"Onda 11 Adherent人脑神经胶质瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Onda 11 Adherent人脑神经胶质瘤细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
RCM1细胞系相关产品:J-82细胞、RMS 1598细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞
NCIH929细胞系相关产品:U-251MG细胞、HuCCT-1细胞、MARC145细胞
MBVP细胞系相关产品:COLO-16细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、SK-N-DZ细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
COLO-824细胞系相关产品:Med 341细胞、Rat Skin 1细胞、M1细胞
EJ 138细胞系相关产品:IEC18细胞、MV(4;11)细胞、MSCs(mUCMSCs)细胞
Melanoma 14细胞系相关产品:T. T细胞、NSC-34细胞、OVCAR5细胞
细胞生长特性:贴壁生长
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细胞形态特性:上皮样
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
Nthy-ori 3-1细胞系相关产品:Hs 636 T细胞、LYR细胞、L 929细胞
SW-1573细胞系相关产品:MDBK (NBL-1)细胞、IM 9细胞、NR 8383细胞
MCF 7细胞系相关产品:293-GP细胞、MyLa2059细胞、NCI-H2444细胞
NCI-H1793细胞系相关产品:Sol8细胞、Colo-678细胞、H-2135细胞
FRTL 5细胞系相关产品:RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞
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H1963细胞系相关产品:SK Col 1细胞、GA-10 clone 4细胞、MCF-7/ADR细胞
OVCA 420细胞系相关产品:IOSE 80细胞、RT-112细胞、NK92MI细胞
C-33A细胞系相关产品:NCIH740细胞、CEM-T4细胞、PC3M-IE8细胞
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NTera-2D1细胞系相关产品:HuH7细胞、NALM-6-M1细胞、TKB1细胞
MLA-144细胞系相关产品:H-1963细胞、WEHI 231细胞、P3X63Ag8653细胞
T-98细胞系相关产品:SKml2细胞、MKN-28细胞、MDCK Type II细胞
T-98细胞系相关产品:SKml2细胞、MKN-28细胞、MDCK Type II细胞
A101D细胞系相关产品:SNU-C2B细胞、NCI-A549细胞、B6Tert-1细胞
HSC-6细胞系相关产品:PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞
OVCA 433细胞系相关产品:Japanese Tissue Culture-28细胞、HPAF-II细胞、H-1944细胞
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143B TK-细胞系相关产品:GM03571细胞、MH-22a细胞、SK RC 52细胞
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Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞系相关产品:H128细胞、HASMC细胞、NCI-H1299细胞
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NCI-BL1339细胞系相关产品:Neuro-2a细胞、Tb 1-Lu细胞、NCTC1469细胞
Case 3细胞系相关产品:NCIH2106细胞、BGC823细胞、H1666细胞
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P-36细胞系相关产品:HCT_116细胞、Chinese Hamster Ovary细胞、VM-CUB-1细胞
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LLC-PK(1)细胞系相关产品:Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞、mRTEC细胞、HLMVEC细胞
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KP-2细胞系相关产品:NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞
NCIH2009细胞系相关产品:FD-LSC-1细胞、CCD1095Sk细胞、CT26.WT细胞
MCF 7细胞系相关产品:293-GP细胞、MyLa2059细胞、NCI-H2444细胞
IPLB-SF-21细胞系相关产品:Z-138细胞、COLO320 DM细胞、786O细胞
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DMS 273细胞系相关产品:AN-3细胞、OCI-Ly7细胞、Hs940-T细胞
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A549-Taxol细胞系相关产品:MLM细胞、KYSE410细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞
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LC-2-Ad细胞系相关产品:SKRC 39细胞、HLFa细胞、WB-F344细胞
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MGC803细胞系相关产品:A2780-CP细胞、SK-GT-4细胞、CEM细胞
HEM-L细胞系相关产品:Z310细胞、SU.86.86细胞、ECC-12细胞
NCI-H838细胞系相关产品:hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞
CCD18Co细胞系相关产品:HLE B-3细胞、NCI-H1385细胞、HBL 100细胞
NU-GC-3细胞系相关产品:MGC803细胞、ACCM细胞、MC 116细胞
H-2342细胞系相关产品:HCT116/L细胞、LoVo细胞、H1563细胞
CCD1095Sk细胞系相关产品:NCI-H711细胞、ETCC-007细胞、MM134细胞
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EOL1细胞系相关产品:H-2126细胞、NCI-SNU-475细胞、CMT.64细胞
B104 [Rat neuroblastoma]细胞系相关产品:C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞
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SUNE-1细胞系相关产品:D10G41细胞、SCC 15细胞、Hs822T细胞
UO31细胞系相关产品:MHH-CALL-2细胞、Toledo细胞、A.704细胞
COR-L23细胞系相关产品:CF Pac1细胞、MDA-MB-134-VI细胞、NBL-S细胞
MCF 7细胞系相关产品:293-GP细胞、PK13细胞、TE353.SK细胞
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