"A-375 Adherent人恶性黑色素瘤细胞系
细胞背景资料:A375源自一位54岁女性,是Giard DJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞可在免疫抑制小鼠上成瘤,在琼脂上形成克隆。
细胞形态:上皮细胞样
细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻,细胞内外的水分会很快形成冰晶,从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高,pH值改变,部分蛋白质由于上述原因而变性,引起细胞内部空间结构紊乱,溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶,使细胞内结构成分造成破坏,线粒体肿胀,功能丢失,并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变,使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多,随冷冻温度的降低,冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤,而致细胞死亡。因此,细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分,减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质分子量小,溶解度大,易穿透细胞,可以使冰点下降,提高细胞膜对水的通透性,且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外,减少胞内形成冰结晶的机会,从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
A-375 Adherent人恶性黑色素瘤细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞系相关产品:FU-97细胞、OCM-1细胞、WM-451Lu细胞
TE11细胞系相关产品:Lung cancer-1/squamous细胞、OUMS-27细胞、U2OS细胞
Raji细胞系相关产品:VAESBJ细胞、Hs737T细胞、HGC-27细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
UACC812细胞系相关产品:SNU-719细胞、HAEC细胞、SW1990细胞
R 1610细胞系相关产品:E0771细胞、PA1细胞、MLE12细胞
OCI/AML2细胞系相关产品:BrCL18细胞、CORL26细胞、MDA415细胞
细胞生长特性:贴壁
A-375 Adherent人恶性黑色素瘤细胞系
细胞形态特性:上皮细胞样
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浑细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟,转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离;rpm为离心机每分钟的转数;RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
FHL-124细胞系相关产品:SK-MEL3细胞、SkChA-1细胞、LUDLU1细胞
BJA-B1细胞系相关产品:Me Wo细胞、Granta 519细胞、TR146细胞
UM-UC3细胞系相关产品:HEC1A细胞、H1299细胞、HD-LM-2细胞
IEC 6细胞系相关产品:NCI-H865细胞、H4细胞、Hs 606.T细胞
T98G细胞系相关产品:RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞
MDAPCa-2b细胞系相关产品:TOV-112D细胞、U-373MG细胞、HS-683细胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞系相关产品:Hs729T细胞、BMU-S1细胞、Rca-B细胞
NCI-HUT-520细胞系相关产品:P3J HR-1细胞、RS(4;11)细胞、MF2059细胞
NCI-H1648细胞系相关产品:CT26-clone 25细胞、UPCI:SCC154细胞、MSTO-211H细胞
NSC34细胞系相关产品:NTera 2/cl.D1细胞、H.Ep. #2细胞、LC1-Sq细胞
SGC7901/DDP细胞系相关产品:MHCC 97-H细胞、SUM190PT细胞、Co-115细胞
SUM159PT细胞系相关产品:DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
RK 13细胞系相关产品:NCIH2405细胞、HNE3细胞、SNU601细胞
A-375 Adherent人恶性黑色素瘤细胞系
KMBC细胞系相关产品:MKN-28细胞、TE 85 ClF-5细胞、Neukoplast细胞
VERO76细胞系相关产品:AN3CA细胞、SCC090细胞、CAKI.1细胞
HIT细胞系相关产品:SUM-52细胞、PLA801C细胞、MEL-526细胞
DiFi细胞系相关产品:SUDHL10细胞、MLM细胞、8305C细胞
OPM2细胞系相关产品:KP-N-YN细胞、SKRC 39细胞、RSC-364细胞
