"NCTC 1469 Adherent小鼠正常肝细胞系
细胞背景资料:1952年建系,源于正常C3H/An小鼠的肝脏组织,表达H-2K抗原,鼠痘病毒阴性。
细胞形态:上皮细胞样
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCTC 1469 Adherent小鼠正常肝细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
MFE-296细胞系相关产品:PIG1细胞、H-747细胞、A375mel细胞
JOSK-M细胞系相关产品:SKNO-1细胞、Colo699细胞、HcaF细胞
OCI-LY-18细胞系相关产品:ROS17/2.8细胞、MCA38细胞、HCC-9724细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
FLS细胞系相关产品:Hs68细胞、PC10细胞、SNU484细胞
LK 2细胞系相关产品:MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞
COV 504细胞系相关产品:HGBEC细胞、NCI-H520细胞、L-132细胞
细胞生长特性:贴壁
NCTC 1469 Adherent小鼠正常肝细胞系
细胞形态特性:淋巴母细胞
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
SKNEP细胞系相关产品:U-138MG细胞、U14细胞、BIC1细胞
HBZY-1细胞系相关产品:OCI-AML-3细胞、HSC1细胞、P-388细胞
H-526细胞系相关产品:HMEC-1细胞、GM05384细胞、Mono-Mac-1细胞
HEY A8细胞系相关产品:ME-180细胞、H-2198细胞、CMK细胞
CCRF CEM细胞系相关产品:ARO81-1细胞、MKN 7细胞、2PK-3细胞
PC3细胞系相关产品:MDCK-2细胞、NCI-H1770细胞、NUGC3细胞
NCIH1651细胞系相关产品:KG-1细胞、HuT 78细胞、NCIH1792细胞
HT115细胞系相关产品:OCI-AML-5细胞、SNU5细胞、SKMEL3细胞
LM2-4175细胞系相关产品:Spodoptera frugiperda clone 9细胞、MHCC97细胞、T-98G细胞
Hopkins-92细胞系相关产品:SKBr3细胞、H1650细胞、Panc 4.03细胞
NeHepLxHT细胞系相关产品:SNU-C2A细胞、SLMT1细胞、SNU449细胞
PC14细胞系相关产品:LMTK-细胞、Sup T-1细胞、HOPC细胞
Baby Hamster Kidney 21细胞系相关产品:H2087细胞、DHBE细胞、H520细胞
NCTC 1469 Adherent小鼠正常肝细胞系
MN 60细胞系相关产品:NCI-H719细胞、639-V细胞、MZCRC1细胞
Fortner's melanotic melanoma #3细胞系相关产品:C4I细胞、AR4-IP细胞、NCI-H2347细胞
HEY-A8细胞系相关产品:H1395细胞、SNU520细胞、CHO cell clone K1细胞
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HCC15细胞系相关产品:FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞
MH-22a细胞系相关产品:High-5细胞、NCI-H2286细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞
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Lewis lung carcinoma line 1细胞系相关产品:MDA157细胞、IPEC-1细胞、SNU119细胞
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SK-N-BE细胞系相关产品:ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞
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Hep 3B2细胞系相关产品:JKT-1细胞、CCD-841-CoN细胞、769-P细胞
BEL-7402细胞系相关产品:5-8F细胞、P-36细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞
Human Hepatocyte Line 5细胞系相关产品:COLO206F细胞、NB.4细胞、Huh7.5细胞
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ZR75-1细胞系相关产品:MSB-1细胞、SF126细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞
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RMS13细胞系相关产品:WM115-mel细胞、P3 NS1 Ag4细胞、SP2细胞
HITT15细胞系相关产品:CNE-1细胞、Lu-65细胞、HR-1细胞
SKNBE(2c)细胞系相关产品:Melan-a细胞、HCA 7细胞、NCI-H522细胞
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Mv 1 Lu (NBL-7)细胞系相关产品:BCaP 37细胞、H-1944细胞、NCI-UMC-11细胞
CCD18Co细胞系相关产品:HLE B-3细胞、NCI-H1385细胞、HBL 100细胞
LS-411N细胞系相关产品:N-87细胞、H1648细胞、MESSA细胞
NCIH2023细胞系相关产品:CHP 100细胞、COLO 206细胞、Glioma-261细胞
2PK-3细胞系相关产品:OC-3-VGH细胞、MLA 144细胞、A 2780 CP细胞
WM451Lu细胞系相关产品:HS 1.Tes细胞、U-138 MG细胞、NK10a细胞
GM05372E细胞系相关产品:SNU423细胞、NBL-7细胞、L5178YR细胞
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SK-NMC细胞系相关产品:Swiss 3T6细胞、PAI细胞、MAEC细胞
NCTC 1469 Adherent小鼠正常肝细胞系
A2780/Taxol细胞系相关产品:RT112细胞、OVMANA细胞、HSC/mHSC细胞
KMS-18细胞系相关产品:MALME.3M细胞、TCam 2细胞、HH [Human lymphoma]细胞
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University of Arizona Cell Culture-812细胞系相关产品:WEHI 231细胞、HCC-1143细胞、NCIH460细胞
B 95.8细胞系相关产品:NS20Y细胞、KBM5细胞、HFE-145细胞
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H-1048细胞系相关产品:3T3-442A细胞、C 6细胞、OC316细胞
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NTERA-2cl.D1细胞系相关产品:DHBE细胞、PL 5细胞、RGC6细胞
H-524细胞系相关产品:SRA01/04细胞、G361-mel细胞、OCI AML5细胞
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