"COLO 205 Adherent人结直肠腺癌细胞系
细胞背景资料:该细胞系是1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水中分离的。该病人在取腹水样品前已用5-尿嘧啶治疗4~6周。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性;产生CEA、IL10。
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
COLO 205 Adherent人结直肠腺癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
PK-13细胞系相关产品:PG-BE1细胞、NCI H747细胞、EBNA-293细胞
NCIADRRES细胞系相关产品:RWPE-1细胞、CEL细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞
LS-180细胞系相关产品:COLO678细胞、ABC1细胞、K1735细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
U373-MG细胞系相关产品:Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞
U373-MG细胞系相关产品:Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞
SCC 15细胞系相关产品:VeroC1008细胞、NCI-H522细胞、MV4-11细胞
细胞生长特性:贴壁生长
COLO 205 Adherent人结直肠腺癌细胞系
细胞形态特性:上皮样
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
JB6Cl30细胞系相关产品:MLO-Y4细胞、H661细胞、DHL4细胞
JEKO细胞系相关产品:H-520细胞、NCIH1975细胞、33604细胞
HT-55细胞系相关产品:BT-474细胞、NS1/1-Ag4.1细胞、HLEB-3细胞
NCTC clone 929细胞系相关产品:MDAMB157细胞、SU-DHL-1细胞、CCD19Lu细胞
Tu177细胞系相关产品:CMT64细胞、Mhh-Call 2细胞、HPDE细胞
Th17细胞系相关产品:MIN-6细胞、SHIN3细胞、Eph4 1424细胞
NCI-H2029细胞系相关产品:Ku812细胞、P30 OHK细胞、SK-NEP-1细胞
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G-292 clone A141B1细胞系相关产品:EB2细胞、NCIH244细胞、LLC1细胞
SW839细胞系相关产品:RC-2细胞、Kit 225 K6细胞、SNU182细胞
COLO 205 Adherent人结直肠腺癌细胞系
SF126细胞系相关产品:KMH-2细胞、MCA 205细胞、MKN 7细胞
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CT26.CL25细胞系相关产品:MDA-435细胞、H-64细胞、H2122细胞
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C-6细胞系相关产品:MRC9细胞、JIMT细胞、GM-637细胞
Tsup-1细胞系相关产品:CCFSTTG1细胞、58F细胞、HCC-1954BL细胞
NCI-H2009细胞系相关产品:CHP 212细胞、LS 174T细胞、WEHI3细胞
MV-522细胞系相关产品:SUM 102细胞、451-LU细胞、Caki2细胞
MOVAS细胞系相关产品:SUM159PT细胞、KHYG细胞、M-O7e细胞
L5178Y细胞系相关产品:Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、J774.A1细胞、PL-5细胞
SRA01/04 (HLE)细胞系相关产品:AMO-1细胞、SBC3细胞、3-LL细胞
AA-Mel细胞系相关产品:SW1463细胞、L 929细胞、HT-1080细胞
ZR-75-30细胞系相关产品:EBC-1/original细胞、SiHa细胞、EAC-E2G8细胞
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ATN1细胞系相关产品:NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞
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SUM 190细胞系相关产品:SV-HUC-1细胞、SH-SY5Y Parental细胞、HPAF-II/CD18细胞
WEHI-164细胞系相关产品:HSC 3细胞、3T3(A31)细胞、PC-3M-1E8细胞
H1373细胞系相关产品:Opossum Kidney细胞、SUP-T1细胞、JEKO细胞
L-929细胞系相关产品:SN12PM6细胞、HANK-1细胞、Hs.27细胞
COV-434细胞系相关产品:HT-1376细胞、PNT-1A细胞、B16BL6细胞
SW1222细胞系相关产品:HRA 19细胞、Normal Rat Kidney-49F细胞、HCC941122细胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞系相关产品:HS852.T细胞、NCI-H146细胞、Giant Cell Tumor细胞
C81-61细胞系相关产品:JB 6细胞、Hs 445细胞、Panc8.13细胞
NIH:OVCAR-8细胞系相关产品:X63-Ag8.653细胞、QBI-HEK 293A细胞、IEC-6细胞
COLO 205 Adherent人结直肠腺癌细胞系
TE-6细胞系相关产品:SK MEL 28细胞、MFC细胞、REC-1细胞
149 PT细胞系相关产品:Hs 578T细胞、H-9细胞、SNU878细胞
MKN-74细胞系相关产品:RMS 1598细胞、IHHA-1细胞、alpha-TC1-6细胞
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M-NFS-60细胞系相关产品:ACC-2细胞、EOL1细胞、Caco-2 BBe细胞
Rat-1细胞系相关产品:GM00215A细胞、MDA231细胞、KU-812-F细胞
JB6 [Mouse]细胞系相关产品:NRK49F细胞、CL1-5细胞、ST-2细胞
Tissue Culture-1细胞系相关产品:CA-46细胞、HCC1419细胞、WC00059细胞
Balb/c3T3细胞系相关产品:IPLB-SF 21AE细胞、DLM8细胞、BL6细胞
BJ [Human fibroblast]细胞系相关产品:H-2591细胞、MBT2细胞、SW579细胞
NCI-H1648细胞系相关产品:CT26-clone 25细胞、293E细胞、H-23细胞
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