HT-1197细胞系相关产品:766T细胞、GA-10 (Clone 4)细胞、HCT-8/V细胞
Leukemia 1210细胞系相关产品:293T细胞、CL 1-0细胞、U-2OS细胞
NCIH2227细胞系相关产品:OK细胞、RCC-JF细胞、HMrSV5细胞
HET1A细胞系相关产品:COR-L279细胞、Mv 1 Lu细胞、HAVSMC细胞
DR2R1610细胞系相关产品:253J细胞、50.B1细胞、Tregs细胞
HS578细胞系相关产品:CAMA-1细胞、SCCVII/St细胞、MT-3 [Human leukocytes]细胞
NCI H82细胞系相关产品:SP2/0 Ag-14细胞、SNU668细胞、Clone Y-1细胞
624 MEL细胞系相关产品:SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞
HRVEC细胞系相关产品:CCK-81细胞、COLO_320DM细胞、L-6细胞
NOR-10细胞系相关产品:ROS-17/2.8细胞、H146细胞、SKNFI细胞
RGC-6细胞系相关产品:RPMI7666细胞、RKO-AS45-1细胞、RCC10 RGB细胞
RAT2细胞系相关产品:Rat 2细胞、Walker256细胞、P31 FUJ细胞
NCIH1105细胞系相关产品:ST 486细胞、CT26.WT细胞、H-1299细胞
MIHA细胞系相关产品:HCS-2/8细胞、NPC-039细胞、PaTu8988s细胞
TE15细胞系相关产品:N-Tera-2细胞、PAEC细胞、4T1-LUC细胞
PaCa2细胞系相关产品:NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞
NCI-H125细胞系相关产品:J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞
T84细胞系相关产品:A-2780细胞、KU 812细胞、GTL16细胞
CAL-62细胞系相关产品:mRMEC细胞、KYSE180细胞、HS766T细胞
Hs 839.T细胞系相关产品:NCI-H661细胞、HEK 293细胞、HEK293-A细胞
H2126细胞系相关产品:AMC-HN-8细胞、NCI-HUT-520细胞、K562/ADP细胞
Neuro 2a细胞系相关产品:A10细胞、HCC-95细胞、OLN 93细胞
HCC-44细胞系相关产品:NU-GC-2细胞、BLO11细胞、TH1细胞
MES23.5细胞系相关产品:NCI-SNU-1040细胞、L Wnt-3A细胞、SN12CPM6细胞
HT-144细胞系相关产品:RMC-1细胞、SU-DH-L5细胞、Line 522细胞
MRAEC细胞系相关产品:LNCaP C4-2B细胞、LS-123细胞、RAMSCs细胞
HKBML细胞系相关产品:HL-1细胞、8226细胞、SW 962细胞
NT2细胞系相关产品:T1-73细胞、C 643细胞、NFHIOSE-80细胞
MOPC细胞系相关产品:HS-294细胞、GM3570细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞
Med 283细胞系相关产品:MeT5A细胞、CHO-Lec1细胞、MS751细胞
CCRF CEM细胞系相关产品:ARO81-1细胞、MKN 7细胞、2PK-3细胞
MC3T3-E细胞系相关产品:SK-RC-42细胞、LNCaP细胞、FLC7细胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞系相关产品:H-1623细胞、H-719细胞、OVSAHO细胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞系相关产品:U251细胞、SNU1040细胞、MLFC细胞
NBL-12细胞系相关产品:PT-K75细胞、GM-637细胞、WI 38细胞
PNT1/A细胞系相关产品:HCC-1599细胞、Hs729T细胞、NRK-49F细胞
VP303细胞系相关产品:Huh-7细胞、COLO 205细胞、MOLP-8细胞
A-375 Adherent人恶性黑色素瘤细胞系
AtT20细胞系相关产品:U138MG细胞、HS-766T细胞、PA12细胞
GM02131细胞系相关产品:NCTC-3960细胞、Rat Fetal Lung-6细胞、LICR-HN6细胞
KRC/Y细胞系相关产品:VMM5细胞、GT1-1细胞、P31/FUJ细胞
NG10815细胞系相关产品:P30-OHK细胞、B78细胞、IOSE-80细胞
HGC27细胞系相关产品:SK BR 03细胞、MDA-134细胞、Hep G2细胞
38C13细胞系相关产品:YH细胞、P31-FUJ细胞、Tn5 B1-4细胞
QGY-7703细胞系相关产品:FLC7细胞、PFSK1细胞、MDCK2细胞
SKNO1细胞系相关产品:MDA-MB-175VII细胞、HCC-1937细胞、CT26细胞
L-5178-Y细胞系相关产品:Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
MADB 106细胞系相关产品:HCT FET细胞、RCK-8细胞、A431细胞
OVCA-433细胞系相关产品:HOS细胞、Colon-38细胞、RBE4细胞
UM-UC3细胞系相关产品:HEC1A细胞、C33A细胞、UMUC1细胞
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