"BA/F3 Adherent小鼠原B细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
BA/F3 Adherent小鼠原B细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
UCLA SO M14细胞系相关产品:H-220细胞、CEF细胞、C2BBe 1细胞
X63.Ag8.653细胞系相关产品:NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
Hs863T细胞系相关产品:NCIH1836细胞、LC-1细胞、RDES-1细胞
细胞传代方法:1:3传代;3-4天1次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PTK-2细胞系相关产品:MHCC97L细胞、SUDHL-1细胞、Ramos (RA 1)细胞
AAV293细胞系相关产品:COS1细胞、MLE12细胞、NCIH2171细胞
Panc203细胞系相关产品:SCH细胞、HCASMC细胞、Human podocyte细胞
细胞生长特性:悬浮生长
BA/F3 Adherent小鼠原B细胞系
细胞形态特性:圆形
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞系相关产品:ECC-12细胞、HCC2108细胞、CHP 100细胞
NCC-IT细胞系相关产品:NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞
SUSM1细胞系相关产品:SW 527细胞、KNS-42细胞、Eca109细胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞系相关产品:Capan-1细胞、HIT.T15细胞、MB 157细胞
UPCI-SCC-90细胞系相关产品:OCI AML4细胞、SU-DHL-10细胞、HCCC-9810细胞
NCIH1770细胞系相关产品:J45.01细胞、293 F细胞、Kasumi 1细胞
ETCC007细胞系相关产品:VP303细胞、Panc 08.13细胞、RCS细胞
MeT-5A细胞系相关产品:A-549细胞、SK-ES1细胞、PANC 327细胞
MHH-CALL2细胞系相关产品:D-283MED细胞、W133细胞、BE(2)-C细胞
RD细胞系相关产品:MDA MB231细胞、Hs281T细胞、KYSE0410细胞
HEK293-EBNA1细胞系相关产品:16HBE细胞、M21细胞、IPECJ2细胞
IHHA-1细胞系相关产品:G402细胞、BEL 7405细胞、TE-32细胞
OAW-42细胞系相关产品:SKNDZ细胞、Granta519细胞、NCIH2085细胞
BA/F3 Adherent小鼠原B细胞系
P3-X63-Ag8-6-5-3细胞系相关产品:JJN-3细胞、CT26细胞、HEK293-EBNA1细胞
HIBEC细胞系相关产品:NCI-BL1339细胞、DOK细胞、NG-108-15细胞
SCC-1395细胞系相关产品:mREC细胞、HCC-1500细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞
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TE 671细胞系相关产品:SCC15细胞、RT4细胞、SACCLM细胞
H295R细胞系相关产品:Mia PACA 2细胞、MM134细胞、H660细胞
SUDHL-8细胞系相关产品:SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞
SCC90细胞系相关产品:COLO.205细胞、U-373MG ATCC细胞、W256细胞
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Normal Rat Kidney细胞系相关产品:526 mel细胞、HVSMC细胞、Hepa-RG细胞
SKNBE(1)细胞系相关产品:WERI-Rb 1细胞、HCC-1588细胞、NBL_S细胞
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MADISON LUNG TA-109细胞系相关产品:PK136细胞、MIA PaCa-2细胞、C666-1细胞
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D-324MED细胞系相关产品:SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
KBM-5细胞系相关产品:BPH-1细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、Oregon J-111细胞
SF-767细胞系相关产品:SNU251细胞、IOSE-Mar细胞、CT 26细胞
HEL-1细胞系相关产品:SCC 4细胞、Adeno-293细胞、H2052细胞
HGSMC细胞系相关产品:TE12细胞、RC92A细胞、NCI H82细胞
KNS62细胞系相关产品:LLC-MK-2细胞、AML12细胞、SKNEP-1细胞
MLE 12细胞系相关产品:MLA144细胞、MDA MB 453细胞、GM03569细胞
J-82细胞系相关产品:293EBNA细胞、MDA-175细胞、NCI-H2172细胞
Sp2/O-Ag14细胞系相关产品:MUVEC细胞、SJ-RH30细胞、H-87细胞
KMB-17细胞系相关产品:TE354T细胞、IOSE-80细胞、Med 283细胞
WM266-4细胞系相关产品:MeT 5A细胞、OUMS23细胞、SGC7901细胞
RPMI No. 1846细胞系相关产品:NCI-H2081细胞、MDA-MB-231 #4175细胞、SK-OV-3细胞
EST50细胞系相关产品:CCD-1095Sk细胞、GLRK 13细胞、SKES1细胞
HEC1A细胞系相关产品:NCIH2029细胞、GES1细胞、Bac12F5细胞
OSRC2细胞系相关产品:GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞
H-510细胞系相关产品:LC-2 ad细胞、FHL124细胞、SK-BR3细胞
hTERTHME1细胞系相关产品:SK-MEL-3细胞、PaCa2细胞、LY-R细胞
639 V细胞系相关产品:CD18细胞、V-79-4细胞、FCCH1024细胞
Ramos (RA 1)细胞系相关产品:hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
H774细胞系相关产品:IAR 20细胞、C28/I2细胞、Functional Liver Cell-7细胞
MDA-MB-231-luc细胞系相关产品:211H细胞、Co320细胞、HFF1细胞
NCIH508细胞系相关产品:UACC893细胞、SUM-52PE细胞、Evsa T细胞
L02细胞系相关产品:NCI-H1651细胞、NCI-H1435细胞、B958细胞
BA/F3 Adherent小鼠原B细胞系
EA hy 926细胞系相关产品:GM00637B细胞、SUDHL-6细胞、HS-68细胞
BMF细胞系相关产品:TK10细胞、SW 1990细胞、N9细胞
WERIRb1细胞系相关产品:Clone 15 HL-60细胞、HCC0070细胞、Ly18细胞
EC9706细胞系相关产品:EA hy 926细胞、COR-L 105细胞、McA-RH 8994细胞
HCET细胞系相关产品:NCI H295R细胞、FM88细胞、EA.hy 926细胞
H-1581细胞系相关产品:NCI-H841细胞、HLE细胞、YH细胞
HL7702细胞系相关产品:HPAFII细胞、MCAEC细胞、H-1373细胞
Huh7.5.1细胞系相关产品:H716细胞、MM96L细胞、LoMeT-ccRcc细胞
H4-II-EC3细胞系相关产品:SUM-190细胞、SKRC-20细胞、T241细胞
MDAMB361细胞系相关产品:HuH-6细胞、Hs606细胞、SEM细胞
NE1细胞系相关产品:LS 180细胞、Mac-1细胞、FOXNY细胞
SUSM1细胞系相关产品:SW 527细胞、NCI-H1568细胞、MCF-12F细胞
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