"PC-3M Adherent人前列腺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
PC-3M Adherent人前列腺癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
RTE细胞系相关产品:ECC-1细胞、UACC 893细胞、H-250细胞
KP-N-RT-BM细胞系相关产品:HCT-116细胞、190PT细胞、VERO C 1008细胞
QGY-7701细胞系相关产品:CMT 93细胞、CAL 12T细胞、U20S细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MOLP-8细胞系相关产品:Hs 742.T细胞、HSC-4细胞、SNU475细胞
CLONE M3细胞系相关产品:P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞系相关产品:U251细胞、SNU1040细胞、MLFC细胞
细胞生长特性:贴壁生长
PC-3M Adherent人前列腺癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
Swiss3T3细胞系相关产品:3T6-Swiss albino细胞、NCI-BL6细胞、NCIH661细胞
32D.3细胞系相关产品:TKB-1细胞、Hs 636.T细胞、Capan1细胞
SF 767细胞系相关产品:TSUpr1细胞、ESC细胞、PE/CA-PJ-34细胞
hs 68细胞系相关产品:MSB1细胞、MOLP-2细胞、RBL2H3细胞
CTSC-3细胞系相关产品:HFF细胞、Nb2-11细胞、SU-DHL-5细胞
NCI H747细胞系相关产品:NKL细胞、HeLa-S3细胞、Colon 26细胞
SK-ML2细胞系相关产品:COR L279细胞、Sp2/0-Ag14细胞、J 111细胞
SNU-423细胞系相关产品:CNE-2细胞、SRA01/04 (HLE)细胞、CTLA4 Ig-24细胞
IEC 6细胞系相关产品:NCI-H865细胞、H4细胞、Hs 606.T细胞
SW 527细胞系相关产品:UMUC-3细胞、H1435细胞、A375-S2细胞
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Ej138细胞系相关产品:Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
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PC-3M Adherent人前列腺癌细胞系
H498细胞系相关产品:MES-23.5细胞、NCI-H676细胞、Mel-MeWo细胞
T-24细胞系相关产品:SK-ML2细胞、Walker 256细胞、BL-6细胞
Raji细胞系相关产品:VAESBJ细胞、Hs737T细胞、HGC-27细胞
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JB6Cl30细胞系相关产品:MLO-Y4细胞、H661细胞、DHL4细胞
LS411N细胞系相关产品:H-510细胞、GM2219C细胞、MC-CAR细胞
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4T1细胞系相关产品:BSC40细胞、T173细胞、SK_HEP1细胞
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Madison细胞系相关产品:RF/6A细胞、SF 126细胞、CBRH7919细胞
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Med 341细胞系相关产品:373MG细胞、HG2855细胞、U-87 MG细胞
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Ramos (RA 1)细胞系相关产品:hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
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UMR 106细胞系相关产品:SW 1990细胞、BSC1细胞、PC-3M-IE8细胞
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GM2219C细胞系相关产品:AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞
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MC3T3-E1 Subclone 24细胞系相关产品:H1666_DA细胞、526mel细胞、Lung cancer-1/squamous细胞
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TW 01细胞系相关产品:A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
PC-3M Adherent人前列腺癌细胞系
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