"NCI-H157 Adherent人非小细胞肺腺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H157 Adherent人非小细胞肺腺癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
冷冻细胞解冻程序:依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例,制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类,若因实验需要,必须有所不同时,务必以缓慢比例渐次改变培养基组成,确定细胞适应后,方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。取出冷冻管,立即放入37°C水槽中快速解冻,水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿,否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后,以70%ethanol擦拭冷冻管外部,移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25或T75flask内之培养基,混合均匀,放入37°C,5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言,1%以下之冷冻保护剂DMSO,不会对细胞之贴附或活化有不良影响,不需立刻由解冻细胞中去除,待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞,需立即去除DMSO者,则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中,离心300xg(约1000rpm),5分钟,小心移去上清液,加入适量新鲜培养基,将细胞均匀混合后,转移至培养瓶中,再放入37°C,5%CO2培养箱培养。
NCIH295R细胞系相关产品:TI-73细胞、NCIH1755细胞、NCI-H2591细胞
HOS/MNNG细胞系相关产品:H-2347细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞、JROECL19细胞
L929(NCTC)细胞系相关产品:C-26细胞、GP-293细胞、AHH1细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
TR146细胞系相关产品:NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、T98 G细胞、TF-1细胞
T98-G细胞系相关产品:H-28细胞、D341 Med细胞、OV1/P细胞
CCK81细胞系相关产品:HLE-B3细胞、IOSE29细胞、NCI H23细胞
细胞生长特性:贴壁生长
NCI-H157 Adherent人非小细胞肺腺癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
NPA细胞系相关产品:Rabbit Kidney 13细胞、JB-6细胞、GM16136细胞
L5178-R细胞系相关产品:Karpas-299细胞、GM3190细胞、P3X63-Ag8.653细胞
H-2227细胞系相关产品:HT1197细胞、HUT 125细胞、J.E6-1细胞
HEK 293FT细胞系相关产品:CBRH7919细胞、HBE细胞、IAR 20细胞
ECC-12细胞系相关产品:RCC10细胞、SCL1细胞、Lec1细胞
U266细胞系相关产品:MV-4-11细胞、H1993细胞、AZ-521细胞
DU-4475细胞系相关产品:HCC1359细胞、CCD 841 CoTr细胞、HSKMC细胞
MN9D细胞系相关产品:U251n细胞、Vero from pool #76细胞、HAPI细胞
SL1细胞系相关产品:Cates-1B细胞、NCI-H2347细胞、TFK1细胞
CLONE M3细胞系相关产品:P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞
H322细胞系相关产品:P3-x63-Ag8 653细胞、Jiyoye细胞、293F细胞
Super Tube细胞系相关产品:SCCVII/St细胞、COR-L23/P细胞、TE5细胞
SVOG细胞系相关产品:Panc-1-P细胞、HCC94细胞、B10BR细胞
NCI-H157 Adherent人非小细胞肺腺癌细胞系
GM00637B细胞系相关产品:Neukoplast细胞、L-M(TK-)细胞、alphaTC1 Clone 6细胞
H1694细胞系相关产品:beta TC6细胞、TE671细胞、CCRF/CEM/0细胞
HEI-193细胞系相关产品:HNSC细胞、NIH:OVCAR-5细胞、NCI-H1819细胞
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NCI-H2085细胞系相关产品:L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞
RPMI-6666细胞系相关产品:SKG3A细胞、MC-116细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞
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HCC 2185细胞系相关产品:H-1930细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞、N2a细胞
J-82细胞系相关产品:293EBNA细胞、MDA-175细胞、NCI-H2172细胞
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SCC-9细胞系相关产品:Ls-174-T细胞、TU 686细胞、A2780/CP70细胞
RPMI.8226细胞系相关产品:NCIH250细胞、KYSE 50细胞、KMB 17细胞
P3/X63/Ag8.653细胞系相关产品:TE-5细胞、CTLL2细胞、CD18/HPAF细胞
Japanese Tissue Culture-28细胞系相关产品:HuH-28细胞、Pa18C细胞、Molm14细胞
UCLA RO-81A-1细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、Hep3B细胞、M14-MEL细胞
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MUTZ-3细胞系相关产品:H1915细胞、NCIH1734细胞、DV-90细胞
Hs870T细胞系相关产品:JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞
H766T细胞系相关产品:Hs27细胞、EAHY-926细胞、Y3Ag1.2.3细胞
OSC-19细胞系相关产品:BE2_C细胞、MDA 1386细胞、CL 1-0细胞
HCT 15细胞系相关产品:COV 434细胞、NCIH2170细胞、MSTO211H细胞
HEK 293-F细胞系相关产品:TR 146细胞、Chang liver细胞、RPMI No. 1846细胞
Colon38细胞系相关产品:H125细胞、RC13细胞、JF305细胞
NCIH244细胞系相关产品:LIPF155C细胞、MF2059细胞、EJ细胞
CL1.0细胞系相关产品:COR-L 105细胞、M14-MEL细胞、MMAc-Serum Free细胞
Fao细胞系相关产品:RPMI #8226细胞、Keio University-19-19细胞、BEL 7402细胞
Alpha Mouse Liver 12细胞系相关产品:KTC-1细胞、COV-362细胞、EAhy 926细胞
UO.31细胞系相关产品:MDA-MB-134 VI细胞、GB-1细胞、NBL-1细胞
CEM细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、HEK-293H细胞、H740细胞
EMT-6细胞系相关产品:CTLL2细胞、MCM细胞、GA-10细胞
1E8-H细胞系相关产品:RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞
CoC1细胞系相关产品:D324细胞、L540细胞、74Int细胞
CoC1细胞系相关产品:D324细胞、L540细胞、74Int细胞
NCIH1869细胞系相关产品:H2.35细胞、NCI-H345细胞、NCI-H-295细胞
IMR-90细胞系相关产品:LC1细胞、WILL2细胞、MIN6细胞
NCI-ADR-RES细胞系相关产品:Wayne State University-Head and Neck 13细胞、RPMI1846细胞、WEHI164细胞
NCIH1755细胞系相关产品:FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞
NCI-H157 Adherent人非小细胞肺腺癌细胞系
UPCI-SCC-090细胞系相关产品:U20-S细胞、R3/1细胞、OVMANA细胞
IOSE80细胞系相关产品:NCI-H69C细胞、Jurkat E6-1细胞、MGECs细胞
MES 13细胞系相关产品:MCA38细胞、HLEB-3细胞、SUM 149PT细胞
HTori-3细胞系相关产品:LM6细胞、Hs 746T细胞、MUG-Chor1细胞
LUDLU 1细胞系相关产品:HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞
PLA801C细胞系相关产品:MBT-2细胞、CCD-19Lu细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞
aTC1-6细胞系相关产品:WM115mel细胞、P31FUJ细胞、RCC-4细胞
MDA-MB 468细胞系相关产品:U373细胞、SKMEL5细胞、ARPE19细胞
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HFF1细胞系相关产品:BNL 1ME A.7R.1细胞、U-226AR1细胞、32D/cl3细胞
KU812-F细胞系相关产品:639V细胞、CCC-HHM-2细胞、HLF细胞
H2227细胞系相关产品:ARPE19细胞、SKMEL5细胞、MDA-MB-453细胞
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