细胞
SK-HEP-1细胞系相关产品：SKM-1细胞、MC3T3-E1细胞、rRMECs细胞
1E8-H细胞系相关产品：RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞
J111细胞系相关产品：NCIH650细胞、Hs819T细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞
Hs 819.T细胞系相关产品：MPVECs细胞、NU-GC-3细胞、M3 Clone M-3细胞
HTR-8细胞系相关产品：NCI-H2330细胞、MDA-157细胞、V 79细胞
T-ALL1细胞系相关产品：RS(4;11)细胞、HFE-145细胞、SKMel-5细胞
HIT T15细胞系相关产品：SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
EAHY-926细胞系相关产品：TCCPAN2细胞、RMS13细胞、RKOAS451细胞
Hs 746.T细胞系相关产品：SK_N_BE2C细胞、U87 MG细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞
CAL-39细胞系相关产品：B16 subline B78细胞、EA.hy 926细胞、MC-3T3-E1细胞
HCV-29细胞系相关产品：E.L.4细胞、NCI-H-295细胞、Hmy.2 CIR细胞
MC 116细胞系相关产品：GM06141细胞、KFB细胞、MH-S细胞
HEK 293T/17细胞系相关产品：SKML-28细胞、FHs 74 Int细胞、BHT-101细胞
HDLM2细胞系相关产品：HT-115细胞、HIC细胞、Duke University 4475细胞
P31-FUJ细胞系相关产品：801-D细胞、HCT 15细胞、SL-29细胞
SCLC21H细胞系相关产品：OCM-1A细胞、Balb/c3T3细胞、MDA-MB-231 #4175细胞
b.End3细胞系相关产品：Calu 6细胞、C1498细胞、8305-C细胞
A-9 Adherent小鼠皮下结缔组织细胞系
SupT1细胞系相关产品：HB611细胞、HCC1171细胞、H4-IIE-C3细胞
H774细胞系相关产品：IAR 20细胞、C28/I2细胞、Functional Liver Cell-7细胞
CCD-966SK细胞系相关产品：P3X63Ag8653细胞、H-1836细胞、PJ34细胞
HTh 74细胞系相关产品：MDA-MB-415细胞、GM00637细胞、IOSE-Mar细胞
L5178-R细胞系相关产品：Karpas-299细胞、GM3190细胞、P3X63-Ag8.653细胞
GM07404细胞系相关产品：639-V细胞、Pa017C细胞、OCI/AML-5细胞
293-F细胞系相关产品：PC3M-IE8细胞、JIII细胞、C8161细胞
V79-GalK1细胞系相关产品：GM05372E细胞、NCIH322细胞、NCIH2196细胞
NK 10a细胞系相关产品：NCIH1734细胞、alpha TC1.6细胞、MPP-89细胞
DMS-153细胞系相关产品：H2052_MM细胞、SK.MEL.2细胞、MFE280细胞
T84细胞系相关产品：A-2780细胞、COLO201细胞、HuLEC-5a细胞
Caco-2/BBe 1细胞系相关产品：SW620细胞、MUG-Chor1细胞、MS751细胞
"
