"TE-15 Adherent人食管癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
TE-15 Adherent人食管癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
L540细胞系相关产品:MES-SA/Dx5细胞、P31 FUJ细胞、RS(4;11)细胞
BeWo细胞系相关产品:SU-DHL-5细胞、TE-3A细胞、UM-UC-3细胞
Large Cell Lung Cancer-103H细胞系相关产品:WPMY-1细胞、A2780CP细胞、NCI-SNU-423细胞
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Hs.27细胞系相关产品:H-526细胞、Hs 578Bst细胞、Nb 2细胞
HFTF细胞系相关产品:HeLa细胞、AX-Mel细胞、NCIH1048细胞
CNE-2细胞系相关产品:HCT15细胞、RMC-1细胞、MDA-330细胞
细胞生长特性:贴壁生长
TE-15 Adherent人食管癌细胞系
细胞形态特性:上皮样
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
PLC PRF 5细胞系相关产品:RLE-6TN细胞、U-2932细胞、DMS-53细胞
NCIH1623细胞系相关产品:MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞系相关产品:THP 1细胞、IGR-OV1细胞、BHK-21细胞
NCIH378细胞系相关产品:COLO320-DM细胞、COS-7细胞、EC9706细胞
NRK-49F细胞系相关产品:SK-MEL 28细胞、SK-N-BE细胞、MCCAR细胞
HCT116/L细胞系相关产品:PANC 1005细胞、LAC细胞、U-2-OS细胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞系相关产品:RPMI8402细胞、NIH3T3细胞、C 643细胞
TK10细胞系相关产品:KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞
PE/CA-PJ34细胞系相关产品:HIT-T15细胞、NS20-Y细胞、Hce8693细胞
MLE12细胞系相关产品:KATO 3细胞、Hs 606.T细胞、SK-ES1细胞
Gejiu Lung Carcinoma-82细胞系相关产品:NCI-H1395细胞、87 MG细胞、OCILY-3细胞
IHC-ST1细胞系相关产品:Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞
RIN m5F细胞系相关产品:H-2141细胞、ROS-17/2.8细胞、SF 295细胞
TE-15 Adherent人食管癌细胞系
HME1细胞系相关产品:MC 116细胞、LNCaP clone FGC细胞、NCIH1666细胞
KS-1 [Human glioblastoma]细胞系相关产品:BEL 7405细胞、BC-021细胞、TE-7细胞
AC16 [Human hybrid]细胞系相关产品:SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞
AC16 [Human hybrid]细胞系相关产品:SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞
P3X63 Ag8细胞系相关产品:H-2291细胞、FCCH1024细胞、SU-DHL6细胞
HR-1细胞系相关产品:HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞
P-388D1细胞系相关产品:OV1063细胞、L-Wnt3A细胞、Neuro 2a细胞
NCI-H774细胞系相关产品:UMUC14细胞、BE2_C细胞、CCC-HEL-1细胞
Normal fibroblast-10细胞系相关产品:58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞
NCI-H378细胞系相关产品:WRL-68细胞、RC-4B细胞、KHYG细胞
TM4细胞系相关产品:UC-3细胞、CWR22R-V1细胞、TE-11细胞
Panc8.13细胞系相关产品:GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞
RCF细胞系相关产品:HA细胞、Malme-3 M细胞、MRASMC细胞
FDCP1细胞系相关产品:RT4P细胞、CCRF/CEM细胞、COR-L23细胞
V 79细胞系相关产品:Liver-02细胞、LS 123细胞、Microbiological Associates-104细胞
SUM159PT细胞系相关产品:DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
COLO 320 HSR细胞系相关产品:DR2R1610细胞、E0771细胞、H-498细胞
HPaSteC(HPSC)细胞系相关产品:C3H-10T1/2细胞、MyLa 2059细胞、HEL-92细胞
MX1细胞系相关产品:BXPC3细胞、ASH-3细胞、Lu-65细胞
NPA87-1细胞系相关产品:SUM 52PE细胞、Y3细胞、HT 1376细胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞系相关产品:Hx-147细胞、H510A细胞、NIH:OVCAR3细胞
MS1细胞系相关产品:H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞
KPL4细胞系相关产品:GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞
M-G63细胞系相关产品:SKMel-5细胞、SUIT-2细胞、HLE-B3细胞
EOC20细胞系相关产品:COV-434细胞、AgC11x3A细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞
TYKnu细胞系相关产品:NCIH1915细胞、OVSAHO细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞
HCV29细胞系相关产品:GS9L细胞、HCC-1171细胞、WEHI 164细胞
SNU-520细胞系相关产品:H-1648细胞、H-460细胞、TE-3A细胞
AN3 CA细胞系相关产品:BV-2细胞、Ishikawa细胞、COLO 679细胞
OVCAR 8细胞系相关产品:CCRF-CEM/S细胞、Ball 1细胞、JIMT细胞
L 132细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、MES-13细胞、H1694细胞
TE13细胞系相关产品:H1944细胞、GM05372细胞、CT26.CL25细胞
Ect1/E6E7细胞系相关产品:NIH-3T3-L1细胞、H-676B细胞、End1/E6E7细胞
1.1B4细胞系相关产品:LN-18细胞、GM637A细胞、Human Kidney-2细胞
DSL-6A-C1细胞系相关产品:HTh 74细胞、SW-1271细胞、HMEC细胞
SW 480细胞系相关产品:Balb/c 3T3细胞、CAL120细胞、NCI/ADR-RES细胞
IB-RS2细胞系相关产品:SW-1417细胞、MKN-45细胞、OUMS-23细胞
IB-RS2细胞系相关产品:SW-1417细胞、MKN-45细胞、OUMS-23细胞
PL 45细胞系相关产品:RK 13细胞、HC-11细胞、Human Embryo Lung-1细胞
A-498细胞系相关产品:Raji细胞、HBSMC细胞、A2780/CP细胞
MCF-7ADR细胞系相关产品:Walker-Ca.256细胞、KASUMI1细胞、EJ 138细胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞系相关产品:451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞
TE-15 Adherent人食管癌细胞系
HEL299细胞系相关产品:SKOV3细胞、SK.OV.3细胞、TGBC11T细胞
MDA-MB-231 #4175细胞系相关产品:REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞
MC9细胞系相关产品:CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞
P3-X63Ag8.653细胞系相关产品:PL-11细胞、RMS1598细胞、MUTZ-1细胞
ROS1728细胞系相关产品:T_T_细胞、SW962细胞、SW 954细胞
HCCC-9810细胞系相关产品:ES2细胞、CAL-148细胞、MDA-MB-231细胞
MDA-MB 231细胞系相关产品:HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞
NBLAN5T细胞系相关产品:KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞系相关产品:SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞
H-1395细胞系相关产品:A549-Taxol细胞、PC-3M-IE8细胞、NCI-522细胞
AHH-1细胞系相关产品:Be Wo细胞、VCaP细胞、BAEC细胞
High-5细胞系相关产品:NCIH446细胞、OKAC1细胞、C4 I细胞
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