"SK-MEL-1 Adherent人皮肤黑色素瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SK-MEL-1 Adherent人皮肤黑色素瘤细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
NCI-H78细胞系相关产品:SK LU 1细胞、PK-136细胞、HEL-1细胞
Psi-2-DAP细胞系相关产品:EAC-E2G8细胞、IEC-6细胞、OKa-C-1细胞
Me-Wo细胞系相关产品:CEM细胞、HO1-N-1细胞、SW837细胞
细胞传代方法:维持细胞浓度在1×105-2×105,每周补液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HIT细胞系相关产品:SUM-52细胞、PLA801C细胞、MEL-526细胞
SK MEL 28细胞系相关产品:Fetal Human Colon细胞、NP69细胞、HREC细胞
NS20-Y细胞系相关产品:F442-A细胞、HeLa229细胞、FM-88细胞
细胞生长特性:悬浮生长
SK-MEL-1 Adherent人皮肤黑色素瘤细胞系
细胞形态特性:球形的
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品:RINm-5F细胞、3T3-Swiss albino细胞、EBC1细胞
HT-1080细胞系相关产品:AMJ2C8细胞、Capan-2细胞、U266细胞
CF-1 MEF细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-62细胞、RM1细胞、NCI-H-82细胞
OC-316细胞系相关产品:ZR75_1细胞、HT-115细胞、alpha-TC1.6细胞
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B 95-8细胞系相关产品:DHL-4细胞、HR8348细胞、OCI-Ly 8细胞
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PLC-8024细胞系相关产品:aTC1-6细胞、BT-B细胞、AMC-HN8细胞
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16HBE细胞系相关产品:MC38细胞、RASMC细胞、SNB.19细胞
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KYSE30细胞系相关产品:MCF7/WT细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞、HCA7细胞
SK-MEL-1 Adherent人皮肤黑色素瘤细胞系
TE-85 clone 5细胞系相关产品:TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞
NCIH3255细胞系相关产品:EAhy 926细胞、A-375细胞、VK2 (E6/E7)细胞
A-1847细胞系相关产品:SL-29细胞、HuTu-80细胞、6-T CEM细胞
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MH7A细胞系相关产品:HOK细胞、BHP-10细胞、H1793细胞
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HELA-GFP细胞系相关产品:251MG细胞、NCI-128细胞、HuPT4细胞
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H510细胞系相关产品:OCI-LY-1细胞、BEL7404细胞、IMR-90细胞
HEL299细胞系相关产品:SKOV3细胞、SK.OV.3细胞、TGBC11T细胞
NCIH208细胞系相关产品:L6565细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、M-G63细胞
COLO 206F细胞系相关产品:PLA 802细胞、CCD 966 SK细胞、Hi-five细胞
Z310细胞系相关产品:NCI660细胞、NCI-H2122细胞、TE354.T细胞
LAD 2细胞系相关产品:GC-1细胞、SN4741细胞、Hs 746T细胞
HUT28细胞系相关产品:COLO 320 HSR细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞、QSG7701细胞
PZ-HPV-7细胞系相关产品:NCI-SNU-216细胞、174xCEM.T2细胞、HEK-293FT细胞
U-2-OS细胞系相关产品:AM-38细胞、NCI-H2087细胞、SUM149-PT细胞
NCI-BL6细胞系相关产品:HEC251细胞、TE15细胞、BJ1细胞
Hs 675.T细胞系相关产品:PanC1细胞、KYSE-270细胞、NHEK细胞
Hs 675.T细胞系相关产品:PanC1细胞、KYSE-270细胞、NHEK细胞
OVCAR4细胞系相关产品:PL45细胞、Duke University 145细胞、H-2195细胞
U266 Bl细胞系相关产品:H1651细胞、TM4细胞、SU.86.86细胞
BJA-B-1细胞系相关产品:GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞
Hs 578.Bst细胞系相关产品:H-2107细胞、MPC-5细胞、HL-60细胞
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CG4细胞系相关产品:PaTu 8988s细胞、PLC/PRF/5细胞、HCC1954-BL细胞
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MPC-83细胞系相关产品:PL9细胞、MC 116细胞、H1355细胞
H-460细胞系相关产品:GLC-82细胞、RT-4细胞、B16F0细胞
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3T3 Swiss Albino细胞系相关产品:OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞
Me Wo细胞系相关产品:MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞
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