"KGN Adherent人卵巢颗粒细胞系
细胞背景资料:该细胞株是颗粒细胞瘤。细胞在加入人体绒膜促性腺激素后可能产生孕酮。细胞生长缓慢。
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
KGN Adherent人卵巢颗粒细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
TOV-112D细胞系相关产品:ECGI10细胞、HEK293-H细胞、Hs68细胞
KP-N-YN细胞系相关产品:SW-954细胞、Bovine ENDometrial cells细胞、COV504细胞
CHAGOK1细胞系相关产品:Caov-3细胞、NCIH1417细胞、H322T细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
BT-549细胞系相关产品:H719细胞、Karpas-422细胞、Dami细胞
RPMI2650细胞系相关产品:H747细胞、HEC-1-A细胞、HS688AT细胞
MKN1细胞系相关产品:MDCK2细胞、KLN-205细胞、Ly3细胞
细胞生长特性:贴壁
KGN Adherent人卵巢颗粒细胞系
细胞形态特性:上皮细胞样
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
HCT-8细胞系相关产品:NCI-H-295细胞、CNE1细胞、SK.MEL.28细胞
WERIRb1细胞系相关产品:Clone 15 HL-60细胞、HCC0070细胞、Ly18细胞
AR4IP细胞系相关产品:D341 Med细胞、IEC 6细胞、SUDHL-16细胞
B-CPAP细胞系相关产品:MuM-2C细胞、SW 527细胞、KYSE 30细胞
AM-38细胞系相关产品:NRK52E细胞、EBNA-293细胞、HN-6细胞
LA4细胞系相关产品:293/EBNA-1细胞、NS1细胞、T HEECs细胞
NCI N87细胞系相关产品:MGC-803细胞、MV4-11细胞、NCIH208细胞
EoL-1细胞系相关产品:MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞系相关产品:NCIH1299细胞、SUP-B15细胞、C6细胞
Hu-P-T4细胞系相关产品:COV362细胞、697细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品:HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
PF-382细胞系相关产品:HuT-102细胞、Hs888 Lu细胞、SNU-398细胞
Sp2/O细胞系相关产品:X63-AG 8.653细胞、OUMS-23细胞、SCC4细胞
KGN Adherent人卵巢颗粒细胞系
ROS-17/2.8细胞系相关产品:MDA2B细胞、COLO 824细胞、GM03570E细胞
Panc-1-P细胞系相关产品:NCI-H460细胞、GM03570E细胞、PLA801-95D细胞
KTC1细胞系相关产品:VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞
COR-L105细胞系相关产品:HSC1细胞、NCIH1435细胞、Tca-8113细胞
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NCIH647细胞系相关产品:Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞
SK RC 52细胞系相关产品:RCC-10细胞、NCI-BL2141细胞、H-322细胞
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CX-1细胞系相关产品:MIA-Pa-Ca-2细胞、BV-2细胞、GM03320细胞
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NCI-H740细胞系相关产品:LA-N-6细胞、AM细胞、Panc_08_13细胞
HCC-1395细胞系相关产品:SCaBER细胞、MOLP8细胞、HO1-N1细胞
ABC1细胞系相关产品:Hs-852-T细胞、Sci-1细胞、R1800[RA]细胞
PA I细胞系相关产品:GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞
H-2107细胞系相关产品:rUCMSCs细胞、HDQP1细胞、H-1688细胞
Jurkat clone A3细胞系相关产品:LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞
A-431细胞系相关产品:RL95-2细胞、Raji细胞、SKBR-3细胞
HMC细胞系相关产品:CEM-CCRF (CAMR)细胞、624 MEL细胞、GM2132细胞
QGP1细胞系相关产品:NCI-H220细胞、MT-2J细胞、LS-180细胞
JeKo 1细胞系相关产品:HPAF-2细胞、TE-8细胞、hOMF细胞
TOV112细胞系相关产品:SKHEP-1细胞、DU145细胞、Hs683细胞
NCI-SNU-387细胞系相关产品:Scott and White No. 13细胞、SK-BR-3细胞、Y1细胞
RGM1细胞系相关产品:C1R细胞、HT-29细胞、SKMel-28细胞
LM3细胞系相关产品:HCC1500细胞、UCLA-SO-M14细胞、H-35细胞
PANC-03-27细胞系相关产品:hTERT-HME-1细胞、G 401细胞、HEK.EBNA细胞
MOLT 3细胞系相关产品:BC-009细胞、OAW-42细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞
BRL3A细胞系相关产品:WEHI-164细胞、NTera-2D1细胞、COLO-205细胞
Glioma-261细胞系相关产品:BHP 10-3细胞、H2141细胞、COLO 205细胞
CWR22R-V1细胞系相关产品:HLE-SRA-01/04细胞、NG-108-15细胞、CAL12T细胞
BI-Mel细胞系相关产品:KHYG-1细胞、SkChA1细胞、SW.620细胞
H-929细胞系相关产品:C3H/10T1/2 CL8细胞、ZR751细胞、NCI-H661细胞
MDA-MB 453细胞系相关产品:LoVo细胞、NCI-H727细胞、2780CP细胞
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Ha Fe细胞系相关产品:HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞
H1618细胞系相关产品:TE-12细胞、TCMK-1细胞、H810细胞
MuM-2B细胞系相关产品:MNNG细胞、KYSE 70细胞、CL34细胞
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LAPC-4细胞系相关产品:MESSA Dx5细胞、COR-L51细胞、B95.8细胞
KGN Adherent人卵巢颗粒细胞系
Granta 519细胞系相关产品:HET-1A细胞、J 774A.1细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞
ZR-75-30细胞系相关产品:EBC-1/original细胞、SiHa细胞、EAC-E2G8细胞
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SK-LU-1细胞系相关产品:OCI-Ly 3细胞、LN 382细胞、211H细胞
L 1210细胞系相关产品:BHP10-3细胞、NCI-SNU-5细胞、NCI-H2073细胞
SkMel31细胞系相关产品:CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞
Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品:Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞
hSCC-25细胞系相关产品:SF 295细胞、K1735细胞、HDF-a细胞
FL83B细胞系相关产品:H847细胞、SW 837细胞、WM266-4细胞
PA-TU S细胞系相关产品:NCI-H322T细胞、NCI-H345细胞、686LN-M4e细胞
MLMEC细胞系相关产品:U-266细胞、Capan-2细胞、HCT-FET细胞
AR4IP细胞系相关产品:D341 Med细胞、UCLA-SO-M21细胞、KYSE270细胞
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