"MKN1 Adherent人胃癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
MKN1 Adherent人胃癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
HCC94细胞系相关产品:HCC-2218细胞、AN-3细胞、H2227细胞
LU-65M细胞系相关产品:OE19细胞、LL/2细胞、NCIH1436细胞
HR-1细胞系相关产品:HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PSN1细胞系相关产品:SVEC4-10细胞、TOV21G细胞、DiFi细胞
BLO11细胞系相关产品:H508细胞、H522细胞、C918细胞
32D.3细胞系相关产品:TKB-1细胞、Hs 636.T细胞、Capan1细胞
细胞生长特性:贴壁生长
MKN1 Adherent人胃癌细胞系
细胞形态特性:上皮细胞
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
WI38细胞系相关产品:NCIH748细胞、WC00059细胞、CCRF/CEM-C7细胞
PLA 802细胞系相关产品:MCF-7ADR细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、MGH-UI细胞
AK细胞系相关产品:Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、HGMC细胞、TE-13细胞
MX1细胞系相关产品:BXPC3细胞、ASH-3细胞、Lu-65细胞
OCI Ly19细胞系相关产品:H-3255细胞、M-20细胞、HCC70细胞
A875细胞系相关产品:SNU182细胞、U2932细胞、H820细胞
AE 1201细胞系相关产品:Ly10细胞、L-5178-Y细胞、SNU-1040细胞
RH35细胞系相关产品:Hs606T细胞、SK-N-BE(2)C细胞、HCE-T细胞
HEK293E细胞系相关产品:RPMI-7951细胞、H920细胞、Tn-5B1-4细胞
VE细胞系相关产品:GC-2spd(ts)细胞、LM3细胞、EA.Hy926细胞
8505C细胞系相关产品:BGC823细胞、NCI-H1930细胞、Danio rerio Gill细胞
CMT 167细胞系相关产品:LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞
Rh30细胞系相关产品:HT 115细胞、Ramos.G6.C10细胞、JM-Jurkat细胞
MKN1 Adherent人胃癌细胞系
PA-TU-8988S细胞系相关产品:NCI-H2286细胞、OVCA 420细胞、MDA1386细胞
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SP-2细胞系相关产品:FBHE细胞、U-226AR1细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞
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RGB细胞系相关产品:RL细胞、LTEP a2细胞、SK-MES细胞
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H-2107细胞系相关产品:rUCMSCs细胞、HDQP1细胞、H-1688细胞
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38C-13细胞系相关产品:MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞系相关产品:Hep-3B细胞、KM12 SM细胞、HEK293E细胞
SW-839细胞系相关产品:OCILY19细胞、H-87细胞、Hi5细胞
SNU-C1细胞系相关产品:NGP细胞、GLAG-66细胞、Ly7细胞
Kit 225细胞系相关产品:NCC-IT细胞、MC3T3-L1细胞、NFHIOSE-29细胞
CEM-C7细胞系相关产品:CAL120细胞、NOMO-1细胞、Farage OL细胞
HLEC细胞系相关产品:50.B1细胞、HEK293A细胞、KE-39细胞
Hs578Bst细胞系相关产品:RCC10 RGB细胞、A427细胞、EFM192C细胞
LAN-1细胞系相关产品:NCIH460细胞、KMM1细胞、BTI-Tn5B14细胞
AMO1细胞系相关产品:RKO-AS-45-1细胞、MHCC 97-L细胞、OPM2细胞
MSTO-211 H细胞系相关产品:H-1666细胞、L5178Y-R细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞
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NCIH2227细胞系相关产品:OK细胞、RCC-JF细胞、HMrSV5细胞
WM 2664细胞系相关产品:TE-9细胞、SK-MEL24细胞、MV411细胞
D-324MED细胞系相关产品:SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
SK-N-BE(2)细胞系相关产品:H2023细胞、NEC8细胞、CALU 1细胞
MKN1 Adherent人胃癌细胞系
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞系相关产品:L 540细胞、RMC细胞、P3-X63-Ag8-653细胞
DSL-6A-C1细胞系相关产品:HTh 74细胞、SW-1271细胞、HMEC细胞
RSC-96细胞系相关产品:SKRC-52细胞、769-P细胞、SUM 52PE细胞
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TE3A细胞系相关产品:U266B1细胞、AdHek细胞、CoCL3细胞
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